dNTP和引物清除剂北京现货促销

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百奥莱博专业生产销*(代"售")dNTP和引物清除剂北京现货促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：dNTP和引物清除剂北京现货促销
编号：BTN131141
产地：国产|进口
规格：100次
英文名：dNTP-Primer Scavenger
本产品是基于酶学方法的一步法清除dNTP和引物的试剂，用于在PCR结束后去除残留的dNTP和引物，使PCR产物可以不经过任何形式的回收而直接用于后续的测序等反应。



储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

dNTP和引物清除剂北京现货促销正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·一站式Blue Native PAGE电泳套装
编号：BTN120642
英文名称：One-Stop Blue Native PAGE Pack
规格：30次

·葡萄球菌RNA提取试剂盒
编号：BTN130842
英文名称：Staphylococcus RNA extraction kit
规格：50次

·Zenker固定液
编号：BTN131223
英文名称：Zenker Fixative Solution
规格：250mL
Zenker固定液是常用的混合型固定液，是细胞学及病理学常用的固定剂之一，由重铬酸*、生汞、乙酸和水混合而成。用该固定液固定的组织，细胞核及细胞浆染色十分清晰，特别是要显示免疫球蛋白、病毒包涵体(如Negri小体)、骨骼肌的横纹等组织时，应用本液可获得良好的结果。

产品特点：
1．Zenker固定液对细胞核固定效果较好，较适合于造血和网状内皮组织等样品的固定。
2．Zenker固定液不能用于保存细胞颗粒，红细胞及含铁血黄素。对含血量较多的组织标本不建议使用Zenker液固定。
3．常作为三色染色的组织固定剂，在三色染色中还作为媒染剂使用。
4．固定时间一般需要12-24小时。

产品组成：

 

成分	规格
溶液A	250ml
溶液B	15ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
1．配制适量体积的Zenker 固定液，按照19:1的比例将溶液A和溶液B混合，搅拌均匀，所得溶液即为Zenker 固定液工作液。注：Zenker 固定液工作液建议即配即用。
2．标本修块，置入Zenker 固定液工作液内固定12～24h(根据样品材料、大小不同，固定时间可能会有较大差异)。
3．固定后，用流水冲洗12h，或者亚硫*(代"酸")*溶液冲洗，也可用1%的*水溶液洗涤。在70%酒精脱水时加入碘(配成0.5%碘酒)脱汞。
4．常规方法脱水、透明。

注意事项：
1．由于Zenker 固定液中含*化汞，固定后必须脱汞。
2．固定后，组织必须用流水冲洗去除重络酸*否则乙醇脱水会引起络显色。
3．本固定液不能用金属容器盛放，组织固定后，也不能用金属镊夹取。


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·即用型蓝白T载体A型(T7-SP6，有MCS)
编号：BTN60603
英文名称：Instant Blue-White Vector T，Type A
规格：20次
本产品是用Xcm I酶切环状的可保种型蓝白T载体(BTN60803)去掉一段1.3Kb的插入片段后得到的线性DNA片段(载体部分)，其两个末端的5´都有一个突出的T，可以用于快速克隆具有加尾活性的耐热酶(如Taq DNA聚合酶)扩增得到的PCR片段。

产品特点：
1. 由于是通过Xcm I酶切制备，所以载体两端的带T率为100%，远高于用Taq DNA聚合酶和TdT末端转移酶在平末端载体加尾得到的T载体。
2. 克隆的阳性率一般在90%以上，缩短了筛选过程。
3. 插入位点两侧有对称的常见酶切位点(如EcoR I)，便于对克隆的PCR片段进行近一步的分析。
4. 克隆位点两侧分别有T7和T3 RNA聚合酶启动子，便于用克隆的PCR片段制备RNA探针。
5.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
6. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α-肽编码区内，可以进行蓝白斑筛选。
7.含有丝状噬菌体f1 复制起始子，可以制备单链DNA。

产品组成：

成分	规格
即用型蓝白T载体(40ng/uL)	20μl
阳性对照(40ng/uL)	5μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

使用方法：

一. PCR产物的纯化和定量
1. 将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳分离。最好不要使用TBE缓冲液，因为它会影响DNA的胶回收效率。
2.在长波(360nm)紫外灯下快速切胶，尽可能切掉多余的凝胶。为避免嘧啶二聚体的形成，可以使用百奥莱博的DNA防护剂UV Scavenger(BTN60601)。
3. 用百奥莱博的柱式DNArc(BTN60202)纯化回收PCR片段。溶解PCR片段的超纯水体积越小越便于后续操作。
4. 将回收的片段与浓度已知的DNA Marker在含EB(BTN3180)或绿如蓝染料(BTN70303)的琼脂糖凝胶中电泳，通过比较DNA条带的荧光强度而估测PCR纯化产物的浓度。注意：一般不推荐使用测OD260的方法，因为回收的DNA很珍贵，该方法需要比较多的DNA。
5. 如果所得的DNA片段浓度较低，可以使用本公司核酸浓缩剂(BTN110801)将其浓缩到需要的浓度。
6. 如果PCR片段为平末端，则需要用加A试剂盒处理，否则不能用于与T载体的连接反应。

二. 连接反应
1. 短暂离心装有T载体的离心管。
2.在两个离心管中加入下列成分：

成分	样品管	负对照	正对照
自备T4 Ligase Buffer，10×	1μl	1μl	1μl
蓝白T载体(40 ng/uL)	1μl	1μl	1μl
自备PCR纯化产物	见下注	不加	不加
阳性对照(40ng/uL)	不加	不加	1μl
自备T4 Ligase(5-10U/μL)	1μl	1μl	1μl
补超纯水到	10μl	10μl	10μl

注：PCR纯化产物与蓝白T载体的摩尔比最好为3-10，可以按下面的公式计算出连接反应中需要的PCR纯化产物的ng数:

假如插入片段和载体的连接比例设定为3，连接反应中加入蓝白T载体(长度为3Kb)的量为40ng，则需要长度为0.5Kb的PCR纯化产物的量是:

3. 用移液器吹打连接反应使之混匀后，16℃孵育12小时(或按T4 Ligase供货商提供的说明书进行连接)。

三. 细菌转化
1. 将100μL感受态细胞于冰上解冻。注意：最好使用转化效率在1×108cfu/μg DNA以上的感受态细胞进行转化，因为采用单碱基突出端进行连接不是很有效。
2. 取5μL连接产物加入到感受态细胞中，轻轻旋转几次以混匀内容物。在冰上放置30分钟。
3. 将管放入预加温到42℃的水浴中，热休克90秒。快速将管转移到冰浴中。


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