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-20℃保存
- 保质期:
1年
- 英文名:
Staphylococcal protein A
- 库存:
856
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货重组蛋白A厂家,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货重组蛋白A厂家
规格:1mg
英文名:Staphylococcal protein A
编号:BTN131079
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
本品为重组蛋白A,分子量32kD,纯度>90%,带His标签。
储存条件:-20℃保存,有效期1年。
我公司的北京现货重组蛋白A厂家,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·放线菌*(代"素")D
编号:BTN120680
英文名称:Actinomycin D Solution
规格:1mL
本品为浓度为1mg/mL 放线菌*(代"素")D的DMSO溶液。放线菌*(代"素")D(更生霉素;Cosmegen、Meractinomycin),分子式为C62H86N12O16,分子量:1255.41。可作为代谢抑制剂,细胞质膜研究。它能抑制RNA的合成,作用于mRNA,干扰细胞的转录过程,阻止蛋白质的合成。吞食有极高毒性。
抗性机制:放线菌*(代"素")D分子中含有一个*氧环结构,通过它连接两个等位的环状肽链。此肽链可与DNA分子的脱氧鸟嘌呤发挥特异性相互作用,使dactinomycin D嵌入DNA双螺旋的小沟中,与DNA形成复合体,阻碍RNA多聚酶的功能,抑制RNA的合成,特别是mRNA的合成。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
·一步式细菌DNA提取试剂盒
编号:BTN60806
英文名称:One-step Bacteria DNA extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在一步裂解式超快细菌基因组DNA提取试剂,其最大特点是快速,可以用于绝大多数革氏阳性和阴性细菌基因组DNA的快速提取。
试剂盒特点:
1. 操作简单,整个过程不到10分钟(对一个样品而言)。
2.产率一般在3-10μg/mL过液培养细菌。
3. OD260/280一般在1.8以上。
4. DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
5.适用范围广,可以使用于绝大多数细菌。
6. 也可以使用过夜培养细菌和菌落。
7. 得到的DNA可以直接用于PCR,酶切或其他分子生物学实验。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶菌酶 | 600mg |
| 一步式细菌裂解液 | 25ml |
| 专用上柱液 | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(溶菌酶需要冰袋运输,-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
一: 对革氏阴性细菌
1. 如果一步式裂解液产生沉淀,需要65℃预热直到沉淀溶解,摇匀待用。
2. 将0.1-1.5mL过夜培养的菌液转移到1.5mL塑料离心中,室温12000rpm离心1分钟沉淀细菌,弃上清。
3. 加入0.5mL一步式细菌裂解液到离心管中,吹打混匀。
4. 加入0.5mL专用上柱液到裂解液中,颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中,室温放置至少2分钟。
5. 12000rpm室温离心1分钟,DNA将吸附在离心吸附柱的膜上,倒弃收集管中的穿透液。
6. 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃穿透液。
7. 重复第6步操作一次。
8. 空甩半分钟,将离心吸附柱转移到新的离心管中。
9. 加50-100μL DNA洗脱液,室温放置3~5分钟。
10. 12000rpm室温离心1分钟即得DNA溶液。
二: 对革氏阳性细菌
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的细菌离心1分钟后,重悬于0.6mL溶菌液中(60mL自备超纯水+600mg溶菌酶),颠倒混匀5-10次后37℃保温30分钟(有的菌种可能需更长时间,需要自己根据细菌不同而决定)。
2. 12000rpm离心10分钟,小心弃上清。
3.后续处理接革氏阳性细菌处理的第3步。
北京现货重组蛋白A厂家关键词:Staphylococcal protein A,BTN131079,重组蛋白A
·ATP溶液(2.5mM)
编号:BTN131216
英文名称:ATP Solution,2.5mM
规格:2mL
ATP分子式为C10H13N5O13P3Na3,分子量是573.1,消光系数为15.4×103 M-1×cm-1(pH7.0),λmax为259nm。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·终点显色法内毒素定量试剂盒
编号:BTN120415
英文名称:Chromogenic End-point TAL Kit
规格:32次
鲎试剂为鲎科动物东方鲎(TAL)的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品,鲎试剂中含有C因子等跟凝血有关成分,当细菌内毒素激活C因子时会,起一系列酶促反应,激活凝固酶原形成凝固酶,凝固酶分解人工合成的显色基质,使其分解为多肽和黄色的对硝基*(代"*")胺(pNA,λmax=405nm)。在一定时间内,pNA的生成量与细菌内毒素浓度成正相关,据此,可以通过测定样品405nm的光吸收来用外标准法定量样品的内毒素浓度。其原理图如下(TAL和图中LAL相同):
本试剂盒就是基于上述原理开发而成,并进行了重大改进,增加了偶氮化试剂染色硝基*(代"*")胺(pNA)的步骤,此步使得反应的最终颜色变成玫瑰红色(λmax = 545nm),避免了深颜色样品本身的颜色对405nm处吸收峰的干扰,结果更加准确可靠。
产品特点:
1.一站式,提供所需的试剂、内毒素对照和无热源的耗材,为用户省去繁琐的准备工作。
2. 灵敏度高,可以对浓度在0.1EU/mL-1EU/mL和在0.01EU/mL -0.1EU/mL两个浓度范围的内毒素样品进行定量。
3. 比经典的pNA法多一步偶氮化染色的步骤,处理样品的范围更广,结果更加稳定可靠。
4.样品中如含有β-葡聚糖,则需选用特异性显色基质鲎试剂盒,因为β-葡聚糖会产生G因子旁路反应,干扰内毒素检测。
5. 若样品含头孢类抗菌素或磺胺制剂,则需要选用不含偶氮化试剂的鲎试剂盒,因为上述成分也能跟本试剂盒中的偶氮染色剂发生偶联反应而干扰偶氮化显色。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 细菌内毒素标准品 15EU | 2支 |
| 鲎试剂 | 2支×1.7mL |
| 显色基质 | 2支×1.7mL |
| 偶氮化试剂1 | 2支×10mL |
| 偶氮化试剂2 | 2支×10mL |
| 偶氮化试剂3 | 2支×10mL |
| HCl(反应终止剂) | 50ml |
| 细菌内毒素检查用水 | 50ml×2瓶 |
| 除热原试管,10×75mm | 10×5支 |
| 除热原吸头,1ml | 10×4支 |
| 除热原吸头,0.2ml | 10×5支 |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃避光保存,有效期两年。
使用方法:
一、样品的预处理
1.若样品的本底在545nm的吸光度值大于0.5,必须对样品进行稀释后再检测。
2.若样品颜色较深(例如溶血),或在酸性条件下颜色加深(例如一些组织培养介质),必须设置样品空白管以扣除样品自身的颜色本底。样品空白管不加入鲎试剂,以等体积的细菌内毒素检查用水代替。其余操作同样品管。
3.本检测方法高度灵敏,故接触试剂及样品的所有器皿必须是除热原的。除热原指内毒素浓度小于0.005 EU/ml。玻璃器皿可经250℃干烤至少60分钟去除热原。实验过程应防止细菌的污染(内毒素即细菌的LPS)。
4.待测样品的pH值应在6.0–8.0之间,若超出此范围,需用自备的除热原的缓冲液、0.1M*氧化*或0.1M盐*(代"酸")调节。
二、试剂准备
5.细菌内毒素标准溶液配制(制备标准曲线用):取细菌内毒素标准品1支,按细菌内毒素标准品使用说明(见附2)稀释为10EU/mL的内毒素溶液,再稀释为1.0EU/mL的内毒素溶液,最后按下表以1.0EU/mL的内毒素溶液为母液,在A-D四个离心管中稀释成0.1、0.25、0.5、1.0 EU/mL的浓度梯度。配制好的内毒素标准溶液应在4小时内用完。注意:也可以选择0.01、0.025、0.05、0.1EU/mL的浓度梯度。注意:标准品浓度范围不同,后续显色实验的保温时间也不同。
| 成份 | A管 | B管 | C管 | D管 |
| 细菌内毒素检查用水(mL) | 0 | 0.5 | 0.75 | 0.9 |
| 1EU/ml内毒素溶液(mL) | 1 | 0.5 | 0.25 | 0.1 |
| 内毒素浓度(EU/mL) | 1 | 0.5 | 0.25 | 0.1 |
6.阴性对照用细菌内毒素检查用水。
7.配制鲎试剂、显色基质、偶氮化试剂等试剂的工作液。
(1)鲎试剂:按标签标示量加细菌内毒素检查用水于鲎试剂中,轻轻振摇使鲎试剂完全溶解,得鲎试剂工作液。注意不要用旋涡混匀剧烈振摇。鲎试剂工作液应在10分钟内用完。
(2)显色基质:按标签标示量加细菌内毒素检查用水于显色基质中,轻轻振摇使显色基质完全溶解,得显色基质工作液。显色基质工作液可在无污染的条件下于4℃贮存8小时以内。
(3)偶氮化试剂1:按标签标示量加反应终止剂(注意:不是细菌内毒素检查用水)于偶氮化试剂1瓶中,得偶氮化试剂1工作液。
(4)偶氮化试剂2:按标签标示量加细菌内毒素检查用水于偶氮化试剂2瓶中,得偶氮化试剂2工作液。
(5)偶氮化试剂3:按标签标示量加细菌内毒素检查用水于偶氮化试剂3瓶中,得偶氮化试剂3工作液。偶氮化试剂工作液可于4℃贮存1周。
三、实验操作
8.取本试剂盒提供的无热原试管6管,按下表操作(每加一个试剂均需要充分混匀,或用移液器轻柔吹打混匀):NC为阴性对照,PC为阳性对照。
| 成份 | NC 1管 | PC 4管 | 样品 1管 |
| 细菌内毒素检查用水(μL) | 100 | - | - |
| 内毒素标准溶液(μL)(4种) | - | 每种分别100 | - |
| 待测样品(μL) | - | - | 100 |
| 鲎试剂工作液(μL) | 100 | 100 | 100 |
| 混匀,37ºC温育T1分钟 | |||
| 显色基质溶液(μL) | 100 | 100 | 100 |
| 混匀,37ºC温育T2分钟 | |||
| 偶氮化试剂1工作液(μL) | 500 | 500 | 500 |
| 偶氮化试剂2工作液(μL) | 500 | 500 | 500 |
| 偶氮化试剂3工作液(μL) | 500 | 500 | 500 |
| 混匀,静置5分钟,于λ545nm测OD值 | |||
特别注意:每个批次的T1和T2不同。对本批次。
四、数据处理
9.建标准曲线:Y=bX + a,其中Y为545nm处吸光值,X为内毒素浓度,b为直线斜率,a为Y轴截距。
10.当实验数据同时满足如下三个条件时实验才有效:
(1)标准曲线的相关系数r≥0.980,
(2)标准曲线最低点的Y值大于阴性对照的Y值,
(3)待测样品平行管的平均值在标准曲线的区间内。
附1:待测样品的干扰实验
当样品中可能存在鲎实验的干扰物质时,须进行干扰实验。待测样品的干扰实验详见《中华人民共和国药典》2010细菌内毒素检查法》的“光度测定法干扰实验”。当鲎试剂、待测样品的来源、配方、生产工艺改变或实验环境中发生了任何有可能影响实验结果的变化时,须进行干扰实验,步骤如下:
1.选择标准曲线中点或一个靠近中点的内毒素浓度(设为λm),作为待测样品干扰实验中添加的内毒素浓度,配制含λm内毒素的待测样品阳性对照,测量出该溶液的内毒素浓度,称为Cs;
2.测量出未添加外源内毒素的待测样品溶液内毒素浓度,称为Ct;
3.计算该实验条件下的回收率R=(Cs–Ct)/λm×100%
4.当R在50%~200%之间,则认为在此实验条件下待测样品溶液不存在干扰作用。
5.当R在50%~200%之外,需对待测样品进行系列稀释(稀释倍数不得超过最大有效 稀释倍数MVD)或进行其它处理消除干扰,每一稀释溶液都重复步骤1-3,直到内毒素的回收率R在50%~200%之间。选择回收率R最接近100%的稀释倍数进行内毒素检测。
附2:细菌内毒素标准品使用说明
本品为白色疏松海绵状固体,系参照中国药品生物制品检定所的细菌内毒素工作标准品标定的大肠杆菌内毒素冻干品,供鲎实验中的鲎试剂灵敏度复核、干扰实验和各种阳性对照。其用法如下:
6.溶解:加入适量的细菌内毒素检查用水(BET水,最大加入量不得超过1mL),复溶后置涡旋混匀器上混匀15 min。
7.稀释:将上述内毒素溶液进一步用细菌内毒素检查用水稀释成各个不同浓度。每次稀释后必须在涡旋混匀器上混匀至少一分钟。每一步的稀释倍数均不得超过10倍。
8.本品为一次性使用。仅供体外鲎实验检测,禁止用于注射、口服等。
9.实验所用的器皿需经过处理,以除去可能存在的外源性内毒素,可以经250℃干烤至少60分钟处理,也可以采用其他确保不干扰细菌内毒素检测的适宜方法处理。实验操作过程中应该防止微生物的污染。
10.稀释的内毒素溶液静置时间超过10分钟,用前需要在涡旋混匀器上剧烈混匀1分钟,放置4小时以上的内毒素溶液应丢弃。
北京现货重组蛋白A厂家关键词:Staphylococcal protein A,BTN131079,重组蛋白A
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