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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
干冰运输、-80℃保存
- 保质期:
长期
- 英文名:
E.coli BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL Chemical Competent Cell
- 库存:
837
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞价格,产品信息:
类别:克隆与表达
英文名:E.coli BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL Chemical Competent Cell
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| 大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞 | BTN140378 | 10*100μl |
品牌:百奥莱博
英文名:E.coli BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL Chemical Competent Cell
编号:BTN140378
规格:10*100μl
本产品来源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株,缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶,从而减少对重组蛋白的降解,补充大肠杆菌缺乏的4 种稀有密码子(AGA、AUA、CCC、CUA)对应的tRNA(argU、ileY、proL、leuW),提高外源基因,尤其是富含AT-或GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3 区(DE3 区含有T7 噬菌体RNA聚合酶),可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达,同时具有四环素,*霉素,链霉素,壮观霉素抗性。本产品由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
菌株基因型为:F- ompT hsdS(rB-mB-)dcm+ Tetr galλ(DE3)endA Hte [argU proLCamr] [argU ileY leuW Strep/Specr]。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μl感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含有相应抗生素的LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm ,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
4. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM 均可)。
5. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞价格专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:E.coli BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL Chemical Competen,BTN140378,大肠杆菌BL21-CondonPlus,大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞
大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞由我公司长期专业供应,公司为广大顾客提供 大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞产品说明,生产厂家,价格,规格,哪里买 。公司遵循高品质的产品,高质量的技术服务,合理的价格,是国内研发与生产,销*(代"售")合为一体的一家大型企业,我们承诺:以最少的经费,最高的效率,得到您最需要的实验结果,同时我们承诺,若有质量问题,无条件退换。
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| 编号 | 类别 | 名称 |
| BTN130984 | 工具酶 | DNase I溶液 |
| BTN71002 | DNA纯化 | 凝固血液DNA提取试剂盒 |
| BTN120520 | 克隆与表达 | 大肠杆菌OrigamiB(DE3)化学感受态细胞 |
| BTN130891 | 蛋白质研究 | 动物线粒体总蛋白提取试剂盒 |
| BTN160688 | 克隆与表达 | 大肠杆菌TKB1化学感受态细胞 |
| BTN70503A | 核酸电泳和回收 | DNA marker(50-500bp) |
| BTN3290 | RNA纯化 | RNase抑制剂(人源)(40U/μL) |
| BTN70503T | 核酸电泳和回收 | DNA marker(250-15000bp) |
| BTN160686-25K | 克隆与表达 | SuperTOPO-Kan TA克隆试剂盒 |
| BTN140650 | 蛋白质研究 | 3mL亲和层析柱 |
| BTN130992 | DNA纯化 | 柱式酵母DNA提取试剂盒(玻璃珠法) |
| BTN131027 | 工具酶 | 胃蛋白酶 |
| BTN140654 | 其他生化试剂 | HEPES溶液(1M,pH7.3)(DNA级) |
| BTN120700 | 克隆与表达 | 利福平溶液 |
| BTN100902 | 其他生化试剂 | 5M异硫*酸胍溶液 |
| BTN140429 | 克隆与表达 | 大肠杆菌M15化学感受态细胞 |
| BTN80801 | DNA纯化 | 柱式拭子DNA提取试剂盒 |
| BTN130417 | 蛋白质研究 | 蓝胶琼脂糖 |
| BTN131008 | 蛋白质研究 | 弱RIPA裂解液 |
| BTN130659 | 工具酶 | 三磷酸腺苷双磷酸酶 |
| BTN100805B | RNA纯化 | Tris饱和酚-*仿-异戊醇混合液(DNA提取用) |
| BTN131096 | 蛋白质研究 | 生物素化的碱性磷酸酶 |
| BTN140382 | 克隆与表达 | 农杆菌AGL1化学感受态细胞 |
北京百莱博科技有限公司是克隆与表达产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞价格。
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文献和实验Optimizing E. coli-Based Membrane Protein Production Using Lemo21(DE3) and GFP-Fusions
Optimizing the conditions for the overexpression of membrane proteins in E . coli and their subsequent purification is usually a laborious and time-consuming process. Combining the Lemo21(DE3) strain, which conveniently allows to identify
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的生产任务”——因为很难亲眼观察微观世界中表达是如何进行的,当出现问题时,我们需要经验判断问题所在。宿主细胞对原核表达可能会产生哪些影响呢? 知其然还要知其所以然。比如,菌株内源的蛋白酶过多,可能会造成外源表达产物的不稳定,所以一些蛋白酶缺陷型菌株往往成为理想的起始表达菌株。堪称经典的BL21系列就是lon和ompT蛋白酶缺陷型,也是我们非常熟悉的表达菌株。大名鼎鼎的BL21(DE3)融源菌则是添加T7聚合酶基因,为T7表达系统而设计。 真核细胞偏爱的密码子和原核系统有不同,因此,在用原核系统
(三)菌株 工程菌BL21(DE3)pET-32a和工程菌BL21(DE3)p32aGFPuv。 【操作方法】 1.分别挑取工程菌BL21(DE3)pET-32a和BL21(DE3)p32aGFPuv的单菌落接种到5mLLB液体培养基(含氨苄,终浓度为100μg/mL,以下同)。 2.于37℃、250r/min培养
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