自诱导培养基(lac启动子) 培养基

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")自诱导培养基(lac启动子) 培养基，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：自诱导培养基(lac启动子) 培养基
英文名：Auto-induction Medium
品牌：百奥莱博
编号：BTN100825
产地：国产|进口
本产品是本产品是在pET 专用生长培养基的基础上开发而成的，它利用E.coli自身对培养基中不同碳源的调控利用机制，实现外源蛋白在细菌达到饱和生长期后的自动诱发。

产品特点：
1．本产品自动诱导表达，不需要添加任何IPTG或相关诱导物，节约成本。
2．免去了密切监控菌液密度的过程，尤其适合大规模筛选。
3．极大将细菌的生长密度OD600从2左右提高20以上。
4．极大提高外源蛋白的表达量，最高可占细菌总蛋白的45%。
5．与各种细胞培养容器(如培养瓶、培养罐、深孔管、发酵罐等)兼容。
6．本产品即开即用，非常方便。
7．适用于T7 RNA聚合酶基因由lac启动子控制的任何表达系统，如pET系列。
8．不适用于lacZ或lacY突变的宿主菌。

产品组成：

 

成分	规格
成分A	200ml
成分B	1.25ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

使用方法：

一、培养基的配制
1．配制自诱导培养基：将1.25mL溶液B全部加入到200mL的溶液A中即得自诱导培养基。
 注意：必须严格无菌操作，否则自诱导培养基非常容易长细菌。
2．贴好标签待用。如果长期时间不用，可以冻存在-20℃。

二、培养基的使用
1．将构建好的质粒转化入细菌，如BL21(DE3)，涂于自备的、含有1%葡萄糖的LB培养基中(需要加入适当浓度的抗菌素)，37℃培养过夜。
2．挑取单个细菌接种到自备的、含适当浓度抗菌素的液体LB培养基中，37℃培养直到菌液浑浊但不饱和(一般需要6-8小时)。
3．将所得菌液按千分之一的体积比例加入自诱导培养基中(如果自诱导培养基体积是100mL，则加入100μl菌液)，同时加入适当的抗菌素。注意：在自诱导培养基中，如果使用卡拉霉素，其终浓度比一般的培养基高，需要100μg/mL。由于本方法所得菌液密度大，故需要大量氧气，因此培养基的体积不能超过三角瓶的五分之一。三角瓶底最好是皱褶式的，这样摇晃中氧气供应更充分。
4．37℃培养过夜，或37℃培养到菌液饱和时降低摇床的温度到所需温度(对温度诱导型启动子)。
5．收集菌液开始蛋白纯化步骤。

我公司的自诱导培养基(lac启动子) 培养基，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")干粉(19:1)
编号：BTN130967
英文名称：Premixed Acr-Bis Powder
规格：100g
本产品为即用型丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺预混干粉(19:1)，用户可直接加入去离子水溶解即可得到丙*(代"烯")酰胺溶液，用于配制各种PAGE胶，如SDS-PAGE，Tricine-SDS-PAGE等。使用方便，避免了用户直接接触有毒的丙*(代"烯")酰胺和甲叉双丙*(代"烯")酰胺。

储存条件：常温运输及避光干燥保存，有效期一年。

·地塞米松
编号：BTN131234
英文名称：Dexamethasone DXM Solution
规格：1mL
本产品为浓度为50mg/mL的地塞米松乙醇溶液。地塞米松(Acido*(代"c")ont,Deronil,Dexacortal,dexametona)又名*美松、*甲强地松龙、德沙美松。分子式：C22H29FO5，分子量：392.5，CAS号：50-02-2。溶于乙醇。地塞米松属于糖皮质类激素，具有抗炎、抗过敏、抗风湿、免疫抑制等作用。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期6个月。

·*霉素溶液
编号：BTN60207
英文名称：Chloramphenicol Solution
规格：10mL
本产品是浓度为25mg/mL的*霉素溶液，可以加入到细菌液体或固体培养基中培养含*霉素抗性基因的细菌。

作用原理：*霉素通过与细菌核糖核蛋白体的50S亚基23S rRNA的A2451和A2452位点结合，抑制peptidyle transferase活性而阻断蛋白质的合成，最后抑制细菌生长。

抗性机制：抗性基因cat特异性表达*霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltrasnferase)，它通过乙酰化*霉素而使之不能与核糖体结合。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期6个月。


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·随机引物法DNA探针生物素标记试剂盒
编号：BTN90603B
英文名称：Random Primer DNA Labeling Kit(Biotin)
规格：5次
本试剂盒是基于Feinberg和Vogelstein发明的随机引物标记法而开发出来的即用型DNA探针标记试剂盒，标记过程由双链DNA热变性、随机引物与单链DNA结合、在Klenow DNA聚合酶催化下，引物的延伸合成DNA探针并掺入标记的核苷酸三步组成，可用下面的示意图表示：

本产品对Feinberg和Vogelstein经典方法进行了改良。

产品特点：
1. 提供的标记反应液整合了除酶和模板外的所有成分，简化了反应加样步骤，提高了标记反应的可重复性。
2. 使用无外切活性的Klenow exo- DNA聚合酶，已标记DNA探针不会被酶降解。
3.快速，最快1小时即可完成标记反应。
4. 得到的DNA探针比活性高(如果是同位素，可以达到109cpm/μg DNA)，检测灵敏度高。
5. 所需模版DNA量少(只需要10ng以上即可)，DNA可以是各种形状(线状和环状)的、也可以是单链或双链的，长度在100bp以上均可。
6. 得到的探针长度在200-400nt之间，可以用于Southern杂交、Northern杂交、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等。
7. 提供三种标记选择，其中BTN90603A可用于各种同位素标记和其他任何非同位素标记，但需自备标记底物；BTN90603B和BTN90603C可分别用于生物素和地高*(代"辛")标记，不需自备标记底物。

试剂盒组成：

成分	规格
2×A型标记反应液(自备标记物型)	50μl(仅A型有)
2×B型标记反应液(生物素型)	50μl(仅B型有)
2×C型标记反应液(DIG型)	50μl(仅C型有)
dATP,2mM	10μL(仅A型有)
dTTP,2mM	10μL(仅A型有)
dGTP,2mM	10μL(仅A型有)
dCTP,2mM	10μL(仅A型有)
Klenow exo-聚合酶(2U/μL)	5μl
超纯水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在一干净的硅化的塑料离心管中加入下列成分：

成分	用量
模板DNA	50-150ng
2×标记反应液(ABC三种之一)	10μl
超纯水	补水到15μl

注意：非同位素标记物由于疏水性强，容易与常用的塑料离心管表面非特异性结合，所以一定要使用硅化的塑料离心管。模板DNA并非越多越好，因为模板会在杂交反应中跟标记的探针杂交，竞争性地抑制探针跟靶分子的杂交。
2. 沸水浴5-10分钟，或在PCR仪上100℃加热5-10分钟使DNA模版充分变性，立即放冰上待用。注意：如果PCR仪器不能设置到100℃，99℃加热5分钟也可。
3.高速离心数秒使所有液体集中在管底，根据试剂盒类型加入下列成份：

试剂盒类型	成分及用量
BTN90603A型	dATP、dGTP、dCTP各1μl(共3μL，浓度均为2mM) 自备的2mM dTTP/标记dUTP混合物(见注)1μL 1μl Klenow exo聚合酶
BTN90603B型	1μl Klenow exo聚合酶 4μl超纯水
BTN90603C型	1μl Klenow exo聚合酶 4μl超纯水

注：上表中的dTTP/标记dUTP混合物中dTTP和标记的dUTP的总浓度为2mM(在20μL体系中混合液的终浓度为0.1mM，dTTP与生物素或DIG标记的dUTP的比例最好为65:35)。由于空间阻碍，并非标记生物素或DIG标记的dUTP越多灵敏度越高，一般dTTP与标记dUTP的比例在65：35为最佳。但如果使用自备的其他标记核苷酸，如fluorescein、hydroxycoumarin、resorufin和aminoallyl标记的dUTP，则用户需要自己摸索其与dTTP之间的最佳比例，如果使用32P标记的dUTP，则比活最好为3000Ci/mmol，浓度为好为10uCi/μL，并且不需要加入dTTP。
4. 轻柔吹打混匀。如有液滴沾在管壁上，高速离心数秒使所有液体集中在管底。
5. 37℃保温1-20小时。标记效率跟模版量和保温时间相关，具体见下表：

模版DNA用量	1小时后探针合成量	20小时后探针合成量
10ng	80ng	900ng
30ng	150ng	1.35μg
100ng	350ng	1.65μg
300ng	750ng	2.2μg
1μg	1.3μg	2.6μg
3μg	1.6μng	2.6μg

6. 加1μl自备的0.5M EDTA(pH8.0)终止反应，立即放冰上待用或放-20℃保存一年。用前需要加热100℃ 5分钟使DNA探针变性成单链，然后直接加入到杂交反应液中即可。如果电泳检测，标记产物将是弥散状态。
 注意：本方法标记核苷酸掺入率极高，因此可以不经纯化直接使用。如果需要纯化，注意不要用酚抽提法纯化非同位素(生物素、DIG和其他等)标记的DNA探针，因为这些标记分子疏水性强，能使标记的DNA进入疏水的有机相而丢失，但可以用乙醇沉淀和Sephadex G50回收(可另购非同位素探针柱式纯化试剂盒)。对比活高的同位素探针，由于其极其不稳定，因此应该立即使用，不要长久放置。


自诱导培养基(lac启动子) 培养基关键词：Auto-induction Medium,自诱导培养基(lac启动子),BTN100825

8042-47-5 Mineral oil 矿物油/石蜡油
过氧化*酶(CAT)检测试剂盒(紫外法)   100T
ARB12440 大鼠骨桥素(OPN)检测服务 Rat osteopontin,opn ELISA KIT
J0201 兔抗牛血清白蛋白抗血清 1ml/10ml
9001-12-1 胶原酶Ⅱ CollagenaseⅡ
BS固定液   500ml
PY02-383  乳糖亚硫*(代"酸")盐培养基  250克  
等离子体胺氧化酶 Silicon dioxide 9001-66-5
N-异丙基丙*(代"烯")酰胺 CM Sephadex C-50 2210-25-5
PY02-353  金氏(King,sB)培养基基础  250克  
9001-69-0 L-乳酸脱*酶 L-Lactic Dehydrogenase
BL1438 胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)不含酚红
草酸酰胺乙酯 L-Sorbose 617-36-7

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