自诱导培养基(lac启动子)

自诱导培养基(lac启动子)

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  • ¥890
  • 上海雅吉生物科技有限公司
  • 100825-200
  • 北京
  • 2025年07月16日
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      上海雅吉生物科技有限公司

    • 英文名

      Auto-induction Medium

    • 规格

      200 mL

    产品及特点:自诱导培养基(lac启动子)是本产品是在 pET 专用生长培养基的基础上开发而成的,它利用E.coli 自身对培养基中不同碳源的调控利用机制,实现外源蛋白在细菌达到
    饱和生长期后的自动诱发。本产品具有下列特点:
    1. 本产品自动诱导表达,不需要添加任何 IPTG 或相关诱导物,节约成本。
    2. 免去了密切监控菌液密度的过程,尤其适合大规模筛选。
    3. 极大将细菌的生长密度 OD600 从 2 左右提高 20 以上。
    4. 极大提高外源蛋白的表达量,最高可占细菌总蛋白的 45%。
    5. 与各种细胞培养容器(如培养瓶、培养罐、深孔管、发酵罐等)兼容。
    6. 本产品即开即用,非常方便。
    7. 适用于 T7 RNA 聚合酶基因由 lac 启动子控制的任何表达系统,如 pET系列。
    8. 不适用于 lacZ 或 lacY 突变的宿主菌
    自诱导培养基(lac启动子)规格及成分 : 200mL 立盒包装 成份 A 100825A 200 mL 成份 B 100825B 1.25 mL 使用手册 100825sc 1 份
    运输及保存 常温运输及保存,有效期两年。
    自备试剂 蒸馏水
    使用方法 一:培养基的配制
    1. 配制自诱导培养基:将 1.25 mL 溶液 B 全部加入到 200 mL 的溶液 A中即得自诱导培养基。注意:必须严格无菌操作,否则自诱导培养基非常容易长细菌。
    2. 贴好标签待用。如果长期时间不用,可以冻存在-20℃。
    二:培养基的使用
    1. 将构建好的质粒转化入细菌,如 BL21(DE3),涂于自备的、含有 1%葡萄糖的 LB 培养基中(需要加入适当浓度的抗菌素),37℃培养过夜。
    2. 挑取单个细菌接种到自备的、含适当浓度抗菌素的液体 LB 培养基中,
    37℃培养直到菌液浑浊但不饱和(一般需要 6-8 小时)。
    3. 将所得菌液按千分之一的体积比例加入自诱导培养基中(如果自诱导培养基体积是 100 mL,则加入 100 uL 菌液),同时加入适当的抗菌素。注意:在自诱导培养基中,如果使用卡拉霉素,其终浓度比一般的培养基高,需要 100 ug/mL。由于本方法所得菌液密度大,故需要大量氧气,因此培养基的体积不能超过三角瓶的五分之一。三角瓶底最好是皱褶式的,这样摇晃中氧气供应更充分。
    4. 37℃培养过夜,或37℃培养到菌液饱和时降低摇床的温度到所需温度(对温度诱导型启动子)。
    5. 收集菌液开始蛋白纯化步骤。
    自诱导培养基(lac启动子)关联产品 自诱导培养基(阿拉伯糖启动子专用,CAT120516)、零诱导培养基

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