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- 百奥莱博
- 北京
- BTN101002-XTJ
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输
- 保质期：
长期
- 英文名：
KOD DNA Polymerase
- 库存：
414
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京KOD DNA聚合酶厂商的品牌：百奥莱博，是优质的工具酶产品，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多KOD DNA聚合酶等工具酶产品请联系我司咨询订购。
名称：KOD DNA聚合酶
编号：BTN101002
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：250U
KOD DNA Polymerase是从克隆有Thermococcus Kodakaraensis DNA聚合酶基因的质粒在大肠杆菌中经诱导表达分离纯化而来。该酶所具有的超强3´→ 5´外切酶活性使得其扩增保真性比Pfu DNA Polymerase更高，保真性是Taq的约50倍，同时具有合成速度快的特点，聚合速度约为普通Pfu DNA Polymerase的5倍，Taq DNA Polymerase的2倍，达到100-138bp/秒，可以在短时间内获得高产量的扩增产物，特别适合于高保真地扩增6 kb以内的PCR产物，扩增所得的DNA为平末端，可用于基因克隆、表达及突变分析等分子生物学实验。
产品组成：
| 成分 | 规格 |
| KOD DNA聚合酶(5U/μL) | 5μl |
| 10×KOD DNA聚合酶缓冲液 | 1ml |
| dNTP mix(10mM Each) | 0.1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件：低温运输，-20℃保存、有效期一年。
活性定义：1U指75℃条件下，30分钟内使10nmoles的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
使用方法：
一、建议PCR条件(以50μl反应体系为例)
| 成分 | 体积 | 终浓度 |
| 模板 | - | ＜0.5μg |
| 正向引物(10μM) | 1μl | 0.2μM |
| 反向引物(10μM) | 1μl | 0.2μM |
| 10×KOD DNA聚合酶缓冲液 | 5μL | 1× |
| dNTPs(10mM each) | 1μL | 0.2mM |
| KOD DNA聚合酶 | 0.25-0.5μL(1.25-2.5U) | - |
| 超纯水 | 补足到50μL | - |
注：实际操作中计算好需补加水的量后，建议先加水，然后按上述顺序添加其它成分，最后添加KOD DNA聚合酶。最好在冰浴上混合PCR各种成分，防止KOD DNA聚合酶降解引物和模板。待各成分充分混匀后，离心数秒，使反应混合物沉到管底。然后将反应管置于PCR仪中进行扩增。
二、关于
PCR条件的优化
1.质粒或者噬菌体模板(模板量5-20ng，循环参数如下表)
| 循环参数 | 目标DNA<1kb | 目标DNA<2kb | 目标DNA3-4kb | 目标DNA5-6kb |
| Step 1 | 94℃ 2分钟 | 94℃ 2分钟 | 94℃ 2分钟 | 94℃ 2分钟 |
| Step 2 | 94℃ 20秒 | 94℃ 20秒 | 94℃ 20秒 | 94℃ 30秒 |
| Step 3 | Ta 20秒 | Ta 20秒 | Ta 20秒 | Ta 30秒 |
| Step 4 | 72℃ 20秒 | 72℃ 30秒 | 72℃ 40秒 | 72℃ 60秒 |
| Step 5 | 72℃ 5分钟 | 72℃ 5分钟 | 72℃ 5分钟 | 72℃ 5分钟 |
| Repeat step 2-4 for 30-35个循环 | ||||
| Ta=Tm－5℃ | ||||
2.基因组DNA和cDNA模板(基因组DNA模板量为50-100 ng，1-2μl cDNA(起始转录用的RNA为500 ng)，循环参数如下表)
| 循环参数 | 目标DNA<2kb |
| Step 1 | 94℃ 2分钟 |
| Step 2 | 94℃ 20-30秒 |
| Step 3 | Ta 15-20秒 |
| Step 4 | 72℃ 20-60秒 |
| Step 5 | 72℃ 5分钟 |
| Repeat step 2-4 for 30-35个循环 | |
| Ta= Tm - 5℃ |
关键词：BTN101002,KOD DNA Polymerase,KOD DNA聚合酶
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