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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输及保存
- 保质期:
两年
- 英文名:
RNAhold Bacteria RNA non-freezing preservation solution
- 库存:
314
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应BTN80601型非冻型细菌RNA保存液厂家,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:BTN80601型非冻型细菌RNA保存液厂家
品牌:百奥莱博
英文名:RNAhold Bacteria RNA non-freezing preservation solution
产地:国产|进口
规格:100mL
细菌用传统的RNA提取方法提取到的细菌RNA样品用于细菌基因表达谱研究时,不可避免地会遇到的一个问题,那就是得到的RNA材料并不能准确反映取样时细菌RNA的真实表达水平,原因之一是细菌RNA的正常衰变,细菌RNA的半哀期非常短,一般只有几分钟,哪怕是经过短暂的离心弃培养基处理过程,细菌RNA水平都会发生巨大改变。另一原因是细菌对环境改变的反应非常迅速,温度、密度、离心力等条件的变动都会导致细菌基因表达的迅速改变。上述两因素的叠加就会使实际得到的RNA 表达谱与真实的RNA表达谱之间有巨大的误差,所以传统的处理方法不适合于细菌RNA表达谱研究。为解决此问题,本公司特推出本产品。
产品特点:
1. 能快速渗透到液体培养基中的细菌内,抑制 RNA分子的降解或表达谱改变。
2. 操作简单,直接将本产品和液体样品按比例混合即可。
3.适用于各种细菌(包括革氏阳性和革氏阴性),也适用于其他微生物样品,如真菌和藻类等。
4. 重复性好,效果跟进口同类产品相当。
5.处理的样品可直接用于细菌总 RNA提取,也可以长期保存。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
使用方法:
1. 计算需要处理的液体细菌的体积。
2. 标记一个干净离心管,加入1/6体积的本产品。比如:如果需要处理的液体细菌的体积为600μl,则需要加入100μL本产品到收集管中。
3.预热装有本产品的离心管,使其温度跟待处理样品一样。如果是37℃培养的细菌,则预热温度为37℃。
4.快速将样品转移到离心管中,震荡5秒钟。
5.室温放置5分钟。
6. 8000-10000g室温离心 3~5分钟,弃上清液。
7.细菌沉淀可以直接用于总 RNA提取或放-80℃长期保存。
关于BTN80601型非冻型细菌RNA保存液厂家的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·限制性内切酶SpeI(BcuI)
编号:BTN17-0270
英文名称:Spe I(Bcu I) Restriction Endonuclease
规格:400U
Spe I限制性内切酶识别位点:
5´...A↓C T A G T...3´
3´...T G A T C↑A...5´
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Spe I,10U/μL | 40μl |
| Buffer B,10× | 1ml |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
贮存Buffer:Spe I储存液组成为:10mM Tris-HCl(pH7.5 at 25℃),300mM KCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,0.2mg/mL BSA and 50% glycerol。
1×Buffer B:33mM Tris-acetate(pH7.9 at 37℃),10mM magnesium acetate,66mM potassiu*(代"m") acetate,0.1mg/ml BSA。
活性定义:一个活性单位是指50μl反应体系中,37℃条件下,1小时内将1μg的对照组 DNA完全分解所需的酶量。对照组DNA为插入Spe I识别位点的pUC19载体。
热灭活:80℃孵育20分钟不能灭活该酶。
使用方法:
1.单酶切DNA:
①在离心管中加入下列溶液:
| 成分 | 用量 |
| Spe I | 0.5-2μL |
| 10× Buffer B | 2μL |
| DNA(0.5-1μg/μL) | 1μL |
| nuclease-free water | 16L |
②轻柔混匀,短暂离心。
③37℃孵育1-16小时。
2.双酶切或多酶切DNA:
需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液(一般Buffer B可作为双酶切Buffer),然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择,可以在一种酶消化完毕后进行纯化,纯化完毕后再进行另外一种酶切反应。
3.直接酶切PCR产品:
①在离心管中加入下列溶液:
| 成分 | 用量 |
| PCR reaction mixture | 10μL(~0.1-0.5μg of DNA) |
| nuclease-free water | 18μL |
| 10×Buffer B | 2μL |
| SpeI | 1-2μL |
②轻柔混匀,短暂离心。
③37℃孵育1-16小时。
BTN80601型非冻型细菌RNA保存液厂家关键词:RNAhold Bacteria RNA non-freezing preservation sol,BTN80601,非冻型细菌RNA保存液
·乙*(代"烯")乙二醇
编号:BTN131118
英文名称:Ethylene Glycol
规格:200mL
乙*(代"烯")乙二醇为比甘油更稳定的稳定剂。
产品特点:
1.特异性的纯化,能够去除醛类、过氧化物、铁及具有紫外吸收的烃类。
2.适于储存酶而不会损失活性。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·即用型LB平板培养基(无抗)
编号:BTN130848A
英文名称:LB Petri Dish
规格:10块
本产品为即用型LB平板培养基,A型为无抗生素LB平板,B型为LB-Amp平板,C型为LB-Kan平板,LB-Tet平板。
储存条件:低温运输及保存,有效期半年。
·红色DNA上样液,6×
编号:BTN3690A
英文名称:DNA Loading Buffer(Red)
规格:10mL
DNAload可以作DNA上样液用,含甘油和红色染料(BTN3690A)或蓝色染料(BTN3690B),便于直接上样和观察电泳进程。含红色染料的3690A还可以直接加到PCR反应体系中,不会干扰PCR反应,PCR结束后可以直接电泳,其红色染料泳动速度与50bp DNA片段相当,对绝大多数PCR片段的观察不会造成干扰,尤其适用于长度在2 Kb以下的DNA片段的电泳。含蓝色染料的BTN3690B其染料为*酚兰和二甲*蓝,适合于基因组合DNA和其他大片段DNA的电泳。本产品与TAE、TBE和百奥莱博的超快电泳缓冲液SuperBuffer-2 兼容。
试剂盒组成:
| 成分 | 10mL(A) | 10mL(B) |
| RNAep | 10ml(红色) | 10ml(蓝色) |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃(短期)或-20℃(长期)保存有效期一年。
使用方法:
DNA电泳(对BTN3690A和BTN3690B)
DNAload 为6×浓缩液,按5:1的比例将DNA样品与本产品混合(如10μl DNA样品+2μl 本产品),直接上琼脂糖凝胶电泳(以TAE或TBE 为电泳缓冲液),根据胶的大小选择合适的电压进行电泳,电泳完毕后可直接将凝胶放在紫外灯下观察结果。
加入PCR中使用(仅对BTN3690A)
DNAload 为6×浓缩液,如果加入到PCR 体系中,需要使其终浓度为1×,具体用量需要根据PCR 体积决定,PCR结束后直接上样电泳。注意:不能将3690B 加到PCR 体系中,因为其染料抑制Taq DNA聚合酶活性。
BTN80601型非冻型细菌RNA保存液厂家关键词:RNAhold Bacteria RNA non-freezing preservation sol,BTN80601,非冻型细菌RNA保存液
·葡萄球菌RNA提取试剂盒
编号:BTN130842
英文名称:Staphylococcus RNA extraction kit
规格:50次
·RNA电泳液,10×
编号:BTN3150
英文名称:10×RNAep Buffer
规格:250mL
本品是预配的10×RNA专用电泳液,专门用于RNA甲醛变性胶电泳分析,产品成分为10×MOPS溶液。其特点是即开即用,用户不需要自己进行RNase灭活、高压灭菌、pH调节等操作。与Northern杂交等后续反应兼容。
储存条件:常温运输及保存、有效期一年。
·T7 RNA聚合酶
编号:BTN120310
英文名称:T7 RNA Polymerase
规格:1000U
T7 RNA聚合酶是一种高度特异识别T7启动子序列的DNA依赖的5´→3´RNA聚合酶,它可以催化单链或双链DNA T7启动子下游NTP的掺入,合成与T7启动子下游的模板DNA互补的RNA。
产品特点:
1.对于T7启动子有高度的特异性,用于体外RNA(含小RNA)的合成。
2.能识别修饰的NTP(生物素标记、地高*(代"辛")标记、荧光素标记的NTP),可用于标记探针。
3.所得RNA可用于下列后续实验:核酸杂交、基因组DNA序列分析、核糖核酸酶保护测定、反义RNA合成,体外翻译,RNA剪接、RNA二级结构分析、RNA-蛋白质相互作用、核酸扩增、siRNA、miRNA等小RNA。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| T7 RNA聚合酶(20U/μL) | 50μl |
| 5×反应缓冲液 | 250μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、制备DNA模板(本试剂盒不含所需试剂,此处信息仅供参考)
PCR片段和质粒DNA都可以用作体外转录的模板,但是必须注意以下几点。
⑴必须使用线性化的DNA。如果是质粒DNA,则必须先用适当的限制性内切酶切成线状。
⑵ 需要转录的DNA序列的上游必须有T7启动子。如果模板是PCR产物,则可以在设计引物时将T7启动子序列(5´TAA TAC GAC TCA CTA TAG GG 3´)加上。如果是将DNA片段克隆到载体上,则需要选择有T7启动子的载体,并且克隆位点必须位于T7启动子下游。
⑶ 需要转录的DNA序列的下游端最好不要是3´突出。如果是3´突出(比如选择了Pst I来线性化质粒),则最好用T4 DNA聚合酶修平。
⑷必须保证DNA模板中没有RNase。由于提取质粒DNA的过程中一般要使用大量的RNase A,因此质粒DNA一般都有严重的RNase A污染,所以在用作模板前,最好采取胶回收得方法回收质粒DNA。并且加入少量总RNA一起保温,然后电泳检测RNA是否被降解,以此来判断纯化的DNA模板是否有残留RNase A。
二、体外转录反应(本试剂盒不含除酶和反应液之外的相关试剂)
1.在一个RNase-free的塑料离心管中,在室温下(不是在4℃下)按次序加入下列成分:
| 成分 | 加入量 | 备注 |
| DNA模板 | 如果使用质粒DNA,必须反复酚-*仿抽提去除残留的RNase,然后再乙醇沉淀质粒DNA | |
| PCR片段 | 50ng左右 | |
| 质粒DNA | 1μg左右 | |
| RNase抑制剂 | ||
| 5×反应缓冲液 | 4μl | 需室温时使用 |
| NTP(2.5mM each) | 4μl | |
| T7 RNA聚合酶 | 0.5-1μL | |
| RNase-free水 | 补水到20μL |
注:此为20μL反应体系的用量,对其他反应体系,各成分的用量可以按比例增减。如果需要标记RNA探针,则需要订购NTP分开的试剂盒。如果需要得到加帽RNA,则需要加入自备的加帽修饰核苷酸。
2.37℃保温1-2小时。
注意:延长保温时间并不能提高产量。
3.70℃加热10分钟灭活T7 RNA聚合酶。
4.取1-3μL电泳检测转录效果。一般1μg DNA可以合成5-10μg的RNA。
5.得到的RNA可以放-80℃保存。
三、如果需要去除DNA模板(仅产品不提供所需试剂)
1.在体外转录体系中加入1μL自备的RNase-free DNase(3-5U/μL)。
2.37℃保温15-30分钟。
3.补水到100μL。
4.用自备的等体积(100μL)的Tris饱和酚-*仿抽提一次去除残留的DNase和RNA聚合酶。
5.加200μL微量核酸沉淀剂(用前需要摇晃混匀),振荡后15000rpm离心3~5分钟,弃上清。
6.加入1mL 75%乙醇,震荡10秒后15000rpm离心3~5分钟,弃上清。
7.短暂离心数秒,用枪头吸弃上清。晾干,所得沉淀即体外转录所得的RNA。可溶于RNase-free水中后立即使用或放-80℃长期保存。
北京百莱博科技有限公司专业生产RNA纯化产品,欢迎来电咨询选购BTN80601型非冻型细菌RNA保存液厂家。
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