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2℃~8℃
重组蛋白A
Cat.No.: RSPA05
CAS: 91932-65-9
储存温度:冻干粉,2-8℃
来源:基因工程生产,大肠杆菌表达。
1.产品简介
蛋白A是金黄色葡萄球菌的一种膜蛋白,具有与抗体特异性结合的能力,蛋白A亲和层析柱已成为应用广泛的纯化抗体的亲和柱,可从腹水,血清和细胞培养上清或细胞抽提物中分离和纯化多种哺乳动物不同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。重组耐碱蛋白A为我公司自主研发和生产,具自主知识产权。产品由大肠杆菌表达,经层析纯化获得,纯度95%以上。纯化过程不使用抗体柱亲和层析,避免了产品中掺入无关IgG的可能。
2.产品特性
| 外观 | 白色、类白色粉末 |
| 溶解性 | 澄清液体 |
| 生物载量 | ≤ 1 cfu/ mg |
| 电泳 | 单一主条带 |
| 分子量 | 25kD |
| 紫外检测 | E275/250 ≥1.2, E0.1% at 275nm=0.17-0.23 |
| 纯度(HPLC) | ≥ 95% |
3.储存和运输稳定性
储存稳定性:重组蛋白A冻干粉存于2-8℃,24个月稳定;胶连时用PBS(pH7.4)溶解,现配现用;如果需要保存,用水溶解后,-20℃以下保存。
运输稳定性:蓝冰保温运输,活性稳定。
4.产品优势
1)非抗体柱纯化,产品中无任何其它抗体如IgG等的污染。
2)SPA-25为本公司自主研发产品,pH耐受范围广,可耐受0.5 M NaOH和0.5M HCl 处理,不降解,抗体结合能力不变。
3)产品有特为抗体纯化柱设计的连接基团,可直接用于蛋白A柱的制备。
4)质量稳定:批量生产,可保证稳定连续的批次生产;产品批次间无差异,质量稳定。
5)纯度高:宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
6)冻干粉:易于储存和运输;
7)符合法规要求:生产设备和生产环境符合相关法规要求,生产过程完全遵循NSF ISO 9001:2015质量体系并符合GMP指导原则。
8)质量文件完整性:按客户需求,可提供相关法规支持文件。
5.产品用途
重组蛋白A的C末端含有半胱氨酸,可定向偶联到固体分离介质上,用于单克隆抗体或多克隆抗体的纯化。可结合大多数人类和小鼠免疫球蛋白子类(如。,人类IgG1 IgG2 IgG4;鼠标IgG2 IgG2a,IgG2b IgG3),还结合牛,几内亚猪,仓鼠,房子,猪,兔子总免疫球蛋白的形式。重组蛋白A可与多种报告分子(荧光染料、酶标记、生物素、胶体金、放射性标记等)偶联并不影响其与抗体结合的活性。这些偶联后的蛋白A衍生物可用于Western-blot、ELISA、免疫组化等的抗体检测。
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文献和实验重组蛋白A在免疫试剂应用中的新进展广州精达公司-美国免疫学博士 胡勇摘要 抗体是免疫诊断试剂领域最重要的原料,蛋白A是纯化抗体最有效的工具,广泛用于免疫诊断试剂的许多领域。重组蛋白A具有产量大,成本低,纯度高,特异性好的优点。重组蛋白A的国产化将极大促进免疫诊断试剂的产品开发和市场效益。 关键词 抗体纯化 免疫诊断试剂 重组蛋白A 国产化蛋白A(Protein A)为金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白,具有与人类和哺乳动物血液中免疫球蛋白IgG分子的Fc段特异性结合
【原创】Protein A Sepharose 之进化篇。。。
洗脱条件比较剧烈,最后收集的蛋白质很有可能变性,或者是复性困难。 这种洗脱条件剧烈的Protein A 柱结合的重组蛋白质A一般具有5个串联结构域:E、D、A、B、C。这种重组蛋白A虽然除去了不重要的非结合域,仅由5个结构域组成,每个域均可以和IgG的Fc段结合,但不同的域结合强度略有差异。因此洗脱条件不均一,而且经常需要较低的pH值。如果减少串联结构域的个数,并且采取同型结构域串联,就可以避免不同结构域与抗体Fc 段亲和性的差异,洗脱条件会温和而均一。为此,我们可以做一个试验,比较一下
bigbang_0_0 lwq652 wrote: 质粒不会被宿主里面限制性酶酶切掉吗? 这个跟RecA的功能没有关系,质粒要保持稳定,除了要敲除感受态细胞中的RecA以外,还要敲除与限制修饰系统有关的酶的基因。 hyjtb 编码重组蛋白A阿, 按照理论上来说,是参与修饰和复以及修复等有关的活动。质粒是独立复制的。 bigbang
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