Ethanol（无水乙醇）

Ethanol（无水乙醇）
产品名称： 乙醇
英文名称： Ethanol
产品及特点： 无色澄清液体。有愉快的气味和灼烧味。易流动。极易从空气中吸收水分,能与水和氯仿、等多种有机溶剂混溶。能与水形成共沸混合物(含水 4.43%),共沸点78.15℃。相对密度(d204)0.789。熔点-114.1℃。沸点 78.5℃。折光率(n20D)1.361。闪点(闭杯)13℃。易燃。脱水能力强，并能使组织硬化，能较好地与二甲苯透明剂相溶合。最终结果表明，只要脱水环节处理好，都会得到好的切片。其缺点是易使组织收缩、变脆。导致这些缺点是因为组织在高浓度乙醇（无水乙醇〉 中停留时间较长，或者加温脱水的温’度过高。在 日常中一般脱水从 70 % 乙醇（人体组织从 75%)开始，由低向高的梯度脱水。对小动物、胚胎及柔软的结缔组织块，可从 30%开始。其中的柔软组织需在 95 % 乙醇中停留时间要长。
脱水时间应根据组织块的大小、性质和类型分别安排，为使组织脱水彻底，应将 95%乙醇分为二节、无水乙醇分为三节 ，总之要根据具体情况作适当安排。一般的脱水顺序是： 75 % 、85% 、90% 、95 %①、95 %②、无水乙酸①、无水乙醇②、无水乙醇③。只有脱水充分才能在透明剂中透明。应该注意的是脱水必须在有盖瓶子内进行，尤其是高浓度乙醇很易吸收空气中的水分，阴雨天、空气湿度较大的天气时更应注意 。我们还要求在最后的无水乙醇时，将组织取出放在过滤纸上用冷风稍吹干后透明。
成分及包装： 500mL塑料瓶内包装，纸盒外包装，无使用手册。
运输及保存：密封阴凉干燥保存，有效期2年。
Ethanol（无水乙醇）实验步骤     
1.  石蜡切片置于67℃烘箱中，烘片2小时，脱蜡至水，用pH7.4的PBS冲洗三次，每次3分钟（3×3’）。
2.  取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液，加入微波盒中，微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中档微波处理10分钟，取出微波盒流水自然泠却，从缓冲液中取出玻片，先用蒸馏水冲洗两次，之后用PBS冲洗2×3’。（注：不是所有的抗体都需要微波修复的，视具体情况而定）
3.  每张切片加1滴3%H2O2，室温下孵育10分钟，以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3×3’。
4.  除去PBS液，每张切片加1滴相应的第一抗体（相应稀释倍数），室温下孵育2小时。
5.  PBS冲洗3×5’。除去PBS液，每张切片加1滴聚合物增强剂，室温下孵育20分钟。PBS冲洗3×3’。
6.  除去PBS液，每张切片加1滴酶标抗鼠/兔聚合物，室温下孵育30分钟。PBS冲洗3×5’。
7.  除去PBS液，每张切片加1滴新鲜配制的DAB液（二氨基联苯胺），显微镜下观察5分钟。
8.  苏木素复染，0.1%HCl分化，自来水冲洗，蓝化，切片经梯度酒精脱水干燥，二甲苯透明，中性树胶封固，晾干后观察。
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其他        
一、Ethanol（无水乙醇）特点
1.  在切片加上一抗后，第二抗体标记多聚螯合物酶（HRP）的复合物与一抗结合，在多聚螯合物上有大量的HRP分子，使抗原信号有显著的放大，其敏感性较SABC、SP法高。
2.  由于多聚物在体内不存在，又不使用生物素，从而避免了由于生物素引起的非特异性背景染色，背景比SABC、SP法清晰。