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SSH Detection Service
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联迈生物
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正反文库
抑制差减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)是一种基于抑制PCR和差减杂交技术建立的,在转录水平上研究基因表达的技术,具有稳定、高效、可靠的特点,可对生物的生长、发育、衰老、死亡等生命过程及生物或非生物逆境胁迫对生物所造成的影响等进行全面、系统的分析。其原理图如下:
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文献和实验mRNA或cDNA差减杂交法、基于PCR反应的差减杂交法或抑制性差减杂交(SSH)、基因或表达序列文库(cDNA or EST Libraries)杂交等。3.应用基因组差减杂交法使用基因组DNA作为研究对象和实验材料,主要应用于肿瘤特异性缺失片段的筛选和各种遗传性疾病的家系研究以及进化生物学的研究;mRNA或cDNA差减杂交法则以基因转录产物mRNA或其逆转录产物cDNA作为研究对象和实验材料,是最早开发和应用于基因表达差异分析的经典方法之一,己经和正在广泛应用于包括生物学和医学的各个领域。
,用不同引物对,进行PCR 扩增,扩增时加入同位素标记的核苷酸。利用测序胶电泳技术分离PCR 产物,经放射自显影即可找到差异表达的基因。 十六、抑制差减杂交 抑制差减杂交技术原理抑制差减杂交技术(SSH)是由Diatchenko等建立的以抑制性PCR和DNA差减杂交方法相结合的方法。其依据的主要技术有两点: (1)消减杂交; (2)抑制PCR。经抑制差减杂交后的cDNA群体不仅富集了差异表达基因(目的基因),而且目的基因间丰度的差异经过均等化作用已基本消除
分离基因。2 、 DDRT-PCR技术的优点当前,寻找差异表达基因的方法除了DDRT-PCR之外,还有减杂交(subhybridization,SH)、抑制性差减杂交(suppression subtractive hybridiza-tion, SSH)、RNA随机引物PCR(RNA-arbitrarily primed PCR, RAP-PCR)、代表性差异分析(representational difference analysis, RDA)、DNA微阵列(DNA Microarray,或DNA芯片)和基因
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