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- 供应商:
江蓝纯
- 规格:
10ml
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| P0015A | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X) | 10ml | 32.00元 |
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer,1X),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的蛋白上样缓冲液。
可以直接用于细胞或组织样品的裂解,并用于后续常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。使用SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)直接裂解蛋白样品的优点是比较便捷;缺点是裂解的蛋白样品不能用常规的Bradford法或BCA法测定蛋白浓度。这样蛋白上样量的均一性就较难控制,需要借助考马斯亮蓝等的染色结果或Western的检测结果,来调整上样量。当细胞量或组织用量能控制得比较均一时,使用本裂解液直接裂解获取蛋白样品会比较便捷。
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文献和实验或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心(3000 rpm,5 min)收集 Agarose 珠子,弃掉上清,用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。(小心吸取上清,避免触碰底部珠子) 收集沉淀,加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀,轻混均匀后煮沸 5 min,12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管,进行 Western 检测。
相关专题 主要包括以下 4 个基本步骤:样品制备;电泳分离;蛋白的膜转移;免疫 杂交与显色――蛋白检测。 溶液和试剂 1. 1X 磷酸盐缓冲液(PBS ) 2. ModifiedRIPAbuffer:Tris-HCl:50 mM, pH 7.4; NP-40: 1%;Na-deoxycholate: 0.25%;NaCl: 150 mM;EDTA :1 mM;PMSF: 1 mM
蛋白上样缓冲液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。使用5X的SDS-PAGE蛋 白上样缓冲液可以减小上样体积,在相同体积的上样孔内可以上样更多的蛋白样品。5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以参考相关文献资料配制,也可以使用碧云天生产的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)。 100℃或沸水浴加热3-5分钟,以充分变性蛋白。
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