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- LMAI Bio
- 上海
- LM130665-50
- 2025年07月10日
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- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Cre Recombinase
- 库存：
大量
- 供应商：
联迈生物
- 规格：
50U
Cre 重组酶产品及特点：
Cre 重组酶是细菌噬菌体 P1 的 I 型拓扑异构酶，催化 loxP 位点间的 DNA 进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子，Cre 介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡。loxP 识别元件是一个 34bp 序列，其两端是两个 13bp 的反向重复序列，中间是起定向作用的 8 bp 间隔区。重组产物根据 loxP 位点的位置和相对方向而不同，两个含单 loxP 位点的 DNA 将被融合。两个正向重复 loxP 位点间的DNA 将以环状形式切割，而两个反向 loxP 位点间的 DNA 序列将被翻转。本产品作用原理图如下：
本产品具有下列特点：
1. 两个 loxP 位点之间 DNA 的切割
2. 含 loxP 位点 DNA 分子的融合
3. loxP 位点之间 DNA 序列的翻转
Cre 重组酶反应条件
1X Cre 重组酶反应缓冲液 [33 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @25℃)，10 mM MgCl2]，37℃ 温育。Buffer 成分
15 mM Tris-HCl，250 mM NaCl，0.3 mg/ml BSA，50% Glycerol，pH8.0 @ 25℃
热失活
70℃ 10 分钟。
Cre 重组酶备注
建议进行琼脂糖凝胶电泳前，将 Cre 重组酶反应混合物于 70℃ 温育 10 分钟。由于 Cre 重组酶反应是一个动态平衡过程，用 loxP 2+ 对照底物仅有 20-30%发生重组。由于重组产物的量较少，故溴化乙锭染色后呈现微弱条带，同时伴有底物染色强度相应减弱。延长温育时间不会提高重组效率，相反，还可能导致大分子量重组产物的生成。反应中增加 Cre 重组酶量将形成loxP依赖性 Cre - DNA 复合物，从而抑制重组反应。
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文献和实验lwjssry 求含有CRE重组酶序列的载体，有如下质粒可交换，或积分交换 表达载体： pcDNA3.1(+) pcDNA3.1/GS pcDNA4HisMax B pIRES2-EGFP pAAV-IRES-hrGFP pBudCE4.1 pEGFP-C1 pEGFP-N1 pCMV-DsRed 腺病毒载体 pADeasy-1,pShuttle，包括菌种
re-loxP 是一种位点特异的基因重组技术，被广泛应用于特异位点的基因敲除、基因插入、基因翻转和基因易位，在真核生物和原核生物中均有广泛应用。Cre-loxP 的基本原理Cre 蛋白是一种重组酶，是causes recombination的缩写，于1981 年从 P1 噬菌体中被发现，属于 λInt 酶超基因家族。Cre 重组酶基因编码区序列全长1029bp（EMBL 数据库登录号为 X03453），编码 38kDa 蛋白质，Cre 重组酶是由 343 个氨基酸组成的单体蛋白。LoxP 位点
The Cre/lox site-specific recombination system has emerged as an important tool for the generation of conditional somatic mouse mutants. This method allows one to control gene activity in space and time in almost any tissue of the mouse
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