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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
224
- 英文名:
BalbScriptII Reverse Transcriptase
- 保质期:
一周
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
耐高温M-MLV逆转录酶哪里卖是高品质的核酸扩增(PCR)产品,由北京百奥莱博供应,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多耐高温M-MLV逆转录酶等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:耐高温M-MLV逆转录酶哪里卖
产地:国产|进口
英文名:BalbScriptII Reverse Transcriptase
规格:10kU
本制品是在百奥莱博普通M-MLV(RNase H-)逆转录酶基础上,进一步进行遗传改造,除保留普通M-MLV(RNase H-)的特性外,极大的提高了其热稳定性,其最适反应温度由普通M-MLV(RNase H-)逆转录酶的42℃提高到65℃,并且常温保存24小时仍然具有良好的逆转录活性。该制品还极大的缩短了逆转录时间,逆转录10min即可得到至少1500bp目的基因条带。该制品转录效率高,热稳定性好,反应时间短,可用于GC含量高或者具有二级结构的RNA的逆转录,稀有样品的逆转录等。
产品组成:
| 组份 | JN0014-10kU |
| 耐高温M-MuLV反转录酶(200 U/μl) | 25μl |
| 5×M-MLV Buffer | 1ml |
产品用途:
1、1st-Strand cDNA的合成。
2、cDNA Probe的制备。
3、RT-PCR反应以及一步法RT-PCR。
4、qPCR。
注意事项:
1、用DEPC处理实验用到的所有管子和枪头,或者购买已经证明无核酸酶的实验用具,整个实验过程戴手套并经常更换手套,避免RNA酶的污染。
2、确保所用试剂及超纯水中无RNA酶污染。
3、纯化过的RNA要保证不含有盐,金属离子,乙醇和*酚,因为以上成分会干扰第一链cDNA的合成反应。可采用乙醇沉淀RNA的方法去除掉痕量污染物。
实验步骤:
第一链cDNA合成反应体系:
1、按下表顺序加入反应物。
2、可选优化步骤。如果RNA模板GC含量高或者含有二级结构,可先将模板和引物的 混合液轻轻混匀,短暂离心,65℃孵育5分钟,冰上冷却,离心,再置于冰上冷却。
3、轻轻混匀,离心。
4、如果使用Oligo(dT)18或者基因特异型引物,42℃-65℃孵育60分钟。 如果使用随机六聚体引物,25℃先孵育5分钟,随后42℃-65℃孵育60分钟。
5、75℃加热5 min终止反应。
反应产物可直接用于PCR反应或者在-20℃保存少于一周的时间。如想延长保存时间,建议使用-70℃保存。
常用反应体系:
| 模板RNA | 总RNA(0.1 ng - 5 μg) poly(A) mRNA(10 pg - 0.5 μg) 特异性RNA(0.01 pg - 0.5 μg) |
| 引物 | Oligo (dT)18引物1μl 随机六聚体引物1 μl 基因特异性引物15-20 pmol |
| 5×Reaction Buffer | 4ul |
| RNA酶抑制剂(20U/ul) | 1ul |
| dNTP(各10mM) | 2.0μl |
| 耐高温M-MuLV反转录酶(200U/ul) | 1μl |
| ddH2O(Nuclease Free) | 至20μl |
应用实例:
图例一)耐高温M-MuLV反转录酶应用效果。
以1ug小鼠胚胎总RNA逆转录后,取1ul逆转录产物进行GAPDH(500bp)和小鼠RNA酶抑制剂基因(1500bp)进行PCR扩增,反应体系:20ul。
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE检测纯度大于95%,PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
活性定义:以Poly(rA)•Oligo(dT)为模板/引物,在55℃、10分钟条件下,掺入1 nmol的[3H] dTTP所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
除耐高温M-MLV逆转录酶哪里卖外,我公司正在打折促销以下产品:
·重组人甾醇O-乙酰转移酶2(ACAT2)(SOAT2)
编号:JN1070
英文名称:Recombinant Human Sterol O-acyltransferase 2
规格:10μg|50μg|500μg|1mg
本品由我们的大肠杆菌表达系统制备而成,目的基因编码的Met1-Glu397在N端含有Trx标签和His标签。
ACAT2质量控制:>95%(还原性SDS-PAGE)
ACAT2制剂:液体
ACAT2保存:收到货后请置于-20℃,可保存6个月,避免反复冻融。
关于ACAT2:
ACAT2 is a cytoplasmic enzyme which belongs to the thiolase family. ACAT2 takes part in lipid metabolism, lipoprotein assembly, catalyzing cholesterol esterification in mammalian cells. It is responsible for the synthesis of cholesteryl esters which are part of lipoproteins containing apoB. ACAT2 deficiency contributes to severe mental retardation and hypotonus.
耐高温M-MLV逆转录酶哪里卖关键词:BalbScriptII Reverse Transcriptase,耐高温M-MLV逆转录酶,JN0014
ARB10310 人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)定量分析 Human alternative macrophage activation-associated cc chemokine 1,amac-1 ELISA KIT
2,4-二**氧乙酸* Dehydroascorbic acid 2702-72-9
Spinner盐粉剂(含酚红) 1× 1L|10×1L
ARB11588 人基质裂解素2(ST-2)含量检测 Human stromelysin-2,st-2 ELISA KIT
司盘20 Ammonium formate 1338-39-2
6%鸡红细胞 100ml
389-08-2 Nalidixic acid *啶酮酸
PY02-003 SS琼脂 250克
L-酪*酸 L-Glutamic acid 60-18-4
双[三(羟甲基)*基丙*(代"烷")] MOPS 64431-96-5
固黑B盐 HDBAC 53760-27-3
Denhardt"s溶液(50×) 50ml
ARB10937 人低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9(LMP7/PSMB9)定量分析 Human low molecular-weight protein/proteasome beta-type subunit,lmp7/psmb9 ELISA KIT
DL-半胱*酸盐*(代"酸")盐一水物 TPN 96998-61-7
ARB12044 大鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)含量分析 Rat acetylcholinesterase,ache ELISA KIT
SJ0454 Propylthiouracil 丙基硫氧嘧啶
BL1386 SABC小鼠IgG-FITC/POD双标kit
乙酸-β-*酯 BOC-D-Leucine 1523-11-1
ARB14178 人免疫球蛋白G4(IgG4)ELISA代测服务 Human immunoglobulin G4 (igG4) ELISA KIT
6976-37-0 双(2-)亚*基三(羟甲基)甲*(代"烷") Bis-Tris
ARB13621 兔子促黄体激素(LH)含量测试 Rabbit luteotropic hormone,lh ELISA KIT
焦油紫染色液 0.06%|0.1% 100ml
耐高温M-MLV逆转录酶哪里卖关键词:BalbScriptII Reverse Transcriptase,耐高温M-MLV逆转录酶,JN0014
·重组人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM)
编号:JN0521
英文名称:Recombinant Human Epithelial Cell Adhesion Molecule
规格:10μg|50μg|500μg|1mg
本品由我们的哺乳动物细胞表达系统制备而成,目的基因编码的Gln24-Lys265在C端含有His标签。
Ep-CAM质量控制:>95%(还原性SDS-PAGE)
Ep-CAM制剂:冻干品
Ep-CAM保存:
冻干蛋白置于-20℃以下可长期保存,室温条件下可稳定保存3周。
复溶蛋白溶液可在4~7℃保存2~7天,可分装后置于-20℃保存三个月。
Ep-CAM复溶:
打开试剂管前请先离心。
复溶浓度推荐大于100 μg/ml。
冻干蛋白请溶于ddH2O。
复溶后,请根据用量分装冻存,避免反复冻融。
关于Ep-CAM:
Epithelial Cell Adhesion Molecule (EpCAM) is a signal type I transmembrane glycoprotein that belongs to the EPCAM family. EpCAM is composed of an extracellular domain with one thyroglobulin type-1 domain, a transmembrane domain and a cytoplasmic domain. EpCAM is found on the surface of adenocarcinoma, but not on mesodermal or neural cell membranes. The EpCAM molecule has been shown to function as a homophilic Ca2+ independent adhesion molecule. It may act as a physical homophilic interaction molecule between intestinal epithelial cells (IECs) and intraepithelial lymphocytes (IELs) at the mucosal epithelium as an immunological barrier providing the first line of defense against infection. Defects in EPCAM are a cause of hereditary non-polyposis colorectal cancer type 8 (HNPCC8) and diarrhea type 5 (DIAR5). EpCAM plays a role in embryonic stem cells proliferation and differentiation; it up-regulates the expression of FABP5, MYC and Cyclin A and Cyclin E. It is highly and selectively expressed by undifferentiated embryonic stem cells.
我公司生产供应销*(代"售")的核酸扩增(PCR)正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购耐高温M-MLV逆转录酶哪里卖。
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文献和实验,在缓冲液和还原剂(如DTT)存在的条件下加入,因为cDNA合成前的过程会使抑制剂变性,从而释放结合的可以降解RNA的RNase。蛋白RNase抑制剂仅防止RNase A,B,C对RNA的降解,并不能防止皮肤上的RNase,因此尽管使用了这些抑制剂,也要小心不要从手指上引入RNase。 使用无RNaseH活性(RNaseH-)的逆转录酶 逆转录酶催化RNA转化成cDNA。不管是M-MLV还是AMV,在本身的聚合酶活性之外,都具有内源RNaseH活性。RNaseH活性同聚
产物。无论使用何种RNA,关键是确保RNA中无RNA酶和基因组 DNA的污染。 二、实验试剂 Taq酶,M-MLV逆转录酶,dNTPs, DEPC处理水,双蒸水,大肠杆菌总RNA 三、实验 仪器 电泳仪, PCR仪,高速离心机,移液器,电泳仪,电泳槽,紫外分析仪 四、操作步骤 1.cDNA的合成: 逆转录体系的组成: 2.PCR扩增特异性片段 (1)25ul PCR体系
请教real time PCR的RT部分能否使用传统半定量RT-PCR试剂盒的反转录部分?
Total RNA X 总体积 10 总体积 10 DRR033A的RT配方居然连镁离子都没有,是不是含在5×M-MLV Buffer中了?这2种体系(其实就是2种逆转录酶)的镁离子浓度差别有多大?能否造成扩增反应的不同?dNTP的量也差了一倍,能相互通用吗?恳请高手们解密!不甚感激!
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