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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输、4℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Half-Wet Transfer Buffer Powder
- 库存:
大量
- 供应商:
联迈生物
- 规格:
20 L
半干法电转液(干粉)产品及特点
本产品配制的溶液适用于半干法电转PAGE胶上蛋白质,湿润和浸泡电转膜以及垫子。半干法的优点是快捷,最长只需40分钟左右,一般只适合100KD 以下的蛋白。
半干法电转液(干粉)常温运输、4℃保存,有效期一年。
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文献和实验保存。 三、转膜(整个 WB 过程中最重要的环节) ① 跑到溴酚蓝距离靠近最下缘时,要提前准备半干法转膜液。 ② 在电转液中剥胶,裁胶,剪膜,膜活化。 ③ 「三明治」黑板~海绵~三层滤纸~胶~膜(正面朝下,分清左右,与胶对应)~3 层滤纸~海绵~白板,夹紧后放入电转槽中。(海绵,滤纸,膜需浸润透,过程中不能干,赶走气泡)。 ④ 连接电源,一定要注意红对红,黑对黑,定电流和时间。 经验总结: 溴酚蓝跑到最终的距离是根据你所需要切的分子量决定的。
强度进行稳流电泳,当电压达65V时改为稳压电泳。 3.在目的蛋白泳动至距胶下缘1cm以上结束。 四.转膜 1.电泳结束前20分钟左右戴上手套开始准备: 湿转使用常规电转液:Tris 3.0g,Gly 14.4g, M-OH 200ml,加去离子水至1,000ml。干转则取此转移液,每50ml加入10%SDS180ul。 浸泡NC膜:将NC膜平铺于去离子水面,靠毛细作用自然吸水后再完全浸入水中10min以排除气泡,随后浸泡入转移液中。PVDF膜则在M-OH中浸泡20min以上后转入转移液中
【资源】个人整理 Western Blot(步骤简略,但注意事项、经验总结、基本原理很全面)
,3min。三.电泳1.上样前将胶板下的气泡赶走。2.所有蛋白样品调至等浓度后上样,样品两侧的泳道用等体积的1×loading buffer上样,Marker也用1×loading buffer调整至与样品等体积。2.以初始电压为45V时的电流强度进行稳流电泳,当电压达65V时改为稳压电泳。3.在目的蛋白泳动至距胶下缘1cm以上结束。四.转膜1.电泳结束前20分钟左右戴上手套开始准备:湿转使用常规电转液:Tris 3.0g,Gly 14.4g, M-OH 200ml,加去离子水至1,000ml。干转则取
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