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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Enhanced Lowry Assay Kit
- 库存:
大量
- 供应商:
联迈生物
- 规格:
1000次
改良Lowry法蛋白定量试剂盒产品及特点
Folin酚试剂(磷钼酸和磷钨酸混合物)跟蛋白质中含酚氨基酸(色氨酸和酪氨酸)发生颜色反应,可用于测定蛋白质浓度,但灵敏度较低。Lowry在此基础上加入Biuret(双缩脲)反应步骤,即先在碱性条件下使蛋白质和Cu+形成复合物,再使其与Folin酚试剂发生显色反应,产物在750nm检测。Lowry法使不含酚的蛋白质也能被检测出来,灵敏度是单独使用Folin酚的10倍左右,是双缩脲反应的200倍,因此成为早期检测蛋白浓度的主要方法。Lowry检测原理图如下:传统Lowry法受到很多常用的试剂(如DTT、糖、甘油、Triton等)干扰,步骤繁琐。本公司对Lowry法进行改良,推出本产品,它具有下列特点:
1. 即开即用,不需要单独购买每个成分再配制。
2. 可室温操作,适合高通量定量,只需要三种溶液(经典Lowry法需5种溶液)。
3. 检测线性范围广,在2-100 μg,检测上限比经典Lowry法高30%-40%。
4. 可排除去污剂的影响。
使用及效果
将溶液A、溶液B、溶液C按3:1:1的比例混合得Lowry工作液,再将福林酚稀释10倍得福林酚工作液,将0.2 mL Lowry工作液、0.1 mL 福林酚工作液和0.2 mL待测样品混合,室温放置30分钟后测定750 nm吸光度,与标准曲线对比即得蛋白质浓度。下图是用本产品测定BSA和BGG(牛血清γ-球蛋白)的结果图。
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文献和实验的混合物)。在一定的条件下,兰色深度与蛋白的量成正比。 Folin―酚试剂法最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。这个测定法的优点是灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多,缺点是费时间较长,要精确控制操作时间,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多。对双缩脲反应发生干扰的离子,同样容易干扰Lowry反应。而且对后者的影响还要大得多。酚类、柠檬酸、硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。浓度较低的尿素(0.5%),硫酸纳
色深度与蛋白的量成正比。Folin—酚试剂法最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。这个测定法的优点是灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多,缺点是费时间较长,要精确控制操作时间,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多。对双缩脲反应发生干扰的离子,同样容易干扰Lowry反应。而且对后者的影响还要大得多。酚类、柠檬酸、硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。浓度较低的尿素(0.5%),硫酸纳(1%),硝酸纳(1%),三氯
[目的] 掌握Lowry法测定蛋白质浓度的原理。 [原理] 蛋白质在碱性溶液中其肽键与Cu 2+ 螯合,形成蛋白质一铜复合物,此复合物使酚 试剂 的磷钼酸还原,产生蓝色化合物,在一定条件下,利用蓝色深浅与蛋白质浓度的线性关系作标准曲线并测定样品中蛋白质的浓度。 [操作] 取试管7支、编号、按下表操作
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