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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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冷藏
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长期
- 英文名:
T4 DNA Polymerase
- 库存:
979
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京T4 DNA聚合酶多少钱在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京T4 DNA聚合酶多少钱
产地:国产|进口
编号:WE0238
品牌:百奥莱博
英文名:T4 DNA Polymerase
本产品是由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。由于T4 DNA聚合酶同时具有5’→3’ DNA聚合酶活性和3’→5’ DNA外切酶活性,可以用于将5’端突出末端补平或3’端突出末端削平,也可用于通过置换反应进行标记DNA探针合成、通过引物伸长法解析mRNA转录的起始点、定点突变过程中第二链的合成以及不依赖于连接反应的PCR产物克隆等。本T4 DNA聚合酶的3’→5’ DNA外切酶活性比Klenow Fragment要高约100-1000倍,且对于单链DNA要比双链DNA活性更高。本酶不含5’→3’DNA的外切核酸酶活性,于70℃加热10分钟可使其失活,金属离子螯合剂可以抑制其活性。
欲了解更多北京T4 DNA聚合酶多少钱的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
9008-02-0 Hemoglobin 牛血红蛋白
BL0907 FITC标记兔抗山羊IgG抗体
BTN130628 Lambda核酸外切酶 Lambda Exonulease
ARB12849 小鼠内源性糖皮质激素(GC)尿液中含量检测
BTN130602 Vent DNA聚合酶 Vent(exo-)DNA Polymerase
三羟甲基*基甲*(代"烷") PMS 77-86-1
SJ0793 褪黑素
ARB10861 人抗神经元核抗体2型/抗RI抗体(ANNA-2/RI)Elisa方法检测 Human neuronal nuclear autoantibody,anna-2/ri ELISA KIT
ARB12050 大鼠二胺氧化酶(DAO)Elisa分析 Rat diamine oxidase,dao ELISA KIT
维生素BT Heparin sodiu*(代"m") 541-15-1
BL0870 羊抗兔IgG免疫血清
ARB12097 大鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)血清中含量检测 Rat terminal complement complex c5b-9,tcc c5b-9 ELISA KIT
ARB13435 鸡可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)酶免分析 Chicken soluble intercellular adhesion molecule-1,sicam-1 ELISA KIT
28053-08-9 尿苷5-二磷酸葡萄糖二* UDPG
60-00-4 乙二*(代"胺")四乙酸 EDTA FREE ACLD
ARB11120 人肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)酶联免疫定量检测 Human pulmonary surfatcant-associated protein d,sp-d ELISA KIT
草酸铵 L-GLDH 6009-70-7
NF-245 冻干羊抗人C3血清
甘*酰-脯*酰-对硝基*(代"*")胺对甲*磺酸盐 m-Toluic acid 65094-46-0
PY01-118 多价蛋白胨 250克
地塞米松 Ellagic acid 50-02-2
ARB11737 人靶向核糖核酸酶(TR)酶免分析 Human targeted ribonuclease, tr ELISA KIT
北京T4 DNA聚合酶多少钱关键词:T4 DNA Polymerase,WE0238,T4 DNA聚合酶
·HRP标记驴抗山羊IgG(H+L)
编号:WE0372
英文名称:Donkey Anti-Goat IgG, Peroxidase Conjugated
规格:100μl
本产品为过氧化物酶标记的经亲和纯化的驴抗体,特异识别山羊IgG,检测灵敏度高,本底低,可用于Western Blot、ELISA 和免疫组化检测。酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:山羊IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围:
WB ECL发光检测(1:10000-200000)
WB 显色检测(1:5000-100000)
ELISA(1:5000-100000)
Immunohisto/Cytochemistry(1:500-5000)
·植物基因组DNA提取试剂盒
编号:WE0173
英文名称:Plant Genomic DNA Extraction Kit
规格:50次|200次
本试剂盒适用于从植物组织和植物干粉中提取总DNA,包括基因组DNA,线粒体DNA以及叶绿体DNA。本品可以处理多至100 mg的样本,可纯化获得最大为50 kb的DNA,多数片段在20-30 kb之间。本试剂盒采用先进的硅胶膜技术和简单的离心程序,无需乙醇沉淀,简单快速地分离得到高纯度的DNA,有效去除PCR和其他酶促反应的抑制剂。本品可以在1小时内完成总DNA的提取, 纯化得到的DNA可以直接用于酶切、 PCR、 Real-Time PCR、 文库构建、 Southern Blot、分子标记等下游实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer GP1 | 40ml | 160ml |
| Buffer GP2 | 40ml | 160ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml | 52ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml | 50ml |
| Buffer GE | 15ml | 60ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 | 200套 |
自备试剂:β-巯基乙醇、*仿、无水乙醇。
注意事项:
1、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
2、Buffer GP1在使用前请加入β-巯基乙醇,1ml Buffer GP1加1μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer GP1室温可保存1个月。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer GP1和Buffer GP2是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GP1和Buffer GP2于65℃水浴重新溶解。
5、如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在加入Buffer GP1孵育后,加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml),RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0225S。
操作步骤:
1、取植物新鲜组织约100 mg或干重组织约20 mg,加入液氮充分研磨。
2、将研磨后的粉末收集到离心管(自备)中,加入700μl 65℃预热的Buffer GP1(使用前在预热的Buffer GP1中加入β-巯基乙醇,使其终浓度为0.1%),迅速颠倒混匀后,将离心管置于65℃水浴20分钟,水浴过程中颠倒离心管混匀样品数次。
注意:如需去除RNA,可在上述步骤完成后,加入4μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀,室温放置5-10分钟。
3、加入700μl *仿,充分混匀,12000rpm(~~13400×g)离心5分钟。
4、小心将上层水相转入一新的离心管(自备)中,加入700μl Buffer GP2,充分混匀。
5、将步骤4中所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中。若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤7.
8、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
9、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-100μlBuffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-100μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤9所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤9;若洗脱体积小于100μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
北京T4 DNA聚合酶多少钱关键词:T4 DNA Polymerase,WE0238,T4 DNA聚合酶
·6×DNA上样缓冲液
编号:WE0221
英文名称:6×DNA Loading Buffer
规格:10ml
·高效热启动DNA聚合酶
编号:WE0123
英文名称:SuperStar DNA Polymerase
规格:500U|2500U
本产品是一种采用最新封闭技术的Taq DNA Polymerase,适用于HotStart PCR。在70℃以下,酶的活性中心被完全封闭,有效抑制了聚合酶活性,并能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。在95℃条件下孵育5分钟后,酶的部分活性得以释放。随着热循环的不断进行,剩余的酶活会源源不断地释放出来,这就使得此酶克服了常规Taq酶容易出现平台期的弊端,其扩增效率大大提高。
本品进行PCR扩增时,PCR产物3"末端附有一个“A”碱基,可直接用于T/A克隆。本产品具有扩增速度快、特异性好、稳定性好的特点,主要应用于对扩增产物要求量大的PCR和RT-PCR反应。
产品组成:
| 组份 | 500U | 2500U |
| SuperStar DNA Polymerase,5 U/μl | 100μl | 5×100μl |
| 10×PCR Buffer | 1.8ml | 5×1.8ml |
注意:本产品的10×PCR Buffer中含有15 mM*离子。
活性定义:用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制:
1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
2、经检测无外源核酸酶活性;
3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 10×PCR Buffer | 5μl | 1× |
| dNTP Mix,10 mM each | 1μl | 200μM each |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50 μ l |
| SuperStar DNA Polymerase,5 U/μl | 0.5μl | 2.5 U/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意: 可以在室温下配制反应液,最好将试剂置于冰上。引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | |
| 变性 | 94℃ | 0.5-1 min | 25-35个循环 |
| 退火 | 50-68℃ | 0.5-1 min | |
| 延伸 | 72℃ | 1 min | |
| 终延伸 | 72℃ | 10 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品中所包含的SuperStar DNA Polymerase的延伸速率为1 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
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