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- LMAI Bio
- 上海
- LM140390-10
- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
干冰运输，-80℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Y2HGold Chemically Competent Cell
- 库存：
大量
- 供应商：
联迈生物
- 规格：
10×100μL
Y2HGold 酵母化学感受态细胞产品及特点
Y2HGold 感受态细胞是实验室常用酵母双杂用菌株，MATa 型， 可转化质粒或mating 操作。Transformationmarker 为: trp1, leu2，报告基因为：AbAr, HIS3, ADE2, MEL1。本产品经PGADT7 质粒检测转化效率为104cfu/μg DNA 。
其基因型如下：
MAT a, trp 1-901, leu 2-3, 112, ura 3-52, his 3-200, gal 4Δ, gal 80Δ,LYS 2: : GAL 1UAS–Gal 1TATA–His 3, GAL 2UAS–Gal 2TATA–Ade 2 URA 3 : :MEL 1UAS–Mel 1TATA AUR 1-C MEL 1
Y2HGold 酵母化学感受态细胞干冰运输，-80℃保存，有效期一年。
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文献和实验相关专题 酵母感受态细胞制备可以：(1)用于建立酵母转化体系;(2)用于酵母表达系统 构建;(3)用于酵母其他分子生物学研究。 一、试剂与耗材 1. 试剂 细菌用-酵母提取物(Fisher)、 细菌用-蛋白胨(Fisher)、葡萄糖(Fisher)、细菌用-琼脂粉、去离子水、甘油(Sigma)、二甲基亚砜(Sigma)、聚乙二醇3350(Sigma)、醋酸锂(Sigma)、鲑鱼精子细胞DNA
1.5ml缓冲液B，彻底混匀； 30℃水浴孵育1h； 室温下2000g离心10min，去除上清液，菌体沉淀重悬于1.5ml缓冲液C中； 离心样品，去除上清液，轻微操作将样品重悬于0.2ml缓冲液C中； 将所有转化液铺于选择性平板，于30℃孵育3～4天后，鉴定； 3、毕氏酵母电转化法 （1）E.coli TOP10F’感受态细胞的制备 取10ul TOP10F’菌液，接种于200ml LB液体培养基中活化培养，37℃，200 rpm，16～18小时。取100ul菌液接种于200ml液体LB
酿酒酵母感受态细胞的制备 （1）从YPD平板上挑取一个新鲜的酿酒酵母EBY100单克隆至10 ml YPD液体培养基，30℃，250 rpm 培养过夜。 （2）测定过夜培养物的OD600值为3.0~5.0之间。 （3）将10 ml YPD过夜培养物稀释至OD600值为0.2~0.4。 （4）在28~30℃摇床中继续培养3~6 hr，使其OD600值达到0.6~1.0。 （5）于室温1500 g 离心5 min 收集酵母细胞，弃上清。 （6）用10 ml 洗液洗酵母
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