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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输和-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
DNAON for Alkaline Gel
- 库存:
大量
- 供应商:
联迈生物
- 规格:
1.5 mL
本产品是6×的DNA碱变性琼脂糖电泳上样 液,含有碱溶液、助沉剂、染料等成分。它 具有下列特点: 1. 即开即用,不需要制备各种溶液。
2. 使用简单,电泳时,先将DNA样品与 本上样液1:5混合即可直接上样。
3. 还可以用于DNA碱变性琼脂糖电泳。
DNA碱性胶上样液低温运输和-20℃保存,有效期一年。
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文献和实验一、 试剂与材料: 1、 琼脂糖 2、 电泳缓冲液(1×TAE) 3、 10mg/ml溴化乙锭 4、 上样缓冲液 5、 电泳仪和水平电泳漕 6、 透射紫外灯 7、 胶带纸 二、 操作方法 按1~2%的琼脂糖浓度(据DNA样品分子量不同而定)配胶100ml ↓ 置于微波炉内加热搅拌,至琼脂糖完全溶解 ↓ 温度降至大约50℃时(勿忘记加入溴化乙锭),立即倒入靠近一端梳子的电泳槽 ↓ 待凝胶完全溶解后,小心拔去梳子 ↓ 倒入1×TAE,少许超出胶面(如超出太多,电阻太大),使缓冲液进入凝胶孔 ↓
1 分钟。弃管中的溶液; 5. 重复操作 4 步的操作 1 次, 最后将纯化柱放入EP 管中 10,000rpm 离心 30 秒,除去痕量的 wash buffer; 6. 将纯化柱放入一个新的 EP 管。 加30~40μ l H2 O 或者 elutionbuffer 至纯化柱膜 的中央,在37℃或 50℃下放置 2 分钟,10,000rpm 离心 1 分钟洗脱 DNA,将EP 管中的 DNA 溶液放在- 20℃保存。 7. 注:若想要不电泳而直接纯化DNA 溶液,只需要在第2 步中
回首。切下的条带放在充满TAE的透析带中再电泳一段时间,让DNA走出凝胶,走向溶液中,再反向电泳一会儿,将附在透析带上的DNA赶回溶液中,取溶液部分,再用TAE洗洗袋子,合并溶液后传统方法酚抽沉淀,那块胶通常还要再染色看看残留。由于绑透析带非常难搞,只有在万不得已的非常大的片断时才会考虑的。也是丙烯酰胺电泳凝胶产物回收的方法之一。后来看到以色列的一个小公司GeBA有出简易透析管(生物通早在02年就有新技术专栏文章介绍的),就是将小指管两边各开一小窗,贴上透析膜,把胶块放在管中再电泳。由于不需要绑透析
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