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pCold IV

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  • Ybscience
  • 中国/美国
  • YB-0068
  • 2025年07月10日
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    • 英文名

      pCold IV

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    • 供应商

      钰博生物

    • 规格

      1ug/5ug

    pCold IV

    pColdIV载体基本信息

    出品公司: Ybscience
    载体名称: pCold IV, pColdIV, pCold-IV
    质粒类型: 大肠杆菌蛋白表达载体
    表达水平:
    启动子: CSPA
    克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
    载体大小: 4359 bp
    5' 测序引物及序列: pCold-F: 5'-ACGCCATATCGCCGAAAGG-3'
    3' 测序引物及序列: pCold-R: 5'-GGCAGGGATCTTAGATTCTG-3'
    载体标签: /
    载体抗性: Ampicillin 氨苄
    备注: 温度诱导,冷休克蛋白表达载体
    稳定性: 瞬时表达 Transient
    组成型: 诱导表达
    病毒/非病毒: 非病毒
     

    pColdIV载体质粒图谱和多克隆位点信息

    pCold IV载体图谱

    pCold IV多克隆位点

    pColdIV载体简介

    阐明蛋白质的结构和功能是后基因组研究的一个重要课题。高效率的蛋白质表达系统是研究这些课题的不可缺少的基本技术。大肠杆菌作为宿主的表达系统中被广泛 使用于生产重组蛋白。大肠杆菌表达系统具有良好的优势,方法简单,成本低。然而,对于某些基因,蛋白表达很困难,表达的蛋白质不溶。

    为了解决这些问题,TAKARA与Masayori Inouye教授(美国新泽西医学和牙科大学)进行联合研究,以制定一个高效基于低温冷休克蛋白基因的大肠杆菌表达载体。pCold DNA系列产品具有上述的优点,并提供了一个重要功能和结构的分析以及其他蛋白质研究领域的工具。

    <产品概况和特点>
    当培养的大肠杆菌的温度充分降低,几乎暂时停止生长大部分的蛋白表达减少,而此时一组蛋白质称为“冷休克蛋白”被专门诱导表达。

    冷休克表达载体,pCold I-IV,是利用冷休克基因CSPA启动子设计高效率蛋白质表达载体。 CSPA的启动子的下游处,插入了lac操纵子,以便严格控制表达。此外,5'非翻译区(5'UTR),翻译增强元件(TEE),His标签序列,Xa因 子切割位点和多克隆位点(MCS)位于在CSPA启动子的下游的。由于该产品采用了大肠杆菌的启动子,大多数大肠杆菌菌株可被用作表达宿主。有四种类型的 pCold载体,他们的下列原件的位置稍有不同,TEE,His标签序列和Factor XA酶切位点。

    pColdIV载体序列

      
    LOCUS       pCold\IV                4359 bp    DNA     circular SYN 10-AUG-2004
    DEFINITION  Expression vector pColdIV DNA, complete sequence.
    ACCESSION   AB186391
    VERSION     AB186391.1  GI:51090256
    KEYWORDS    .
    SOURCE      Expression vector pColdIV
      ORGANISM  Expression vector pColdIV
                other sequences; artificial sequences; vectors.
    COMMENT     This file is created by Vector NTI
                http://www.biofeng.com/
    COMMENT     VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..4359
                         /organism="Expression vector pColdIV"
                         /mol_type="other DNA"
                         /db_xref="taxon:289232"
                         /lab_host="Escherichia coli"
                         /note="expresses an open reading frame directly. This
                         plasmid is derived from pUC118."
         gene            15..464
                         /gene="cspA"
         promoter        15..81
                         /gene="cspA"
         misc_feature    82..121
                         /gene="cspA"
                         /note="synthetic lac operator sequence"
         5'UTR           122..255
                         /gene="cspA"
                         /note="modified cspA 5'UTR"
         misc_feature    253..312
                         /gene="cspA"
                         /note="MCS = Multiple cloning sites contain the follow
                         restriction sites: NdeI, SacI, KpnI, XhoI, BamHI, EcoRI,
                         HindIII, SalI, PstI, XbaI"
         3'UTR           320..464
                         /gene="cspA"
                         /note="cspA 3'UTR"
         misc_feature    complement(663..1136)
                         /note="M13 intergenic region"
         gene            1323..2183
                         /gene="Amp"
         CDS             1323..2183
                         /gene="Amp"
                         /codon_start=1
                         /transl_table=11
                         /product="beta-lactamase"
                         /protein_id="BAD35140.1"
                         /db_xref="GI:51090257"
                         /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGY
                         IELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVE
                         YSPVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRL
                         DRWEPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPL
                         LRSALPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIA
                         EIGASLIKHW"
         rep_origin      2343..2957
                         /note="ColE1 origin"
         gene            complement(3114..4196)
                         /gene="lacI"
         CDS             complement(3114..4196)
                         /gene="lacI"
                         /codon_start=1
                         /transl_table=11
                         /product="lactose operon repressor"
                         /protein_id="BAD35141.1"
                         /db_xref="GI:51090258"
                         /translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAE
                         LNYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERS
                         GVEACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSII
                         FSHEDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREG
                         DWSAMSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDT
                         EDSSCYIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNT
                         QTASPRALADSLMQLARQVSRLESGQ"
    ORIGIN      
            1 aaggaatggt gtggccgatt aatcataaat atgaaaaata attgttgcat cacccgccaa
           61 tgcgtggctt aatgcacatc aaattgtgag cggataacaa tttgatgtgc tagcgcatat
          121 ccagtgtagt aaggcaagtc ccttcaagag ttatcgttga tacccctcgt agtgcacatt
          181 cctttaacgc ttcaaaatct gtaaagcacg ccatatcgcc gaaaggcaca cttaattatt
          241 aagaggtaat accatatgga gctcggtacc ctcgagggat ccgaattcaa gcttgtcgac
          301 ctgcagtcta gataggtaat ctctgcttaa aagcacagaa tctaagatcc ctgccatttg
          361 gcggggattt ttttatttgt tttcaggaaa taaataatcg atcgcgtaat aaaatctatt
          421 attatttttg tgaagaataa atttgggtgc aatgagaatg cgcaggccct ttcgtctcgc
          481 gcgtttcggt gatgacggtg aaaacctctg acacatgcag ctcccggaga cggtcacagc
          541 ttgtctgtaa gcggatgccg ggagcagaca agcccgtcag ggcgcgtcag cgggtgttgg
          601 cgggtgtcgg ggctggctta actatgcggc atcagagcag attgtactga gagtgcacca
          661 taaaattgta aacgttaata ttttgttaaa attcgcgtta aatttttgtt aaatcagctc
          721 attttttaac caataggccg aaatcggcaa aatcccttat aaatcaaaag aatagcccga
          781 gatagggttg agtgttgttc cagtttggaa caagagtcca ctattaaaga acgtggactc
          841 caacgtcaaa gggcgaaaaa ccgtctatca gggcgatggc ccactacgtg aaccatcacc
          901 caaatcaagt tttttggggt cgaggtgccg taaagcacta aatcggaacc ctaaagggag
          961 cccccgattt agagcttgac ggggaaagcc ggcgaacgtg gcgagaaagg aagggaagaa
         1021 agcgaaagga gcgggcgcta gggcgctggc aagtgtagcg gtcacgctgc gcgtaaccac
         1081 cacacccgcc gcgcttaatg cgccgctaca gggcgcgtac tatggttgct ttgacgtatg
         1141 cggtgtgaaa taccgcacag atgcgtaagg agaaaatacc gcatcaggcg tcaggtggca
         1201 cttttcgggg aaatgtgcgc ggaaccccta tttgtttatt tttctaaata cattcaaata
         1261 tgtatccgct catgagacaa taaccctgat aaatgcttca ataatattga aaaaggaaga
         1321 gtatgagtat tcaacatttc cgtgtcgccc ttattccctt ttttgcggca ttttgccttc
         1381 ctgtttttgc tcacccagaa acgctggtga aagtaaaaga tgctgaagat cagttgggtg
         1441 cacgagtggg ttacatcgaa ctggatctca acagcggtaa gatccttgag agttttcgcc
         1501 ccgaagaacg ttttccaatg atgagcactt ttaaagttct gctatgtggc gcggtattat
         1561 cccgtattga cgccgggcaa gagcaactcg gtcgccgcat acactattct cagaatgact
         1621 tggttgagta ctcaccagtc acagaaaagc atcttacgga tggcatgaca gtaagagaat
         1681 tatgcagtgc tgccataacc atgagtgata acactgcggc caacttactt ctgacaacga
         1741 tcggaggacc gaaggagcta accgcttttt tgcacaacat gggggatcat gtaactcgcc
         1801 ttgatcgttg ggaaccggag ctgaatgaag ccataccaaa cgacgagcgt gacaccacga
         1861 tgcctgtagc aatggcaaca acgttgcgca aactattaac tggcgaacta cttactctag
         1921 cttcccggca acaattaata gactggatgg aggcggataa agttgcagga ccacttctgc
         1981 gctcggccct tccggctggc tggtttattg ctgataaatc tggagccggt gagcgtgggt
         2041 ctcgcggtat cattgcagca ctggggccag atggtaagcc ctcccgtatc gtagttatct
         2101 acacgacggg gagtcaggca actatggatg aacgaaatag acagatcgct gagataggtg
         2161 cctcactgat taagcattgg taactgtcag accaagttta ctcatatata ctttagattg
         2221 atttaaaact tcatttttaa tttaaaagga tctaggtgaa gatccttttt gataatctca
         2281 tgaccaaaat cccttaacgt gagttttcgt tccactgagc gtcagacccc gtagaaaaga
         2341 tcaaaggatc ttcttgagat cctttttttc tgcgcgtaat ctgctgcttg caaacaaaaa
         2401 aaccaccgct accagcggtg gtttgtttgc cggatcaaga gctaccaact ctttttccga
         2461 aggtaactgg cttcagcaga gcgcagatac caaatactgt tcttctagtg tagccgtagt
         2521 taggccacca cttcaagaac tctgtagcac cgcctacata cctcgctctg ctaatcctgt
         2581 taccagtggc tgctgccagt ggcgataagt cgtgtcttac cgggttggac tcaagacgat
         2641 agttaccgga taaggcgcag cggtcgggct gaacgggggg ttcgtgcaca cagcccagct
         2701 tggagcgaac gacctacacc gaactgagat acctacagcg tgagctatga gaaagcgcca
         2761 cgcttcccga agggagaaag gcggacaggt atccggtaag cggcagggtc ggaacaggag
         2821 agcgcacgag ggagcttcca gggggaaacg cctggtatct ttatagtcct gtcgggtttc
         2881 gccacctctg acttgagcgt cgatttttgt gatgctcgtc aggggggcgg agcctatgga
         2941 aaaacgccag caacgcggcc tttttacggt tcctggcctt ttgctggcct tttgctcaca
         3001 tagtcatgcc ccgcgcccac cggaaggagc tgactgggtt gaaggctctc aagggcatcg
         3061 gtcgagatcc cggtgcctaa tgagtgagct aacttacatt aattgcgttg cgctcactgc
         3121 ccgctttcca gtcgggaaac ctgtcgtgcc agctgcatta atgaatcggc caacgcgcgg
         3181 ggagaggcgg tttgcgtatt gggcgccagg gtggtttttc ttttcaccag tgagacgggc
         3241 aacagctgat tgcccttcac cgcctggccc tgagagagtt gcagcaagcg gtccacgctg
         3301 gtttgcccca gcaggcgaaa atcctgtttg atggtggtta acggcgggat ataacatgag
         3361 ctgtcttcgg tatcgtcgta tcccactacc gagatatccg caccaacgcg cagcccggac
         3421 tcggtaatgg cgcgcattgc gcccagcgcc atctgatcgt tggcaaccag catcgcagtg
         3481 ggaacgatgc cctcattcag catttgcatg gtttgttgaa aaccggacat ggcactccag
         3541 tcgccttccc gttccgctat cggctgaatt tgattgcgag tgagatattt atgccagcca
         3601 gccagacgca gacgcgccga gacagaactt aatgggcccg ctaacagcgc gatttgctgg
         3661 tgacccaatg cgaccagatg ctccacgccc agtcgcgtac cgtcttcatg ggagaaaata
         3721 atactgttga tgggtgtctg gtcagagaca tcaagaaata acgccggaac attagtgcag
         3781 gcagcttcca cagcaatggc atcctggtca tccagcggat agttaatgat cagcccactg
         3841 acgcgttgcg cgagaagatt gtgcaccgcc gctttacagg cttcgacgcc gcttcgttct
         3901 accatcgaca ccaccacgct ggcacccagt tgatcggcgc gagatttaat cgccgcgaca
         3961 atttgcgacg gcgcgtgcag ggccagactg gaggtggcaa cgccaatcag caacgactgt
         4021 ttgcccgcca gttgttgtgc cacgcggttg ggaatgtaat tcagctccgc catcgccgct
         4081 tccacttttt cccgcgtttt cgcagaaacg tggctggcct ggttcaccac gcgggaaacg
         4141 gtctgataag agacaccggc atactctgcg acatcgtata acgttactgg tttcacattc
         4201 accaccctga attgactctc ttccgggcgc tatcatgcca taccgcgaaa ggttttgcgc
         4261 cattcgatgg tgtccgggat ctcgacgctc tcccttatgc gactcctgca ttaggaagca
         4321 gcccagtagt aggttgaggc cgttgagcac cgccgccgc

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