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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
pQE-82L
- 库存:
大量
- 供应商:
钰博生物
- 规格:
1ug/5ug
载体基本信息
| 出品公司: | Ybscience |
|---|---|
| 别名: | pQE82L, pQE 82L |
| 质粒类型: | 大肠杆菌蛋白表达载体 |
| 表达水平: | 低拷贝 |
| 启动子: | T5 |
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体大小: | 4752 bp |
| 5' 测序引物及序列: | pQE30-F: AGCGGATAACAATTTCACACAG |
| 3' 测序引物及序列: | pQE30-R: TTCTGAGGTCATTACTGGATC |
| 载体标签: | N-His |
| 载体抗性: | Ampicillin |
| 备注: | QIAexpress pQE系列载体可以使用氨苄敏感的含有pREP4抑制子质粒或者含有lacIq基因的F因子决定簇的菌株中进行扩增和维持。同样的, pQE-80L系列载体编码有lacIq抑制因子, 可以使用任何大肠杆菌菌株进行扩增. pQE系列载体的配套表达菌株为M15[pREP4]. |
| 稳定性: | 瞬时表达 Transient |
| 组成型: | 组成型 Constitutive |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
pQE82L载体质粒图谱和多克隆位点信息
pQE82L载体简介
pQE82L载体序列
LOCUS pQE82L.html' target='_blank'>pQE-82L 4752 bp DNA circular SYN DEFINITION pQE82L.html' target='_blank'>pQE-82L ACCESSION KEYWORDS SOURCE ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors. COMMENT This file is created by Vector NTI http://www.biofeng.com/ COMMENT ORIGDB|GenBank COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com| COMMENT VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.| FEATURES Location/Qualifiers source 1..4752 /organism="pQE-82L" /mol_type="other DNA" gene 347..1006 /label="CAT/CamR" /gene="CAT/CamR" CDS 347..1006 /label="ORF frame 2" terminator 1074..1117 /label="rrnB_T1_terminator" misc_feature complement(1250..2341) /label="lacI" CDS complement(1250..2209) /label="ORF frame 3" misc_feature complement(2494..2516) /label="pGEX_3_primer" gene complement(3687..4547) /label="Ampicillin" /gene="Ampicillin" CDS complement(3687..4547) /label="ORF frame 2" promoter complement(4589..4617) /label="AmpR_promoter" ORIGIN 1 CTCGAGAAAT CATAAAAAAT TTATTTGCTT TGTGAGCGGA TAACAATTAT AATAGATTCA 61 ATTGTGAGCG GATAACAATT TCACACAGAA TTCATTAAAG AGGAGAAATT AACTATGAGA 121 GGATCTCACC ATCACCATCA CCATGGGATC CGCATGCGAG CTCGGTACCC CGGGTCGACC 181 TGCAGCCAAG CTTAATTAGC TGAGCTTGGA CTCCTGTTGA TAGATCCAGT AATGACCTCA 241 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文献和实验药品试剂:纯化的gusA 片段及pQE31 BamHI/HindIII 片段1% 6-well agarose gelDNA 标准分子量 (λMr, 0.5 μg/μL)方法步骤:1) 取4 支微量离心管,依下表加入DNA, TE-8.0 及追踪染剂 (μL):2) 短暂离心混合后,将各管样品置65℃水浴5~10 min 后,移至冰浴降温后进行电泳分析。3) 将胶体置于UV transilluminator 上观察各色带的亮度,与已知量的 λMr 比较,找出分别与#3, #4 亮度相当的片段
8.0) PCI (25:24:1) RNase A (1 mg/mL) 1% agarose gel 方法步骤: 1) 由前一天转形所得的转形株中,挑选12~24 个单一菌落,在LB/Amp plate上划数道短的横线或斜线,同时也须要接种带有载体pQE31 的菌株,于37℃培养过夜或直至菌体长出。 2) 以接种环将菌体刮下,悬浊在30 μL 1×NET 中,震荡混合均匀。 ◆ 不要忘了pQE31/JM109! 3) 加入30 μL PCI,剧烈震荡。 4) 以12,000 rpm 离心
蛋白是相当重要的;同时可以纯化出那些完整表达的蛋白,一些在翻译过程中容易造成“暂停”现象的蛋白就不用怕纯化产物里含有不完整的产物。融合了6×组氨酸标签的有pQE-60和pQE-70,融合了6×His-DHFR的有pQE-16。 顺式抑制载体 pQE系列的表达载体一般情况下需要在M15菌株中进行表达的,但是设计的pQE80L系列就没有这种约束,它可以在任意大肠杆菌株中进行表达。这与一般的pQE载体利用M15中质粒pREP4的反式lacI抑制子调控不同,它是利用顺式lacIq调控产生大量lac抑制
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