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北京现货C端BFP标签融合蛋白质粒(蓝色荧光蛋白)销售

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  • ¥180 - 1920
  • 百奥莱博
  • 北京
  • YT463-LGT
  • 2025年07月16日
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      -20℃

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      长期

    • 英文名

      C-BFP plasmid(with CMV promoter)

    • 库存

      585

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博供应的北京现货C端BFP标签融合蛋白质粒(蓝色荧光蛋白)销*(代"售")用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多C端BFP标签融合蛋白质粒(蓝色荧光蛋白)等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。


    名称:北京现货C端BFP标签融合蛋白质粒(蓝色荧光蛋白)销*(代"售")
    品牌:百奥莱博
    规格:1μg
    编号:YT463
    本质粒是哺乳动物细胞表达质粒,用于表达C端含BFP(蓝色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个BFP的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有BFP标签的融合蛋白。利用BFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用BFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。BFP与GFP高度相似,可以尝试用GFP抗体检测BFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。


    本质粒的主要信息如下:

     
    Feature Nucleotide Position
    CMV promoter 1-602
    T3 promoter and T3 primer binding site 620-639
    Multiple cloning site 651-740
    BFP 741-1460
    T7 promoter and T7 primer binding site 1510-1531
    SV40 polyA signal 1543-1926
    f1 origin of ss-DNA replication 2064-2370
    bla promoter 2395-2519
    SV40 promoter 2539-2877
    Neomycin/kanamycin resistance ORF 2912-3703
    HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal 3704-4162
    pUC origin 4291-4958



    本质粒(5010bp)的图谱如下:
    产品细节图片1

    使用说明:
    1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
    2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

    储存条件:-20℃。

    北京现货C端BFP标签融合蛋白质粒(蓝色荧光蛋白)销*(代"售")极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:

    ·EZH2抑制剂(E7438)
    编号:YT930
    英文名称:EPZ-6438
    规格:10mM×0.2ml|5mg|25mg
    本品是一种有效的,选择性EZH2抑制剂,无细胞试验中Ki和IC50分别为2.5nM和11nM,比作用于EZH1选择性高35倍,比作用于14种其他HMT选择性高4500多倍。

    CAS:1403254-99-8
    分子式:C34H44N4O4
    分子量:572.74
    纯度:98.1%
    结构式:
    产品细节图片2

    EPZ-6438浓度依赖性降低野生型或SMARCB1突变细胞中总体H3K27Me3水平,并引起去除SMARCB1的MRT细胞系中强的抗增殖作用,IC50范围为32nM到1000nM。EPZ-6438引起神经元分化的基因表达和细胞周期抑制,同时抑制Hedgehog通路基因,MYC和EZH2。在几种EZH2突变体淋巴瘤细胞中,EPZ-6438的抗增殖作用被*化泼尼松或地塞米松增强。

    储存条件:-20℃,有效期12个月。


    ·一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(红色荧光)
    编号:YT136
    英文名称:One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit
    规格:20次|50次
    本试剂盒提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经过固定和洗涤的细胞或组织,只要经过一步染色反应,洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现红色荧光的凋亡细胞。本试剂盒足够检测20个样品。

    试剂盒组分:
    TdT酶—————————40μl
    荧光标记液——————960μl
    TdT酶稀释液(选用)———00μl

    细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl
    Transferase,TdT)的催化下加上红色荧光探针Cy3(Cyanine 3)标记的dUTP,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。

    本试剂盒有如下优点:
    (1)高灵敏度:背景染色极低,阳性染色明亮,可以在单细胞水平检测到细胞凋亡,同时由于凋亡早期就有DNA断裂,可以检测到早期的细胞凋亡。
    (2)特异性:TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞,而不容易标记坏死细胞。
    (3)快速:仅需约1-2个小时即可完成。
    (4)方便:只需一步染色反应,洗涤后即可观察,不必使用二抗等进行多步操作。
    (5)应用范围广:可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。

    TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开,另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。

    极少数细胞凋亡时没有DNA断裂,此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下,最好同时检测多个凋亡指标。

    注意事项:
    1. 需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS,用于封片的抗荧光淬灭封片液(YT097),用于固定的4%多聚甲醛或向百奥莱博订购免疫染色固定液(YT086),同时需自备含0.1% Triton X-100的PBS或向百奥莱博订购免疫染色洗涤液(YT089)。
    2. 如果用于石蜡切片的检测,需自备蛋白酶K,二甲*。

    储存条件:-20℃。


    北京现货C端BFP标签融合蛋白质粒(蓝色荧光蛋白)销*(代"售")关键词:C端BFP标签融合蛋白质粒,YT463,蓝色荧光蛋白,C端BFP标签融合蛋白质粒(蓝色荧光蛋白),C-BFP plasmid(with CMV promoter)


    ·Nestin抗体
    编号:YT826
    英文名称:anti-Nestin antibody
    规格:>20次
    本抗体是用人工合成的人nestin羧基端附近包含150个*基酸的一段多肽作为抗原制备而成的抗nestin小鼠单克隆抗体。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。

    本Nestin抗体识别的是总nestin(total nestin),可以检测内源性的nestin。

    Nestin,中文名为巢蛋白,是胚胎中枢神经系统祖细胞(progenitor cell)的主要中间纤维(intermediate filament)蛋白。Nestin在大脑发育过程中高表达,但在大脑发育成熟后表达量会急剧下降,被神经纤维(neurofilament)蛋白所替代。由于nestin在神经细胞和胶质细胞及它们的前体细胞中都有表达,并且nestin在发育的大脑和受损伤的大脑和脊髓中都有表达,因此nestin被广泛用作神经干细胞(neural stem cells)或神经祖细胞(neural progenitor cells)的分子标记。Nestin在胶质瘤(glioma),神经母细胞瘤(neuroblastomas)等不同的神经系统肿瘤细胞中被发现,因此nestin也被广泛作为神经肿瘤干细胞(neural cancer
    stem cells)的分子标记。由于Nestin在其它类型细胞中也有表达,以nestin作为分子标记进行判定的时候最好还能同时结合其它指标。Nestin是肌肉发育过程中动态微丝网络的组成部分,可以聚合Desmin和Vimentin。Nestin与Vimentin和α-internexin形成异源复合物,并进一步装配成中间纤维。在快速生长过程中,nestin特异表达在神经上皮干细胞(neuroepithelial stem cells)、胶质瘤(glioma)细胞和肿瘤内皮细胞中。Nestin在神经元轴突生长过程中分布在生长锥(growth cone),可能和生长锥的导向(guidance)有关。

    产品组份:
    Nestin抗体————200μl
    Western一抗稀释液————20ml

    抗体参数:
    免疫原物种:人
    免疫原:人工合成的人nestin羧基端附近包含150个*基酸的一段多肽
    克隆性:单克隆
    宿主:小鼠
    用途:WB,IP,IF,IHC
    交叉反应性:人
    同种型:IgG1
    Nestin分子量:200~220kD
    推荐稀释比例:WB(1:100),IP(1:10),IF(1:25),IHC(1:15)

    注意事项:
    1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
    2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。

    储存条件:-20℃,有效期一年。


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    ·ARE荧光素酶报告基因质粒(抗氧化响应元件)
    编号:YT447
    英文名称:ARE-luc Reporter gene plasmid
    规格:1μg
    ARE荧光素酶报告基因质粒是用于检测基于顺式作用元件antioxidant responseelement(ARE,抗氧化响应元件)的转录活性水平的报告基因质粒。pARE-luc是以pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了2个ARE结合位点,可以高灵敏度地检测顺式作用元件ARE的激活水平,可以用于检测细胞的抗氧化水平或氧化应激状态。

    pGL6质粒模板是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。

    ARE质粒的主要信息如下:
     
    Base pairs 5622
    ARE response element(ARE RE) 32-77
    luc2 reporter gene 123-1775
    SV40 late poly(A)signal 1810-2031
    SV40 early enhancer/promoter 2079-2497
    Synthetic neomycin phosphotransferase  
    (Neor)coding region 2522-3316
    Synthetic poly(A)signal 3341-3389
    Reporter Vector primer 4(RVprimer4)binding region 3456-3475
    ColE1-derived plasmid replication origin 3713
    Synthetic Beta-lactamase(Ampr)coding region 4504-5364
    Synthetic poly(A)signal/transcriptional pause site 5469-5622
    Reporter Vector primer 3(RVprimer3)binding region 5571-5590


    ARE质粒的图谱如下:
    产品细节图片3

    使用说明:
    1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
    2. pARE-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT273)。

    储存条件:-20℃。



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    相关实验
    • 蛋白表达及纯化研究中的FAQ,转自生物通

      后,2000倍稀释大量培养。 含有疏水基团的重组蛋白往往对宿主菌有毒性。因此,除非有特殊的意义,应当去除插入片段中编码信号肽序列或穿膜区的序列。然而,也有少数包含信号肽的蛋白可以在膜间质少量的表达。这种情况下,建议诱导前培养温度降低为25度。 有些蛋白,尤其是小于10KDa的蛋白在E. coli中不稳定,可能很快被细菌中的蛋白酶降解。克服这种困难的方法包括:降低培养温度到30度;使用一种或多种蛋白酶缺陷的宿主菌;使用QIAGEN公司的表达质粒pQE-16、pQE-40,使生成目标多肽与DHFR的融合蛋白

    • (z)蛋白表达及纯化研究中的FAQ

      -16、pQE-40,使生成目标多肽与DHFR的融合蛋白;如果是纯化过程中蛋白易降解,则可以在纯化试剂中加入甘油以及蛋白酶抑制剂,并且确保整个操作在4度完成。 2、如何在E. coli中表达高度毒性的蛋白? 在E. coli中表达高度毒性的蛋白往往是很困难的。毒性基因表达‘泄漏’会杀死宿主菌,尤其在早期的生长或转化后,可以使含有突变的不表达质粒的细菌选择性生 长。因此,要表达高毒性的蛋白,需要更高水平的lac 抑制蛋白。推荐同时使用QIAGEN公司的pQE-80L系列表达载体和M15

    • 蛋白质表达的经验:如何做好原核表达

      融合表达标签(Tag),表达产物为融合蛋白(有分N端或者C端融合表达),方便后继的纯化步骤或者检测。对于特别小的分子建议用较大的Tag(如GST)以获得稳定表达;而一般的基因多选择小Tag以减少对目的蛋白的影响。His-Tag是最广泛采用的Tag。 分泌表达:在起始密码和目的基因之间加入信号肽,可以引导目的蛋白穿越细胞膜,避免表达产物在细胞内的过度累积而影响细胞生长,或者形成包含体,而且表达产物是可溶的活性状态不需要复性。通常这种分泌只是分泌到细胞膜和细胞壁之间的周质空间。

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