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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
两年
- 英文名:
Embryonic Cell Lysis SolutionEmbryonic Cell Lysis Solution
- 库存:
996
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京胚胎裂解液现货价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京胚胎裂解液现货价格
品牌:百奥莱博
英文名:Embryonic Cell Lysis SolutionEmbryonic Cell Lysis Solution
产地:国产|进口
编号:BTN130806
规格:1mL
本产品是胚胎培养过程中分离单个胚胎细胞的裂解液。可用于分离得到不同时期的胚胎的单细胞,得到的单细胞可用于各种单细胞分析,核酸提取等实验。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期两年。
除北京胚胎裂解液现货价格外,我公司正在打折促销以下产品:
·通用酶缓冲液
编号:BTN131180
英文名称:Universal Enzyme Buffer
规格:1mL
本产品是通用的工具酶缓冲液,跟常见的各种分子生物学工具酶兼容,免去试验中更换缓冲液的麻烦。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·大肠杆菌TB1感受态细胞
编号:BTN140645
英文名称:E.coli TB1 Rosetta Competent Cell
规格:10*100μl
本感受态细胞来源于JM 83,是JM 83 hsdR型,只含有大肠杆菌RNA polymerase,缺少BL21(DE3)菌株的T7 RNA polymerase,适合NEB公司的pMAL 系列质粒原核蛋白表达(The pMAL vectors use the E. coli RNA polymerase),不能用于pET 系列质粒的表达,具有链霉素抗性。TB1感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
菌株基因型:F– ara Δ(lac-proAB)rpsL(Strr)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15] thi hsdR。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴25分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中并静置2-3分钟,晃动会降低转化效率。
4. 每个离心管中加入700μl 无菌的2YT或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,200rpm 振荡培养60分钟使菌体复苏。
5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μL左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
6. 将平板倒置于37℃培养箱中培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μL转化产物涂布平板。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM 均可)。
4. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
北京胚胎裂解液现货价格关键词:BTN130806,Embryonic Cell Lysis SolutionEmbryonic Cell Lysis ,胚胎裂解液
·常态细胞转化液(免感受态细胞制备)
编号:BTN51101
英文名称:Tranzol
规格:20次
本品能使各种常态的E.coli细胞直接用于快速转化实验,使广大用户不再因为简单的转化实验而再为感受态细胞的制备,保存和运输等繁琐的事情而操心,大大地缩短了基因克隆实验的时间,提高使用者的工作效率。
产品特点:
1. 不需专门制备感受态细胞,直接使用常态的细胞进行质粒转化,随用随配,十分方便。
2. 常态细胞包括新鲜培养的菌液,新鲜的或4℃放置数月的培养基菌落,甘油菌种保存液等。
3.适用菌种和质粒广泛,用过的E.coli菌种包括K12 系的DH5a和Tg1,B 系的BL21(DE3)。用过的质粒有pGEM,pET和Clion系列等。
4.转化效率适中,使用10ng质粒转化一般能得到上万个转化子)效率在10E5 到10E6 CFU/ug质粒之间),使用3-5μL连接液转化一般能得几千个转化子,足够筛选重组子使用(但不适合构建文库)。
5. 单管快速操作,整个操作可以在一个1.5mL塑料离心管中进行,最短可以在三十分钟内完成,不需要过夜细菌培养,热休克处理甚至恒温摇床,极其适用于自动化的大规模克隆筛选工作。
6. 稳定性好,本可以在-20℃条件下长期保存而不用担心转化效率的降低,而感受态细胞在同样条件下会迅速失去活性。
| 成分 | 规格 |
| 常态转化液 | 1ml |
| 阳性对照(pGEM3或pUC19)10μL,1ng/μL | 5T |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 标记无菌的1.5mL塑料离心管并加入1mL液体培养基(如SOC或LB),每次转化试验最好加上阳性对照(用提供的pGEM3或其他质粒)和阴性对照(不加DNA)各一个。
2. 如果使用E.coli菌落,则直接用接种环,无菌牙签或无菌吸头从培养皿上挑取1-5个菌落(直径在3-5 mm之间)到每个离心管中,用移液枪轻柔吹打散开。如果使用甘油菌种保存液,则直接取50-100μl菌种液到1mL培养液中。如果使用单个菌落培养得到的新鲜培养液,则取1mL培养了3-4小时的菌液直接从第4步开始。
3. 37℃保温1小时(如果保温时间延长到3-4小时,可以提高转化效率一倍,但过长则转化效率又开始降低)。
4.室温10000rpm离心1分钟后小心移弃上清(液体培养基),离心速度低于10000rpm则细菌沉淀易丢失。沉淀的细菌约芝麻或麦片大小为宜。细胞过多或过少都不好。
5. 短暂离心,用移液枪小心将残留的培养液(约50μl)吸出,否则残留培养基将会严重影响转化效率,故此步不能省略。
6. 加入50μl 冰浴的Clion转化液并小心将细胞吹打均匀。
7. 加DNA样品。在样品管中加入1-5μl连接反应液并轻柔吹打均匀;在阳性对照管中加入5 ng阳性质粒(没被酶切的载体,也可以使用常用的pGEM,pUC,pBR322等质粒);在阴性对照管中加入连接反应的阴性对照,如果没有则不加入任何溶液或加入1-5μl无菌水。
8. 将上述离心管置于-20℃直到液体凝固为止(一般需要20分钟到1小时),然后冰浴放置5-10分钟。
9.在每个离心管中加入1mL无抗菌素的SOC或LB培养液,混匀后置37℃水浴保温1小时以便让抗性基因表达,否则将没有转化子生长。
10. 将溶液充分吹打混匀后分别取30-200μl分别涂于含相关的抗菌素的培养盘上,剩余溶液最好留4℃待用。
11. 37℃ 16-24小时培养,阴性对照盘上不应有任何落菌,否则可以判断操作中有污染或培养基中抗菌素浓度不够。使用质粒转化的阳性对照100μl涂盘一般能有上千个菌落。连接样品转化所得菌落数将取决于连接反应效率等多种因素,100μl的涂盘一般有几十到几百个转化子。
使用效果:
左图是用10 ngClionG载体转化10个E.coli Tg1菌落后得到的转化子。右图是用3μL连接液(ClionB载体+1 Kb DNA片段,10μL反应体系)转化10个E.coli DE3菌落后37℃过夜保温得到的转化子。涂盘量均为200μL。
北京胚胎裂解液现货价格关键词:BTN130806,Embryonic Cell Lysis SolutionEmbryonic Cell Lysis ,胚胎裂解液
·柱式白色念球菌RNA提取试剂盒
编号:BTN130847
英文名称:Candida albicans RNA Column extraction kit
规格:50次
·TdT加尾法DNA地高*(代"辛")标记试剂盒
编号:BTN90605C
英文名称:TdT-Tailing DNA Labeling Kit
规格:5次
本试剂盒是基于TdT末端转移酶能够在DNA的3´端添加dNTP尾巴的原理而设计,该反应的示意图如下:
产品特点:
1.快速,15分钟即可完成标记反应。
2. 不但可用于单链DNA和DNA Oligo标记,还可用于3´突出的双链DNA标记,但后者标记效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
4. 提供不带标记核苷酸、带生物素标记核苷酸和带地高*(代"辛")标记核苷酸三种选择。
5. 同时提供非标记的dATP,用户可以用其调节加尾长短和标记核苷酸掺入比例。
6. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| TdT缓冲液,5× | 20μl |
| TdT(末端转移酶,10U/μL) | 10μl |
| dATP,2mM | 5μl |
| 标记核苷酸 | (A、B、C不同,见注) |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
注:A型用于自选标记,用户需自备标记核苷酸,本产品不提供标记核苷酸;B型提供5μl Biotin-11-dUTP;C型提供含5μl DIG-11-dUTP。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在0.2mL微量离心管中按下表设置一个20μl体系的标记反应(如果需要标记更多探针,请增加标记体积而不要增加探针DNA的浓度):
| 成份 | 用量 |
| 探针DNA | 100-200 pmol |
| TdT Buffer,5× | 4μl |
| 标记核苷酸,1mM (A型需自备标记核苷酸) |
1μl |
| dATP,2mM | (见下注) |
| TdT末端转移酶(10U/μL) | 2μl |
| 超纯水 | 补到20μl |
注:dATP可以不加,但这样得到的加尾全部是标记核苷酸,由于空间阻碍,灵敏度不一定最佳。如果杂交效果不好,掺入一定比例的dATP到标记核苷酸中,以控制标记的密度,提高比活。具体比例如何可以自己优化。
2. 37℃反应15分钟,延长到30分钟也可以。如果没有非标记核苷酸存在,一般可以加尾3-5个Biotin或DIG标记的核苷酸(标记物空间阻碍抑制延长);如果有在加尾反应中加入一定比例的非标记核苷酸dATP(其他dNTP也可,只是本试剂盒只提供dATP而已),每条探针上可加上约100个核苷酸,平均含5个标记核苷酸
3. 70℃ 10分钟灭活TdT酶。
4. 如果需要,可以PAGE电泳+银染(相关试剂需要另购)检测标记效率,带标记的探针泳动速度将低于没标记的探针。
5. 如果是非同位素标记,探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非同位素标记的探针,请不要酚/*仿抽提,因为非同位素标记物一般会使探针DNA进入有机相而丢失。
6. 使用时需将探针以1-8 ng/μL的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链DNA,加入前还需热变性)。如果不立即使用,非同位素标记的探针DNA可-20℃长期放置一年,同位素标记的探针DNA不能放置。
北京百莱博科技有限公司专业生产克隆与表达产品,欢迎来电咨询选购北京胚胎裂解液现货价格。
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