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N端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)怎么卖

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • YT474-FKI
  • 2025年07月08日
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    • 英文名

      N-CFP plasmid(with CMV promoter)

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      774

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    N端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)怎么卖是高品质的克隆与表达产品,由北京百奥莱博供应,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多N端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。


    名称:N端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)怎么卖
    产地:国产|进口
    规格:1μg
    编号:YT474
    品牌:百奥莱博
    英文名:N-CFP plasmid(with CMV promoter)
    本质粒是哺乳动物细胞表达质粒,用于表达N端含CFP(Cyan Fluorescent Protein, 青色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个CFP的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有CFP标签的融合蛋白。利用CFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达量和细胞内定位,也可以利用CFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。CFP与GFP高度相似,可以尝试用GFP抗体检测CFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

    本质粒质粒的主要信息如下:

     
    Feature Nucleotide Position
    CMV promoter 1-602
    T3 promoter and T3 primer binding site 620-639
    CFP 677-1393
    Multiple cloning site 1394-1483
    T7 promoter and T7 primer binding site 1503-1524
    SV40 polyA signal 1536-1919
    f1 origin of ss-DNA replication 2057-2363
    bla promoter 2388-2512
    SV40 promoter 2532-2870
    Neomycin/kanamycin resistance ORF 2905-3696
    HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal 3697-4155
    pUC origin 4284-4951


    本质粒(5003bp)的图谱如下:
    产品细节图片1

    使用说明:
    1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
    2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

    储存条件:-20℃。

    关于N端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)怎么卖的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
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    ·末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)
    编号:YT512
    英文名称:Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
    规格:500U
    本酶是一种模板依赖的DNA聚合酶,可以催化在寡核苷酸、单链或双链DNA的3"羟基端加上dNTP。可以催化的寡核苷酸的最短长度为3个核苷酸。

    用途:寡核苷酸或DNA 3"羟基末端标记;DNA末端加尾(DNA tailing);5"-RACE;合成同一种脱氧核苷酸的寡聚链等。
    来源:由大肠杆菌表达,表达基因的来源为小牛胸腺。
    活性定义:37℃60分钟内,催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3"羟基末端中所需的酶量定义为1个活性单位。
    酶活性检测条件:200mM potassiu*(代"m") cacodylate(pH7.2),1mM CoCl2,0.1mM DTT,0.01%(v/v)Triton X-100,10μM oligo(dT)10,1mM dTTP and 0.4MBq/ml[3H]-dTTP。
    纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNase。
    酶储存溶液:100mM KAc(pH6.8),2mM 2-mercaptoethanol,0.01%(v/v)Triton X-100 and 50%(v/v)glycerol 。
    Reaction Buffer(5X):0.125M Tris(pH7.2 at 25℃),1M potassiu*(代"m") cacodylate,0.05%(v/v)Triton X-100,5mM CoCl2。
    失活或抑制:70℃加热10分钟或加入适量EDTA均可导致Terminal Deoxynucleotidyl Transferase失活。金属离子螯合剂,较高浓度的铵根离子、*离子、碘离子和磷酸根均对Terminal Deoxynucleotidyl Transferase有抑制作用。
    储存条件:-20℃。

    使用说明:

    1. DNA 3’末端标记:
    a. 参考如下表格设置反应体系:
    待标记DNA————————————————————10 pmol of 3"-termini
    Reaction Buffer (5X) ——————————————10µl
    [α-32P]-ddATP, ~10TBq/mmol (3000Ci/mmol)————1.85 MBq (50µCi)
    TdT (20U/µl) ——————————————————2µl
    补充无核酸酶的去离子水 —————————————至50µl
    b. 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
    c. 37℃孵育15分钟。
    d. 70℃孵育15分钟或加入5µl 0.5M EDTA终止反应。
    说明:标记的效率和3’羟基末端的类型有关,3’突出末端的标记效率要显著高于3’缩进末端或平末端的标记效率。

    2. DNA末端加尾(DNA Tailing):
    a. 参考下表格设置反应体系:
    DNA片段 ————————————————————1 pmol of 3"-termini
    Reaction Buffer (5X)——————————————4µl
    dATP or dTTP——————————————————130pmol
    或 dGTP or dCTP (四种中通常只需加入一种)————60pmol
    TdT (20U/µl)——————————————————1.5µl
    补充无核酸酶的去离子水—————————————至20µl
    b. 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
    c. 37℃孵育15分钟。
    d. 70℃孵育15分钟或加入5µl 0.5M EDTA终止反应。
    说明:在上述反应条件下,每个3’羟基末端可以加上100-130个dA或dT,或20-30个dC或dG。

    3. 其他用途可以参考上述用途或适当的文献资料进行。


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