EDTA-柠檬酸钠抗原修复液(40X) 免疫检测

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博供应的EDTA-柠檬酸*抗原修复液(40X) 免疫检测用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多EDTA-柠檬酸*抗原修复液(40X)等免疫检测产品请联系我司咨询订购。

名称：EDTA-柠檬酸*抗原修复液(40X) 免疫检测
品牌：百奥莱博
规格：125ml
英文名：EDTA-Citrate Antigen Retrieval Solution
编号：YT082
本品是一种常用的抗原修复液，结合了柠檬酸*和EDTA进行抗原修复的优点，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。

细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致蛋白之间的交联(cross-link)，从而遮蔽样品的抗原位点，导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。

本抗原修复液采用了常用的柠檬酸*缓冲液和EDTA，结合了两者修复抗原的优点，并经过适当优化，可以更加有效地去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。

通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果，但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联，充分暴露抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。

本产品适用于石蜡切片，也可以用于冰冻切片等其它样品。

一个包装的本产品可以配制成5000毫升抗原修复液(1X)。按照每个片子需要10毫升抗原修复液(1X)计算，一个包装的本产品可以用于500个样品。

注意事项：
1. 抗原修复过程可以使用百奥莱博的染色缸和染色架或邮寄夹进行操作。塑料染色缸、染色架和邮寄夹可以很好地耐受沸水浴，而玻璃染色缸需避免骤冷骤热导致的玻璃破碎。
2. 本抗原修复液使用前必须用重蒸水或Milli-Q水稀释40倍，配制成抗原修复液(1X)。
3. 冻存的本产品需适当加热后才能完全溶解。同时由于本产品含有少量的特殊去垢剂，加热后会产生非常细密的气泡而呈现非常均匀的类似浑浊状，属于正常现象，并非不溶解或产生了沉淀。室温放置较长时间后，例如1-2天，溶液会完全澄清。对于溶解后呈现非常均匀的类似浑浊状的本产品，此时即可取适量稀释后使用。抗原修复过程中加热时也会产生非常细密的气泡而呈现均匀的浑浊状，也属于正常现象，请放心使用。

储存条件：4℃，有效期一年。

除EDTA-柠檬酸*抗原修复液(40X) 免疫检测外，我公司正在打折促销以下产品：

·硫*(代"酸")卡那霉素溶液(细菌培养用)
编号：YT432
英文名称：Kanamycin (10mg/ml,1000X)
规格：5ml
本品为细菌培养常用抗生素，用于配制含卡那霉素的LB或LB平板等，也可以用于培养细胞的杀菌。本品经过滤除菌，使用时可以按照1:1000的比例稀释使用。

CAS：25389-94-0
分子式：C18H36N4O11·H2SO4
分子量：582.58

储存条件：-20℃。

·RSK1/p90RSK抗体
编号：YT843
英文名称：anti-RSK1/p90RSK antibody
规格：>20次
本抗体是用人工合成的小鼠RSK1的一段多肽(aa695-708，CNSSKPTPQLKP IES)，相当于人RSK1的aa706-719，进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

本RSK1抗体识别的是总RSK1(total RSK1)，可以检测内源性的RSK1，未发现和RSK2、RSK3有交叉反应。

RSK1，也称p90RSK(90 kD ribosomal S6 kinase)或RPS6KA1(ribosomal protein S6 kinase α-1)，属于一类广泛表达的丝*酸/苏*酸激酶。RSK家族包括RSK1、RSK2、RSK3和RSK4，它们的典型特征是含有两个不同的功能性激酶结构域和羧基端ERKs(extracellular signal-regulated kinases)结合结构域。RSK激酶结构域内外的几个位点包括Ser380、Thr359、Ser363和Thr573的磷酸化都对RSK的激酶活性激活非常重要。RSK1-3可以被MAPKs所磷酸化激活，也可以通过自身磷酸化激活，还可以被一些生长因子或神经递质等诱导激活的PI3K信号通路所激活。RSK在被MAPK磷酸化激活时，是由Ras、Raf-1、MAP kinase kinase(MEK)和MAP kinase信号通路所介导。PI3K诱导的RSK1激活是由丝*酸/苏*酸激酶mTOR介导的。RSK1在葡萄糖稳态调控和细胞大小的调控中起重要作用。RSK可以磷酸化并调节转录因子c-fos和糖原合成酶激酶3(GSK3,glycogen synthase kinase 3)的活性。有报道RSK1可以和MAPK1、IκBα、TOB和TSC2等相互作用。RSK可以在有丝分裂信号刺激下会转位到细胞核内。

产品组份：
RSK1/p90RSK抗体————100μl
Western一抗稀释液————20ml

抗体参数：
免疫原物种：小鼠
免疫原：小鼠RSK1的一段多肽(aa695-708，CNSSKPTPQLKP IES)，相当于人RSK1的aa706-719
宿主：兔
用途：WB,IP
交叉反应性：人，小鼠，大鼠
同种型：IgG
RSK1/p90RSK分子量：～90kD
推荐稀释比例：WB(1:200),IP(1:20)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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F050314 马IgG抗体 Horse IgG
PY01-004  大豆蛋白胨  1公斤  
ARB12588 大鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)Elisa方法检测 Rat matrix metalloproteinase 3,mmp-3 ELISA KIT
T4 DNA连接酶 Sodium succinate dibasic hexahydrate 9015-85-4
ARB10857 人抗染色体抗体(Anti-chromosome Ab)ELISA代测服务 Human anti-chorionic gonadotropin-antibody,ahcgab ELISA KIT
乙基纤维素 Sodium acetate anhydrous 9004-57-3
甲*(代"酚")红*盐 Maltodextrin 62625-29-0
ARB13969 猪胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)含量分析 Porcine igfbp ELISA KIT
ARB11721 人游离β绒毛膜促性腺激素(f-βhCG)定量分析 Human free chorionic gonadotropin,f-βhcg ELISA KIT
ARB13649 兔子催乳素(PRL)酶联免疫定量检测 Rabbit prolactin,prl ELISA KIT
SJ0189 Dextran T-10  葡聚糖 T-10
BTN111009 端粒酶重复片段扩增试剂盒 TRAP Kit
HC0033 Transwll 聚碳酸酯膜嵌套5.0um
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·T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)
编号：YT513
英文名称：T4 Polynucleotide Kinase
规格：100U|500U
本酶是一种多聚核苷酸5"羟基激酶，可以催化ATP的γ位磷酸基团向单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3"磷酸基团的单核苷酸的5"羟基转移。其他NTP也可产生相同的反应：5"-OH + NTP → 5"-P + NDP。

上述的磷酸化反应是可逆的。当缺失ATP并且存在ADP的情况下，T4 Polynucleotide Kinase可以显示出5"磷酸酯酶的活性，催化单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3"磷酸基团的单核苷酸的5"磷酸基团向ADP的转移形成ATP。其他NTP也可产生相同的反应：5"-P + NDP → 5"-OH + NTP(最适pH为6.4左右)。

当ATP和ADP都适量存在时，T4 Polynucleotide Kinase可以催化单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3"磷酸基团的单核苷酸的5"磷酸基团和ATP的γ位磷酸基团之间的交换反应。其他NTP也可产生相同的反应：5"-P + NTP + NDP→5"-P + NDP + NTP。T4 Polynucleotide Kinase同时具有3"磷酸酯酶活性，可催化3"磷酸化的多聚核苷酸的去磷酸化：3"-P → 3"-OH + Pi(最适pH为5.9左右)。T4 Polynucleotide Kinase的激酶活性在C-末端附近，而磷酸酯酶活性在N-末端附近。

产品组份：
T4 Polynucleotide Kinase(10U/μl) ——————100U
Reaction Buffer A(10X)————————————80μl
Reaction Buffer B(10X)————————————40μl
24% PEG Solution———————————————40μl

用途：寡核苷酸、DNA或RNA的5"末端标记，用作Southern、Northern、EMSA等的探针，凝胶电泳的marker，DNA测序引物，PCR引物等；使寡核苷酸、DNA或RNA的5"端磷酸化，确保后续连接反应顺利进行；催化3"磷酸化的单核苷酸的5"磷酸化，使该单核苷酸可以和DNA或RNA的3"末端连接；去除3"端磷酸基团。
来源：由大肠杆菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义：37℃30分钟内，将转移ATP上1 nmol γ-磷酸基团转移到DNA 5"-OH末端所需的酶量定义为1个活性单位。
酶活性检测条件：100mM Tris-HCl(pH8.0)，10mM MgCl2，5mM DTT，0.5mM 5"-OH DNA，0.05mM ATP，0.1MBq/ml [γ-33P]-ATP。
纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶。
酶储存溶液：20mM Tris-HCl(pH7.5)，25mM KCl，0.1mM EDTA，2mM DTT，50% glycerol。
Reaction Buffer A(10X)(用于磷酸化反应)：500mM Tris-HCl(pH7.6 at 25℃)，100mM MgCl2，50mM DTT，1mM spermidine，1mM EDTA。
Reaction Buffer B(10X)(用于交换反应)：500mM imidazole-HCl(pH6.4 at 25℃)，0.18M MgCl2，50mM DTT，1mM spermidine，1mM EDTA，1mM ADP。
失活或抑制：75℃加热10分钟可使T4 Polynucleotide Kinase失活，加入EDTA也可使T4 Polynucleotide Kinase失活。金属离子螯合剂、磷酸盐、铵根离子、大于50mM的KCl和NaCl均可显著抑制T4 Polynucleotide Kinase的活性。
储存条件：-20℃。

注意事项：
1. 铵盐沉淀获得的DNA不能用于T4 Polynucleotide Kinase的标记反应。铵盐可强烈抑制T4 Polynucleotide Kinase的酶活性。
2. PEG可促进磷酸化反应速率和效率；交换反应体系应加入PEG。

使用说明：
1. DNA 5" 末端标记：
a. 参考如下表格设置反应体系：
待磷酸化DNA—————————————————1~20pmol (5" 末端)
Reaction Buffer A (10X)———————————2µl
[γ-32P or γ-33P]-ATP (3,000Ci/mmol)————20pmol
补充无核酸酶的去离子水 ———————————至19µl
T4 Polynucleotide Kinase (10U/µl)——————1µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育30分钟。
d. 加入1µl 0.5M EDTA (pH8.0)混匀，以终止反应。
e. 后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒(YT009)可以向百奥莱博订购。

2. DNA 5’ 末端磷酸化：
a. 参考如下表格设置反应体系：
待磷酸化DNA————————————————1~20pmol (5" 末端)
Reaction Buffer A (10X)——————————2µl
0.1mM ATP—————————————————1µl
补充无核酸酶的去离子水 ——————————至19µl
T4 Polynucleotide Kinase (10U/µl)—————1µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育30分钟。
d. 加入1µl 0.5M EDTA (pH8.0)混匀，以终止反应。
e. 后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒(YT009)可以向百奥莱博订购。

3. 通过交换反应(exchange reaction)进行DNA 5" 末端标记：
a. 参考如下表格设置反应体系：
待磷酸化DNA——————————————————1~20pmol (5" 末端)
Reaction Buffer B (10X)————————————2µl
[γ-32P or γ-33P]-ATP (3,000Ci/mmol)—————40pmol
24% PEG Solution ———————————————4µl
补充无核酸酶的去离子水 ————————————至19µl
T4 Polynucleotide Kinase (10U/µl)———————1µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育30分钟。
d. 加入1µl 0.5M EDTA (pH8.0)混匀，以终止反应。
e. 后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒(YT009)可以向百奥莱博订购。

4. 其它用途可以参考上述用途或相关文献资料进行。

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