Taq DNA聚合酶供应

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百奥莱博专业生产供应Taq DNA聚合酶供应，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：Taq DNA聚合酶供应
英文名：Taq DNA Polymerase
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：BTN51206
本产品是Thermus aquaticus(水生栖热菌)的DNA聚合酶基因在E. coli中表达而得,具有以双链DNA为模板的5´→3´聚合酶活性和5´→3´外切酶活性。Taq DNA聚合酶长为832个*基酸，分子量为94 Kd。该酶可以广泛用于PCR，RT-PCR，加尾反应等。

产品特点：
1．耐热DNA聚合活性，该酶在90℃以上几乎无DNA合成，在75～80℃时延伸率约150个核苷酸，70℃时为60个核苷酸/秒，55℃时为24个核苷酸/秒。在65～68℃并有Mn2+存在时还具有逆转录活性。
2．热稳定，在PCR混合物中95℃保温40分钟仍可保持50%的活性。
3．Mg2+离子依赖性，MgCl₂浓度在2.0mM时该酶催化活性最高。
4．本酶无3´→5´外切活性，不具3´→5´校对功能，碱基错配机率为2.1×10⁻⁴。

产品组成：

 

成分	规格
Taq DNA聚合酶(5U/μL)	20μl
10×PCR Buffer(含Mg2+)	1ml
MgCl2，25mM	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：(以λDNA为模板进行PCR扩增反应为例)

1．按下列组份配制PCR反应液。

Taq DNA聚合酶(5U/μl)	0.25μl
10×PCR Buffer(含Mg2+)	5μl
MgCl₂(25mM)	根据需要补加
自备dNTP(各2.5mM)	4μl
模板DNA	见下
引物1(20μM)	1μl
引物2(20μM)	1μl
灭菌蒸馏水	Up to 50μl

注：10×PCR Buffer含15mM MgCl2(在PCR体系中的终浓度为1.5mM)，是否需要补加MgCl2根据实验决定。但一般不需要补加。
推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量

哺乳动物基因组DNA	0.5-1μg
酵母基因组DNA	5-500ng
细菌基因组DNA	0.5-50ng
质粒DNA	5-500pg
PCR回收片段	1-100pg

2．PCR反应条件
以λDNA为模板，扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下：

注：PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

注意事项：
PCR的反应液请在冰中配制，然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法可增强PCR扩增的特异性，减少PCR过程中的非特异性反应，能得到良好的PCR结果。

想要了解更多关于Taq DNA聚合酶供应的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：
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DN4001 病毒基因组DNA快速提取试剂盒
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Taq DNA聚合酶供应关键词：BTN51206,Taq DNA聚合酶,Taq DNA Polymerase

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ARB12971 小鼠肌*蛋白T(Tn-T)血清中含量检测 Mouse troponin t,tn-t ELISA KIT
Taq DNA聚合酶供应关键词：BTN51206,Taq DNA聚合酶,Taq DNA Polymerase


·柱式细菌DNA提取试剂盒(含)
编号：BTN60802B
英文名称：Bacteria DNA column extraction kit(with lysozyme)
规格：50次
本试剂盒可以用于绝大多数革氏阳性和阴性细菌基因组DNA的快速提取。

试剂盒特点：
1. 操作简单，整个过程不到20分钟。
2.产率一般在5-20μg/mL过液培养的饱和菌液(108-109个细胞)。
3. OD260/280一般在1.8以上，可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。
4. DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
5. 每次提取可以处理0.1-1.5mL的细菌，也可以使用菌落。
6. 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格便宜。
7. 安全无毒，本试剂盒对人体无害，无腐蚀性和刺激性气味。
8. 本产品分A型(无溶菌酶，适用于革氏阴性细菌)和B型(含溶菌酶，适用于革氏阳性细菌)。

试剂盒组成：

成分	A型	B型
溶菌酶干粉	无	600mg
溶液A	15ml	15ml
溶液B	7.5ml	7.5ml
溶液C	30ml	30ml
离心吸附柱	50套	50套
通用洗柱液	50ml	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml	10ml
说明书	1份	1份

储存条件：常温运输及保存(溶菌酶需要-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
注意：溶液A和溶液B容易产生沉淀，溶液B十分粘稠，均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。

一: 对革氏阴性细菌样品，只需用A型
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的菌液转移到1.5mL离心管中，12000rpm室温离心1min沉淀细菌，弃上清。
2. 加入300μL预热的溶液A到细菌沉淀中，充分吹打均匀。
3. 再加入150μL预热的溶液B到离心管中，颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。由于溶液B比较粘稠，可以采取称量方法取用，150μL约等于150-160mg。也可以将1mL枪头剪去一截再吸取。
4. 65℃放置3～5分钟。如果室温放置，DNA产量会降低10-20%。
5. 加入200μl自备*仿，震荡混匀10-30秒，此时溶液将呈乳白色。
6. 12000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明，中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中，避免触及中间层的白膜。
7. 加入1.5倍体积(约0.7mL)的溶液C，颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中，室温放置至少2分钟。
8. 12000rpm室温离心1分钟，DNA将吸附在离心吸附柱的膜上，倒弃收集管中的穿透液。
9. 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中，12000rpm室温离心1分钟，弃穿透液。
10. 重复上步操作一次。
11. 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5mL离心管中。
12. 加50-100μL通用洗脱液，室温放置3～5分钟。
13. 12000rpm室温离心1分钟即得DNA溶液。
14. 由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强，可以重复上步操作一次以便得到更多的DNA。
15. 直接取5-10μL电泳检测DNA，其余放冰箱备用。
二: 对革氏阳性细菌样品，需用B型(含溶菌酶)
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的革氏阳性细菌12000rpm室温离心1分钟后，重悬于0.6mL溶菌液中(溶菌液配制:30mL无菌水+600mg溶菌酶，配制后最好分装成小管并放-20℃长期保存，每次只用一小管)，颠倒混匀5-10次后放37℃保温至少30分钟(有的革氏阳性菌种可能需更长时间，自己摸索)。
2. 12000rpm室温离心10分钟，小心弃上清。
3.后续处理接上面的革氏阴性细菌提取步骤中的第2步。
三:其他注意事项
1.可以直接使用细菌菌落提取DNA，操作时直接将细菌菌落挑入到溶液A中，后续操作同上。
2.从单个菌落中提取到的DNA较少，所以只用30μL通用洗脱液洗脱。

使用效果：

图注:用本产品提取1.0mL过夜培养的E.coli Tg1细菌，DNA最后溶于100μL TE中，取20μL上样。M表示全长的λDNA,其余均为提取的样品DNA。

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