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上海希言科学仪器有限公司
Hotstar Taq DNA聚合酶
HotStart Taq DNA聚合酶是一种创新型的抗体修饰的热启动酶。该酶在室温下活性被完全封闭,避免了在样品准备及第一循环反应升温阶段产生非特异性扩增和引物二聚体,增加DNA扩增的特异性。加热到70℃时,结合在酶上的抗体迅速失活,且不会影响之后的Taq DNA聚合酶反应。
使用抗体的热启动法,与化学修饰热启动法不同,无需长时间的变性步骤,具有在第一循环的变性步骤中即可完全失活的优点,该酶具有特异性好、灵敏度高、重复性好、扩增效率高等优点。
| 产品名称 | 编号 | 规格 | 包装 | 单价 | 加入购物车 |
|---|---|---|---|---|---|
| Hotstart Taq DNA Polymerase | 80103S | 250U | ¥398.00 | ![]() |
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| Hotstart Taq DNA Polymerase | 80103L | 1000U | ¥1280.00 | ![]() |
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| Hot Start Taq DNA Polymerase(无外切酶活性) | 80124S | 250U | ¥398.00 | ![]() |
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| Hot Start Taq DNA Polymerase(无外切酶活性) | 80124L | 1000U | ¥1280.00 | ![]() |
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| Hot Start Taq DNA Polymerase(无外切酶活性) | 80124XL | 10000U | ¥12800.00 | ![]() |
- 产品介绍
1、活性单位定义: 70℃条件下,30分钟内将10nmol脱氧核糖核苷酸(dNTPs)合成多聚核苷酸所需的酶量定义为1个活性单位。
2、保存液: 50mM Tris-HCl (pH 8.0), 100mM KCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 0.5%(v/v)NP-40, 0.5%(v/v)Tween-20, 50%(v/v)Glycerol
3、贮存条件:-20℃.
4、纯度:无核酸酶污染。
5、HotStart Standard Reaction Buffer(10×,不含Mg2+):200mM Tris-HCl (pH8.8 at 25℃), 200mM KCl, 50mM (NH4)2SO4,0.5%(v/v)Tween-20, 0.5%(v/v)NP-40.
6、失活或是抑制
- 低浓度的尿素、甲酰胺、二甲基甲酰胺(DMF)和二甲基亚砜(DMSO)对HotStart Taq DNA聚合酶的活性无抑制;
- 较高浓度的非离子表面活性剂如Tween-20、NP-40和Triton X-100(>5%)能抑制HotStart Taq DNA聚合酶的活性;
- 极低浓度的离子表面活性剂如脱氧胆氨酸钠(<0.06%),十二烷基肌氨酸钠(<0.02%),十二烷基硫酸钠(SDS,<0.01%)几乎完全抑制HotStart Taq DNA聚合酶活性;
- 酚/氯仿抽提可使HotStart Taq DNA 聚合酶丧失活性。
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文献和实验的前提条 件,也是PCR反应能迅速发展和广泛应用的原因.Taq DNA聚合酶还具有逆转录活性, 其作用于类似逆转录酶.此活性温度一般为65~68℃,有Mn2+存在时,其逆转录活性 更高. (二)离子依赖性 aqDNA 聚合酶 是Mg2+依赖性酶,该酶的催化活性对Mg2+浓度非常敏感.以活性程度 很低的鲑鱼精子DNA为模板,dNTP的浓度为0.7~0.8mmol/L时,用不同浓度Mg2+进行 PCR反应10min,测定结果为Mgcl2浓度
Taq DNA聚合酶是从一种水生栖热菌(Thermusaquaticus)yT1株分离提取的.yT是 一种嗜热真菌,能在70~75℃生长.该菌是1969年从美国黄石国家森林公园火山温泉 中分离的.(一)酶活性与热稳定性该酶基因全长2496个碱基,编码832个氨基酸,酶蛋白分子为 94KDa.其比活性为200000单位/mg.75~80℃时每个酶分子每秒钟可延伸约150个核苷 酸,70℃延伸率大于60个核苷酸/秒,55℃时为24个核苷酸/秒.温度过高(90℃以上) 或过低(22℃)都可影响Taq
mmol/L时可抑制40~50%的酶活性。由于Mg2+能与dNTP结合而影响PCR反应液中游离 的Mg2+浓度,因而MgCl2的浓度在不同的反应体系中应适当调整,优化浓度。一般反应中Mg2+浓度至少应比dNTP总浓度高0.5~1.0mmol/L。适当浓度的KCL能使Taq DNA聚合酶的催化活性提高50~60%,其最适浓度为50mmol/L,高于75mmol/L时明显抑制该酶的活性。 (三)忠实性 TaqDNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,而无3'→5'外切活 性,它不具
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