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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
干冰运输、-80℃保存
- 保质期:
长期
- 英文名:
E.coli T1 Chemical Competent Cell
- 库存:
580
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货大肠杆菌T1化学感受态细胞特价优惠,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货大肠杆菌T1化学感受态细胞特价优惠
编号:BTN140391
产地:国产|进口
规格:0.1mL*10
英文名:E.coli T1 Chemical Competent Cell
本产品是采用大肠杆菌Mach1-T1 Phage Resistant菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。
产品特点:
1. 本感受态细胞是目前生长速度最快的感受态细胞,在*苄青霉素平板上,8-9h可见克隆;用于蓝、白斑筛选,12 h可见蓝斑;将过夜培养的单克隆在2ml的LB培养基中培养4-5h即可进行小量质粒提取。
2.适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,减少克隆DNA同源重组的发生,提高质粒DNA的产量和质量。
3. 本产品具有T1,T5噬菌体抗性。
4. 使用pUC19质粒检测,转化效率可达109cfu/μg。
菌株基因型:F- φ80(lac Z)ΔM15 ΔlacX74 hsdR(rkmk+)ΔrecA1398 endA1 tonA
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μl感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
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英文名称:Bone DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是专门用于从动物骨骼(包括骨粉)样品中提取DNA的产品,20次规格足够50次微量提取。
产品特点:
1. 微量提取,一次可以处理300mg左右的骨骼(但需要先将骨粉变成骨粉)。
2. 柱式操作,方法简单,整个过程只需要40-60分钟。
3. 得到的DNA分子量不均匀,一般在20 Kb到100bp之间,具体取决于骨骼的新鲜程度,骨粉的加工方法等。
4. 得到的DNA可以直接用于PCR或荧光PCR反应。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50mL |
| 溶液B | 15mL |
| 溶液C | 30mL |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50mL |
| DNA洗脱液2.0 | 10mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 骨粉的制备:用自备酒精将骨骼表面擦洗干净,以防污染物对后续PCR的影响,然后用骨钻在处理干净的骨骼区域钻取骨粉。对于已经制备好的、商品化的骨粉,可以跳过此步,直接进入下一步。
2. 用天平称取0.2克骨粉,转移到2mL塑料离心管中。
3. 加入1mL溶液A到骨粉中,充分振荡30秒混匀。(注意:溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用,且骨粉加到溶液A中后会特别黏稠,需使劲振荡混匀。)
4. 65℃水浴放置30分钟。
5. 加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自备*仿,充分振荡30秒混匀。
6. 12000rpm室温离心3分钟,小心将上清液转移到一个新的塑料离心管中。
7. 加入0.5mL溶液C,颠倒混匀。
8. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中,每次转移后需要 12000rpm室温离心1分钟,并弃收集管中的穿透液。
9. 加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
10. 再加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
11. 12000rpm室温离心半分钟,弃含穿透液的收集管。此步干甩十分重要,否则残留的液体会抑制后续的PCR。
12. 将离心吸附柱套入到一个自备的干净的1.5mL塑料离心管中,在离心吸附柱的滤膜的中部加入30μL DNA洗脱液,然后室温放置2分钟。如果先将DNA洗脱液预热到60-80℃再使用,效果更佳。
13. 12000~15000g室温离心1分钟,离心管中收集的样品即为骨骼DNA。
14. 取少量进行电泳检测。注意:一般DNA都呈现弥散状,分布在20 Kb到100bp这一广泛的范围,其比例跟骨骼(或骨粉)的新鲜程度、加工过程(对骨粉)等因素密切相关。
15. DNA样品可以直接用于PCR,也可放-20℃长期保存。
北京现货大肠杆菌T1化学感受态细胞特价优惠关键词:E.coli T1 Chemical Competent Cell,大肠杆菌T1化学感受态细胞,BTN140391
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感染体系配合,实现组织特异性基因敲减。 *与英茂盛业病毒表达系统兼容。 原理 pRI-CMV/GFP-miRNA载体采用CMV启动子高效表达人工设计的miRNA,后者从肠道转录本被加工,进而导致特异性的miRNA降解。 服务流程 1)针对特定基因,设计miRNA序列,合成寡核苷酸 并退火成双链DNA。 2)将DNA与pRI-CMV/GFP-miRNA载体连接,转化大肠杆菌 感受态细胞。 3)测序
菌,调控方式为化学信号诱导型, 类似于Lac表达系统。 从开始涉及表达的时候可以根据是否要用基因本身的起始密码子 进行选择,Novagen公司仅提供三个载体 :pET-21(+),pET-24(+)和pET-23(+)。如果你打算利用载体的起始密码子,那么就有许多选择。 根据是否要可溶性表达,选择加有不同标记的载体。一般说来在 大肠杆菌中不加标记外源蛋白都会以不溶的包涵体形式表达。为了让 外源蛋白融合表达一般说来有三个策略: 1. 与一个高度可溶的多肽联合一起表达
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