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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
干冰运输、-80℃保存
- 保质期:
长期
- 英文名:
E.coli OmniMAX2-T1 Phage Resistant Chemical Competent Cell
- 库存:
688
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant化学感受态细胞折扣价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant化学感受态细胞折扣价
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:E.coli OmniMAX2-T1 Phage Resistant Chemical Competent Cell
编号:BTN140430
本产品是采用大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,本产品转化效率可达10⁹。本产品具有四环素抗性。
菌株基因型为:F- {proAB+ lacIq lacZΔM15 Tn10(TetR)Δ(ccdAB)} mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80(lacZ)ΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169 endA1 recA1 supE44 thi-1 gyrA96 relA1 tonA panD
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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N-(2-乙酰*基)-亚*基二乙酸二*盐 Ethylenediaminetetraacetic acid manganese disodiu*(代"m") salt hydrate 41689-31-0
PY02-273 胰酪胨大豆琼脂 250克
ARB12090 大鼠牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)定量分析 Rat calf intestine alkaline phosphatase,ciap ELISA KIT
BL1379 4×SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(PH=6.8)
F020225 兔抗鸭IgY IgG抗体 Rabbit Anti-Duck IgY
乙酸* AHMT 127-08-2
F030418 胶体金标记兔抗猪IgG抗体 Rabbit Anti-Pig IgG*GOLD
ARB13026 小鼠肝脂酶(HL)elisa检测 Mouse hepatic lipase,hl ELISA KIT
859-18-7 Lincomycin Hydrochloride 林可霉素盐*(代"酸")盐
对甲*亚磺酸* p-Phthalaldehyde 824-79-3
BTN100818 MDS 42rec A trf A菌种 MDS 42rec A trf A Strain
BTN131117 DNA包被溶液 DNA Coating Solution
过氧化物酶(辣根) Sodium 1-propanesulfonate monohydrate 9003-99-0
PY01-168 孔雀石绿 ind 25克
大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant化学感受态细胞折扣价关键词:BTN140430,E.coli OmniMAX2-T1 Phage Resistant Chemical Compet,大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant化学感受态细胞
M0109 过氧化*(代"脲")
3,4-二甲氧基*甲*(代"酸") Thio-NAD 93-07-2
BTN131043 CHAPS CHAPS
C0101 胎牛血清(无菌过滤)
噻唑橙 3-Hydroxyphenylacetic acid 107091-89-4
CYB163059 兔抗猴IgG-FITC
BL1256 50bp DNA Ladder
ARB13918 猪免疫球蛋白G(IgG)酶免分析 Porcine immunoglobulin g,IgG ELISA KIT
BL0819 HRP标记兔抗牛IgG抗体
ARB12130 大鼠甲状旁腺激素(PTH)ELISA检测服务 Rat paRathyroid hormone,pth ELISA KIT
ARB12915 小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)含量检测 Mouse leukemia inhibitory factor receptor,lifr ELISA KIT
F030441 胶体金标记小鼠抗鸡IgY(IgG)抗体 Monoclonal Mouse Anti-Chicken IgY*GOLD
ARB13526 兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)定量分析 Rabbit bcl-2 assaciated x protein,bax ELISA KIT
大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant化学感受态细胞折扣价关键词:BTN140430,E.coli OmniMAX2-T1 Phage Resistant Chemical Compet,大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant化学感受态细胞
·亮抑蛋白酶胎溶液(10mg/mL)
编号:BTN100836
英文名称:Leupeptin Solution
规格:1mL
本产品是浓度为10mg/mL水溶液。工作浓度为0.5mg/mL。其作用是抑制丝*酸和巯基蛋白酶,如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、组织蛋白酶B、血纤维蛋白溶酶、激肽释放酶等。亮抑蛋白酶肽是由玫瑰链霉菌Streptomyces roseus MB-26-AI产生的胰蛋白酶抑制剂,它是许多蛋白酶抑制剂中的一种,它的抑制作用与底物呈竞争性抑制。对血纤维蛋白溶酶的抑制IC50(半抑制浓度)为8μg/mL,但不抑制糜蛋白酶。
储存条件:低温运输,4℃保存一周,-20℃保存6个月。
·SSPE溶液,20×
编号:BTN100809
英文名称:Saline-Sodium Phosphate-EDTA
规格:250mL
20×的SSPE含3M NaCl、0.2M NaH2PO4、0.02M Na2EDTA,pH为7.4。它是一种在核酸分子杂交中广泛使用的溶液。其特点首先是盐浓度接近饱和,可以非常方便地稀释到不同浓度,提供不同的杂交和洗涤严谨度。其次,高盐浓度可以抑制微生物生长,便于长期放置。最后,它可以用于几乎所有核酸杂交试验。由于缓冲能力比SSC强,更适合于需要稳定pH的实验。
储存条件:常温运输及保存、有效期两年。
·动物细胞裂解液A(非变性)
编号:BTN80807A
英文名称:Animal Cell Lysis Solution(A)
规格:100mL
本产品含有多种细胞裂解成分和蛋白酶抑制成分,可以在非变性或变性条件下迅速裂解组织或培养细胞,使之释放出细胞内蛋白,用于后续实验。
产品特点:
1.快速裂解,多种裂解成分经过精心优化,能快速使细胞裂解。
2. 非变性(BTN80807A)产品能最大程度地保留蛋白天然结构和功能,主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀,还可以用于蛋白活性检测(信号传递研究和酶动力学检测)和Western Blot等各种后续实验。
3.变性(BTN80807B)裂解细胞的效率更高,主要用于对抗原空间构型不敏感的免疫共沉淀实验,还可以用于Western Blotting。
4.适用于培养细胞(包括悬浮细胞)和新鲜组织。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
注意事项:
1. 如果在本产品中额外再加入终浓度为1×的、新鲜配制的蛋白酶抑制剂复合物,可以更有效地抑制蛋白酶活性,防止蛋白降解。
2. 如果用于信号传递研究,最好在本产品中加入终浓度为1×的、新鲜配制的磷酸酶抑制剂复合物。
3. 整个裂解步骤都要在冰浴或4℃操作。本产品和PBS 均需预先冷却。
4. 本产品所含有较高浓度的去垢剂会对Bradford蛋白浓度测定有较大影响,因此只能使用BCA法测定蛋白浓度。
使用方法:
一:处理贴壁的培养细胞
1. 去除贴壁细胞培养液,用冰浴预冷的PBS 洗两遍,去尽残留的PBS。
2. 将培养板放置在冰上待用。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品(或100mm 贴壁细胞加1mL 本产品)的比例向培养板中加入适量的本产品(按此比例裂解得到的裂解物的蛋白浓度约在5-10mg/mL 之间)。
注意:裂解效率跟细胞数量和本产品用量的比例密切相关。一般情况下6孔板的单孔(1~2×106细胞)需要0.1~0.2mL本产品;25 cm2培养瓶(3~6×106细胞)需要0.3~0.6mL;75 cm2培养瓶(1~2×107细胞)需要1~2mL。对于特别大或特别小的细胞,需要用户摸索最佳用量。
4. 冰上放置10-30分钟(最佳时间跟细胞系相关),其间偶尔轻轻摇晃或用枪头轻轻吹打。
5. 将细胞培养板倾斜使上清液汇集在一端,并将其全部转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。
6. 15000×g,4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中,放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,最好新鲜使用。
7. 用前最好先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。
二:处理悬浮细胞
1. 400×g,4℃离心10分钟收集悬浮细胞,弃上清。
2. 用等体积的预冷PBS 洗涤细胞沉淀两遍,步骤同第一步。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品的比例加入本产品,充分悬浮细胞。
4. 冰上放置15分钟裂解细胞,期间偶尔轻柔震荡。
5. 15000×g,4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。为避免吸取到细胞沉淀,最好留20-40μL液体不取。
6. 将上清液放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,最好新鲜使用。
7. 使用前最好先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。
三:处理组织块
1. 称量组织块,用毛玻片或玻璃匀浆器研磨或匀浆,用5-10倍体积的、预冷的PBS洗两次(包括冲洗器材)。
2. 将匀浆物转移到离心管中,1500g、4℃离心5分钟后弃上清。
3. 按每50mg 组织加入0.2mL 本产品的比例加入预冷的本产品,吹打混匀,放置冰上。
4. 每隔5分钟振荡器轻柔振荡一次,共4次。
5. 15000×g、4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中,放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,最好新鲜使用。
6. 使用前最好先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。
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