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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
One-tube RT Kit
- 库存:
565
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的一管式反转录试剂盒北京厂家现货用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多一管式反转录试剂盒等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。
名称:一管式反转录试剂盒北京厂家现货
规格:10次
产地:国产|进口
英文名:One-tube RT Kit
本产品是一管式反转录预混Mix,内含反转录第一链合成所需的所有试剂(MMLV、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer等),用户只需加入模板 RNA和RNase-Free 水即可进行反应。
产品特点:
1. cDNA的合成更加方便,用户只需准备模板和水即可进行反应。
2.快捷,操作步骤已经最大限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 效率高,特殊优化的oligo dT和N6 随机引物配比,反转录效率高。
4. 速度快,只需42℃,20分钟即可完成cDNA 第一链的合成。
5. 能够用于GC含量高,二级结构复杂的RNA 模板,合成cDNA片段长度可达12kb。
6. 兼容性好,合成的cDNA可直接用于荧光定量PCR反应,灵敏度高、稳定性好。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 2×RT MasterMix | 0.1ml |
| RNase-Free 水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 解冻后颠倒轻弹混匀各组分,以20μL 体系为例,按下表加入(2×RT Master Mix很粘稠,取用前请短暂离心,并避免吸头外壁沾附损失):
2×RT MasterMix
| 10μl | |
| Total RNA/mRNA 模板(自备) | 50ng-2μg/5-200ng |
| 补RNase-Free 水到 | 20μl |
注意:对于二级结构很复杂的RNA 模板,推荐使用变性步骤,即在操作步骤之前,将模板RNA在65℃孵育5分钟后迅速转移到冰上,再进行下一步操作。
2. 轻轻混匀,42℃孵育20分钟进行反转录反应。
注意:对亍二级结构复杂或者GC含量高的模板,可以提高温度至50℃,以增强反转录效率。
3. 85℃加热5秒钟灭活反转录酶置冰上备用(更长时间保存请置于-20℃)。
注意事项:
1. 实验过程中请注意避免RNase污染,防止RNA降解或实验中的交叉污染。
2. 使用之前请完全溶解并充分混匀,以防因盐离子浓度丌均影响实验结果。
3. 使用后应尽快放回-20℃,避免反复冻融。
4. RNA模板的完整性对cDNA合成效率起着决定性作用,因此请选择可靠的RNA提取/纯化方法。
5. 如果扩增片段较长或者RNA结构复杂,为了加强转录效果,可以将RNA单独置于65-70℃加热5-10分钟后再加入体系。
6. 操作人员请带口罩和一次性手套,并经常更换手套。
更多有关一管式反转录试剂盒北京厂家现货的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·dATP溶液(100mM)
编号:BTN120615
英文名称:dATP Solution(100mM)
规格:0.5mL
本产品纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。
dATP分子式为C10H13N5O12P3Na3,分子量是557.2,消光系数为15.2×103 M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为259nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·柱式尿液DNA提取试剂盒
编号:BTN90314
英文名称:Urine DNA column extraction kit
规格:50次
尿液中的DNA主要是来自于尿道中脱落的细胞,用尿液DNA进行分子生物学基础研究和临床诊断有很多特殊的优点:
1)尿液收集物是非介入、无创伤性的。
2)从尿液中提取DNA要比从血液中提取DNA更加简单。本产品就是专门用于从尿液中提取基因组DNA的产品,提取的DNA可直接用于PCR反应。
产品特点:
1.操作简单,整个过程室温操作约20分钟,适合大规模样品处理。
2.DNA产率女性一般为53-200ng/mL尿液,男性一般为3-50ng/mL尿液。
3.所提取的DNA纯净,可直接用于PCR、DNA甲基化鉴定、癌症检测等。
4.安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
5.性价比高,质量和国外同类产品相当,但价格更便宜。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 20mL |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50mL |
| 通用洗脱液 | 5mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.收集1.5-50mL尿液样品到适当的离心管中,室温2000rpm离心10分钟。
2.小心吸弃上清,加入300μL溶液A,漩涡震荡,直到溶液变得澄清。
3.将液体转移到离心吸附柱中并静置2-5分钟,以使DNA与膜充分结合。
4.12000rpm离心半分钟,DNA将吸附到膜上,弃收集管中的废液。
5.加入0.7mL的通用洗柱液,12000rpm离心半分钟,弃收集管中的废液。
6.加入0.3mL的通用洗柱液,12000rpm离心半分钟,弃收集管中的废液。
7.12000rpm离心半分钟,甩干残留液体。此步很重要,以去除膜上残留通用洗柱液,否则会影响后续反应。
8.将离心吸附柱置于一新的1.5mL塑料离心管(自备)中,加入30μL通用洗脱液,室温放置2分钟。如果将通用洗脱液在65℃预热后再使用,洗脱DNA的效果会更好。
9.12000rpm离心半分钟,离心管底溶液即DNA溶液。可以立即使用或放冰箱长期保存。
一管式反转录试剂盒北京厂家现货关键词:One-tube RT Kit,一管式反转录试剂盒,BTN170403
·石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒
编号:BTN130888
英文名称:FFPE Total Protein Extraction Kit
规格:50次
石蜡包埋组织是很重要的临床材料,研究其正常细胞和疾病相关的细胞,特别是癌细胞中标记蛋白的差异表达水平,对于判断癌化的进展,癌症的类型的判定,以方便于诊断和治疗有重要的意义,然而体外培养的细胞的蛋白差异表达水平并不能够真实反映体内细胞的真实状况,因此从石蜡包埋组织中提取蛋白并且加以研究有很重要的意义,本试剂盒通过特殊的快速脱蜡试剂和蛋白质抽提试剂,在两种不同的温度条件下温育,可以将被铰链的蛋白质释放出来,经过简单的离心步骤,上清中含有的蛋白经过沉淀洗涤和溶解后,可以用于Western Blot 、SDS-PAGE、ELISA、2D电泳或蛋白质芯片分析等,本试剂盒可以使用50次左右。
产品特点:
1. 不含有去污试剂,适用于非染色的标本。
2.可以适用于甲醛浸泡的组织标本。
3. 不需要超速离心,可以同时处理多个标本。
试剂盒组成:
| 成份 | 规格 |
| 预处理试剂A | 100mL |
| 预处理试剂B | 5mL |
| 提取试剂 | 5mL |
| 沉淀试剂 | 75mL |
| DTT干粉 | 80mg |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:常温下运输和保存,但DTT和提取试剂需要4℃保存,盛装预处理试剂A的瓶子已经密封,请在使用后,将剩余的预处理试剂A倒入一个有内盖的瓶中,同时盖紧内外盖,以防止挥发。盛装预处理试剂A,B和沉淀试剂的瓶盖要盖紧,同时避免火源。
使用方法:
1. 取两块大约10-15μm厚,100mm2石蜡包埋组织切片到1.5mL的干净离心管中,加入1mL预处理试剂A,高速涡悬震荡30 sec,室温静置5 min,期间偶尔颠倒离心管数次。
2. 加入100μL预处理试剂B,涡悬震荡10sec,再10000rpm(10000g)离心2min,移去上下两层的液体。
3. 用500μL的超纯水清洗脱蜡的组织两次,离心并尽量吸去液体,保留组织块沉淀。
4. 加入100μL提取试剂(用前需要将DTT全部加入到装提取试剂的瓶中,摇晃混匀,未用完的提取试剂需要4℃放置),盖上盖子,涡悬震荡数秒。
5.在水浴锅中100℃加热20 min,短暂离心一下,再用组织研磨棒将切片组织磨碎。
6.在水浴锅中60℃加热2 hour,期间大约每20 min取出,震荡一次。
7. 4℃,12000rpm(12830 g)离心15 min,小心将上清转移到一个新的1.5mL的干净离心管中。注意:在上清中的蛋白质可以在4℃的环境条件下保存一个星期,如果需要长期保存,请放置在-20℃的环境中,同时避免 反复冻溶,也可以使用我公司生产的非干扰型蛋白浓度测定试剂盒对上清中的蛋白质直接定量。
8. 加入1mL的沉淀试剂,涡悬震荡10 sec,在4℃的环境中保持10 min。
9. 4℃,12000rpm离心15 min,去除上清,保留沉淀。
10. 加入0.5mL的沉淀试剂,涡悬震荡10 sec,在4℃的环境中保持10 min,再4℃,12000rpm离心15 min,去除上清,保留沉淀,在通风橱中将试管倒置在滤纸上,让残余的液体挥发干净。
11. 将固体沉淀溶解于合适的自备的缓冲液中,再4℃,12000rpm离心5 min,收集上清,用于SDS-PAGE,Western blot等实验。注意:此上清中含有DNA,RNA 残留,所以溶液有些发粘,加入少量的micrococcal nuclease,benzonase等消化,有助于减少粘性,但是即使不处理一般不会影响后续实验,用枪头将沉淀捣碎。建议使用含有Thiourea ,Urea,NDSB-201或其它强溶解能力的去污试剂的缓冲液有利于沉淀的完全溶解。
注意事项:
1. 为提高石蜡包埋组织中蛋白质的回收效率,必须尽量减少在切片制作过程中甲醛固定时间,同时在石蜡包埋前彻底脱水,甲醛固定的时间越长,蛋白质的提取回收效率越低。
2. 尽量取用从石蜡包埋组织块中切取的薄片,或没有封闭到载玻片上的没有经过苏木精等染色的切片。
3. 材料越新鲜或甲醛固定时间越短,蛋白质的回收效率越高。
4. 提取试剂中含有含有刺激性的化合物,操作时要戴好乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,防止吸入口鼻,沾染皮肤 眼睛后,立即用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。
5. 对于甲醛浸泡的组织样本,每次可以取5-10mg的组织样本,用双蒸水洗涤离心收集后后,直接从步骤4开始操作。
6. 提取的蛋白沉淀如果用于ELISA、RIA等免疫实验,可能需要先进行抗原修复程序,但是如果用Western Blot或Dot blot实验,一般情况下没有必要。
7. 本试剂盒只能够用于体外实验,不能够用于临床、治疗和动物体内实验等,由此产生的后果概不承担责任。
一管式反转录试剂盒北京厂家现货关键词:One-tube RT Kit,一管式反转录试剂盒,BTN170403
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