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- 百奥莱博
- 北京
- BTN61203-CKG
- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输及保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
High GC DNA Scavenger
- 库存：
525
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
PCR级高GC的DNA清除剂哪里卖由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多PCR级高GC的DNA清除剂等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。
名称：PCR级高GC的DNA清除剂哪里卖
编号：BTN61203
英文名：High GC DNA Scavenger
规格：1.5mL
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
本产品是我司开发的专门用于富含GC的DNA模板扩增的试剂。
产品特点：
1.高效，使用效果普遍好于常规的添加DMSO和甜菜碱的方法。
2.可以处理GC含量高达80%的DNA模板。
3. 操作简单，将本产品用于溶解DNA沉淀即可使用。
储存条件：常温运输及保存，有效期一年。
使用方法：
将乙醇沉淀的高GC DNA直接溶解在适量的本产品中，充分吹打均匀，然后直接将DNA加入PCR反应体系中进行PCR反应。加入的DNA溶液最好不要超过PCR终体积的1/10。剩余的DNA可以长期保存。
关于PCR级高GC的DNA清除剂哪里卖的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
·96孔板病毒RNA提取试剂盒(真空法)
编号：BTN131191
英文名称：Virus RNA extraction kit with 96-well plate(Vacuum method)
规格：1次
·尿嘧啶切刻酶
编号：BTN130666
英文名称：Uracile Nicking Enzyme
规格：50U
本产品在尿嘧啶位置产生一个单核苷酸缺口，它是尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)和DNA糖基化酶-裂解酶 Endo Ⅷ的混合物。UDG催化尿嘧啶碱基的切割，形成一个脱碱基(脱嘧啶)位点，但保持磷酸二酯骨架结构完整。Endo Ⅷ的裂解酶活力使脱碱基位点 3´和5´端的磷酸二酯键断裂，释放无碱基的脱氧核糖。其反应示意图如下：
产品特点：
1．PCR产物的克隆；
2．在DNA的尿嘧啶处产生缺口。
产品组成：
| 成份 | 规格 |
| 尿嘧啶切刻酶(1000U/mL) | 50μL |
| 10×Buffer | 1mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。
活性定义：1单位指在10μl反应体系中，37℃条件下，15分钟使10pmol的含有单一尿嘧啶碱基的34bp寡核苷酸双链产生切刻所需要的酶量。
PCR级高GC的DNA清除剂哪里卖关键词：BTN61203,High GC DNA Scavenger,PCR级高GC的DNA清除剂
·5´RACE试剂盒
编号：BTN101105
英文名称：5´-RACE Kit
规格：10次
研究真核基因的最基础的工作之一就是确定其转录终止位点，目前最通用的方法是5´-RACE法，RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)是Frohman发明的、通过PCR快速克隆cDNA末端的技术，它在不建立cDNA文库的前提下，利用已知cDNA序列设计引物，通过往两端延伸和扩增获得其5´-端序列。本试剂盒就是根据5´-RACE原理而开发。RACE的原理如下图：
产品特点：
1. 即开即用，客户不需要单独准备各种材料。
2.反应条件经过精心优化，包括使用无RNase H活性的MMLV和优化的引物。
试剂盒组成：
| 成分 | 规格 |
| MMLV逆转录酶-RI混合液(RNase H-，200U/μL) | 10μl |
| MMLV Buffer-dNTP混合液 | 60μl |
| 微量核酸沉淀剂 | 400μl |
| TdT(末端转移酶) | 10μl |
| 2×TdT Buffer(含dATP) | 100μl |
| PCR MagicMix 3.0 | 1.5ml |
| 5´-RACE引物A-引物B混合液 | 100μl |
| 5´-RACE引物C | 100μl |
| RNase-Free水 | 1ml |
储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。
使用方法：
1.变性模板RNA：将1μg mRNA或5μg总RNA加入到一个RNase-free的PCR管中，补RNase-Free水到9μL，65℃保温5分钟后短暂离心，立即放冰上待用。如果RNA浓度偏低，体积超过9μl,可以使用本公司的核酸浓缩剂(需另购,产品编号为BTN110801)浓缩到所需的体积。
2. 设置RT反应(用户可以根据需要设阴性对照)：在上步的含变性后的RNA模板的PCR管中，按顺序加入：
| 成分 | 用量 |
| 自备的基因专一性引物A(10μM) | 4μl |
| MMLV Buffer-dNTP混合液 | 6μl |
| MMLV逆转录酶-RI混合液 | 1μl |
| 合计 | 20μl |
3. 37℃保温60分钟，42℃保温30分钟，50℃保温10分钟，最后75℃保温10分钟使逆转录酶变性。
4. 短暂离心5秒后待用。
5.在PCR管中加入40μl微量核酸沉淀剂(本产品含不溶的核酸助沉剂，用前需要充分摇匀再取用)，震荡混匀。
6.室温12000rpm离心15分钟，小心吸弃上清。
7. 加入1mL自备75%乙醇，室温12000rpm离心5分钟，小心吸弃上清。
8. 短暂离心数秒，小心吸弃残留液体后，稍微晾干后加入10μL RNase-free水，充分吹打溶解，得到cDNA溶液。注意：为保证加尾效率，溶解cDNA的RNase-free水最好不要超过10μl。
9. 加尾反应：在10μL cDNA溶液中加10μL 2×TdT Buffer(含dATP)和1μL TdT酶，轻柔吹打混匀。
10. 37℃保温15分钟进行加尾反应，然后75℃保温3分钟灭活末端转移酶。
11. 加入0.5mL RNase-free水稀释加尾反应体系。此稀释液将作为PCR的模板。
12. 第一轮PCR：用不同量的稀释后的加尾反应液设置PCR反应(样品组最好设用量梯度，单位：μL)。
| 成分 | 梯度1 | 梯度2 | 梯度3 | 梯度4 |
| PCR MagicMix 3.0 | 25 | 25 | 25 | 25 |
| 自备基因专一性引物B(10μM) | 2.5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 |
| 5´RACE引物 A-引物B混合液 | 2.5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 |
| 稀释后的加尾反应液 | 1 | 5 | 10 | 15 |
| RNase-free 水 | 19 | 15 | 10 | 5 |
| 合计 | 50 | 50 | 50 | 50 |
13. 按下列条件进行 PCR(注：应根据实际情况选择适当的退火温度)。
第1次循环：94℃ 5分，48-52℃ 2分，72℃ 4分
第2-30次循环：94℃ 40秒，52-60℃ 1分，72℃ 3分
最后延伸：72℃ 15分
14. 取10-20μL PCR产物进行琼脂糖电泳电泳检查PCR结果，如果一条清晰的条带，则可以不做后续的第二轮PCR，而直接进行 DNA 测序或TA克隆。
15. 第二轮PCR：如果第一轮PCR没有一条清晰的条，则带从4管PCR产物中各取1μL分别加入到20μL RNase-free水中进行稀释，然后各取1μL分别作为4管第二轮PCR的模板：
| 成分 | 用量 |
| 第一轮 PCR产物的稀释液 | 1μl |
| PCR MagicMix 3.0 | 25μl |
| 5´RACE引物 C | 2.5μl |
| 自备基因专一性引物 C(10μm) | 2.5μl |
| RNase-free 水 | 补水至50μl |
| 合计 | 50μl |
16. 按下列条件进行 PCR：第 1-30次循环(94℃ 40秒，52-60℃ 1 分，72℃ 3分)，最后延伸：72℃ 15分
17. 取10-20μL第二轮 PCR产物进行琼脂糖电泳，一般都会有一个样品有清晰的条带出现，则可以直接进行DNA测序或TA克隆。
PCR级高GC的DNA清除剂哪里卖关键词：BTN61203,High GC DNA Scavenger,PCR级高GC的DNA清除剂
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文献和实验xjktony 扩增模板的GC 含量为66％,也不算很高,我做过更高的GC 含量(80%)的PCR.对于这种高GC含量的PCR,要加些DMSO等,以解除其二级结构的影响,当然现在也有专门这种PCR Buffer卖. vanny 宝生物有这种做高GC含量的酶和buffer，称为LA TAKARA酶，里面有GC buffer，效果还不错。 westernblot 你用DMSO5％加到里面，60％应该不是算高的，如果实在不行，就用advantage 2 high GC
xjktony扩增模板的GC 含量为66％,也不算很高,我做过更高的GC 含量(80%)的PCR.对于 这种高GC含量的PCR,要加些DMSO等,以解除其二级结构的影响,当然现在也有专门这种PCR Buffer卖.vanny宝生物有这种做高GC含量的酶和buffer，称为LA TAKARA酶，里面有GC buffer，效果还不错。westernblot你用DMSO5％加到里面，60％应该不是算高的，如果实在不行，就用advantage 2 high GC taq polymeras
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