5M甜菜碱溶液(PCR级)厂家

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名称：5M甜菜碱溶液(PCR级)厂家
英文名：5M Betaine Solution(PCR Grade)
产地：国产|进口
编号：RFT160
品牌：百奥莱博
规格：5×1ml
甜菜碱，DMSO和甲酰胺有助于减少富含GC模板的二级结构和对这些模板扩增，甜菜碱的浓度通常是0.1M～3.5M，DMSO的浓度在2%～8%之间，而且10%的DMSO会使 Taq polymerase的活性降低达50%，甲酰胺通常使用浓度为1%～5%，根据我们经验，甜菜碱和DMSO联合使用的效果优于甲酰胺。

使用方法：
1、-20℃保存的甜菜碱溶液常温融化，混匀。
2、根据根据PCR反应体系，加入适量体积的5M甜菜碱溶液。

 

	20μl 体系	反应体系终浓度
10×PCR Buffer	2μl	1×
5M Betaine*	4μl	1 M
模板	0.05-0.5μg	as you wish
上游引物 10μM	0.5μl	0.2μM
下游引物 10μM	0.5μl	0.2μM
dNTP10mM	0.5μl	200μM
Taq	0.5-1μl	2.5-5 U
灭菌水	up to 20μl

注：不同模板，不同片段的扩增可能需要不同浓度的甜菜碱，可以适当调节加入体积，找到适合自己反应的甜菜碱浓度。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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·蛋白酶抑制剂混合物(100×)
编号：RFT194
英文名称：Protease inhibitor cocktail
规格：1ml|5×1ml
本品是一种通用型用于细胞或组织蛋白提取等的蛋白酶抑制剂混合物(200mMAEBSF, 30μM Aprotinin, 1 mMBestatin,1.4mME64 and 1mMLeupeptin in DMSO)，并提供独立包装的0.1MEDTA。EDTA为单独包装，以便选择性使用。如用于检测金属蛋白酶活性，则不宜添加EDTA。一个包装的本产品通常足够用于100ml裂解液的配制。

细胞或组织提取物等样品中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物等样品中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。

本产品为经优化和测试的用于常规细胞或组织蛋白提取等的蛋白酶抑制剂混合物，包含了广谱的丝*酸、半胱*酸和酸性蛋白酶抑制剂以及*基肽酶抑制剂。

本产品使用便捷，通常以1:100的比例分别把蛋白酶抑制剂混合物(通用型, 100×)和0.1MEDTA(100×)加入裂解液中，即可用于常规的细胞或组织蛋白的提取，并有效抑制蛋白降解。

本产品可以有效抑制常规细胞或组织提取物中的各种蛋白酶活性，如丝*酸蛋白酶、*基肽酶、半胱*酸蛋白酶、苏*酸和天冬*酸蛋白酶、金属蛋白酶等。其中AEBSF是一种水溶性的丝*酸蛋白酶不可逆抑制剂，其抑制常数与PMSF和DFP的抑制常数相似，可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纤溶酶(plasmin)、激肽释放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶，作为PMSF和DFP的替代物，AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液稳定性更好。Aprotinin是丝*酸蛋白酶的竞争性可逆抑制剂；Bestatin是*基肽酶可逆抑制剂；E64是半胱*酸蛋白酶不可逆抑制剂；Leupeptin是丝*酸和半胱*酸蛋白酶可逆抑制剂；EDTA作为螯合剂是金属蛋白酶的可逆抑制剂。

使用方法：
1、本蛋白酶抑制剂混合物为100×的储存液，使用时按照1:100的比例加入到裂解液中(例如，1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制剂混合物)，混匀后即可使用。含有蛋白酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配，不宜配制后冻存待后续使用。根据需要，0.1M的EDTA也按照1:100的比例加入到裂解液中。
2、待所需的抑制剂添加完毕混匀后，就可以开始进行常规细胞或组织的裂解和蛋白提取。
提示：蛋白酶抑制剂混合物尽量避免反复冻融，第一次使用后，可按照每次使用量分装冻存。



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