一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒 DNA纯化

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百奥莱博专业生产销*(代"售")一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒 DNA纯化，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒 DNA纯化
编号：BTN80201
品牌：百奥莱博
英文名：One-step Endotoxin-free plasmid DNA extraction kit
产地：国产|进口
规格：50次
本试剂盒是在一步式质粒DNA提取试剂盒2.0(BTN70903)和液相内毒素清除剂(BTN60607)两产品的基础上开发出来的无内毒素质粒DNA提取试剂。用本产品提取的质粒DNA，内毒素的污染浓度低，适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。

试剂盒特点：
1.在提取质粒前去除内毒素(存在于细菌表面)，从源头上避免料内毒素和质粒DNA 接触，从根本上防止了内毒素对质粒DNA的污染。
2. 独创的一步法质粒DNA提取技术，操作快捷，只需要5-10分钟。
3.质粒回收率高，一次处理后90%的质粒DNA可以回收回来。
4. 得到的质粒DNA可以直接用于转染等实验。

试剂盒组成：

 

成分	规格
菌体内毒素清除剂	200ml
溶液A	50ml
吸附柱活化液	25ml
离心吸附柱(小提)	50只
离心吸附柱(小提)套管	50只
通用预洗液	50ml
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(溶液A最好4℃保存)，有效期一年。

使用方法：

一:菌体内毒素的清除
1. 收集1.5-3mL E.coli 饱和菌液，12000rpm离心1分钟，弃上清，得到细菌沉淀。
2.在沉淀中加入1mL菌体内毒素清除剂，温和混匀后10000-12000rpm离心1分钟，弃上清(含内毒素)。
3. 再重复上述操作3次，得到的菌体沉淀可以直接进入下面的一步法质粒DNA提取操作。

二：一步法质粒DNA提取
4.在菌体沉淀中加入0.6mL溶液A(用前需摇匀)，充分吹打或振荡30秒裂解细菌，直到裂解液变澄清(一般需要半分钟左右)。注:此方法丌同于碱裂解法，故可以充分吹打或振荡。
5.活化离心吸附柱：在离心吸附柱中加入0.5mL 吸附柱活化液，套上收集管后室温放置2分钟，然后12000rpm离心2分钟，倒弃穿透液，再将吸附柱套上收集管后待用。活化后的离心吸附柱必须立即使用。如果丌活化，质粒得率将低20-40%左右。
6. 将第4 步得到的裂解液全部转移到离心吸附柱中，室温静置2分钟使质粒DNA 不膜结合。注意：必须静止2分钟，否则质粒DNA 丌容易吸附上。
7.室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
8.在离心吸附柱中加入0.6mL的通用预洗液(注意:是通用预洗液，丌是通用洗柱液，丌要用错。通用预洗液非常容易产生沉淀，用前需要加热到60℃左右使之融化，混匀后再用)，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
9.在离心吸附柱中加入0.6mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
10.在离心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
11.室温12000～15000g离心半分钟，甩干残留液体。
12. 将离心柱置于一个新的1.5mL自备塑料离心管中，加入30-100μL DNA洗脱液2.0，室温放置2分钟。
13. 12000～15000g离心半分钟，离心管底溶液即无内毒素质粒DNA。

一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒 DNA纯化正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·Poly(A)聚合酶
编号：BTN120509
英文名称：Poly (A) Polymerase
规格：20U
本酶催化在各种多聚核糖核酸的3´末端聚合A碱基的反应。能以单链RNA作引物，双链RNA以及合成的多聚核苷酸、短的寡聚核苷酸等不宜作引物；DNA也不能作引物。本酶因聚合AMP碱基，故只能用ATP作底物，ADP、dATP均不能作为底物。另外，UTP、CTP的掺入不足ATP的5%，而GTP也不能作为底物进行聚合。其反应原理图如下：


本产品的主要用途：
1．在RNA上加上Poly(A)尾。
2．RNA的3´末端标记。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·DNA marker(pBR322/MspI)
编号：BTN90602B
英文名称：DNA ladder(pBR322/MspI)
规格：50次
 本系列产品为传统的酶切分子量标准，由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后，加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知，每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。
 每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5uL。

使用效果：


疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。


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PY02-043  Baird-Parker琼脂基础  250克  
BL1197 结晶紫染色液(2.5%)
ARB12415 大鼠细胞色素P4502E1(CYP2E1)含量测试 Rat cytochrome p450 2e1,cyp2e1 ELISA KIT
BTN131154 山羊抗小鼠IgG,荧光素488标记 Goat Anti-Mouse IgG ,IF488 Conjugate
ARB11963 大鼠B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)含量检测 Rat b-cell leukemia/lymphoma 2,bcl-2 ELISA KIT
SJ0705 *苄 100mg/ml
9002-04-4 Thrombin   凝血酶
BTN131145 山羊抗兔IgG(Fc),碱性磷酸酶标记 Goat Anti-Rabbit IgG(Fc),AP Conjugate
CYB161070 人血清IgA(液体)70～80%纯度,4mg/ml浓度
F030707 BIOTIN标记兔抗卵清蛋白抗体 Rabbit Anti-OVA*BIOTIN
酮康唑 Mucicarmine 65277-42-1
BL0264 (原装)DifcoTM Skim Milk 脱脂奶粉
ARB10012 人17-酮类固醇(17-KS)定量分析 Human 17-ketosteroids,17-ks ELISA KIT
ARB10523 人白细胞活化黏附因子(ALCAM)含量检测 Human activated leukocyte cell adhesion molecule,alcam ELISA KIT
ARB11313 人促胃液素受体(GsAR)Elisa定量检测 Human gastrin receptor,gsar ELISA KIT
ARB12217 大鼠血小板因子3(PF-3)酶标法分析 Rat platelet factor 3, pf3 ELISA KIT
橄榄油 Polyquaternium-10 8001-25-0
ARB10982 人免疫球蛋白样转录体受体(ILTsR/LIR/CD85)Elisa定量检测 Human ig-like transcripts receptor,iltsr ELISA KIT
ARB10799 人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)ELISA代测服务 Human anti-double stranded dna,dsdna ELISA KIT
KM101 快速定点突变试剂盒
一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒 DNA纯化关键词：One-step Endotoxin-free plasmid DNA extraction kit,一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒,BTN80201


·dTTP溶液，2.5mM
编号：BTN130913
英文名称：dTTP Solution，2.5mM
规格：2mL
dTTP分子式为C10H14N2O14P3Na3,分子量是548.1，消光系数为：9.6×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为267nm。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

·Tth DNA聚合酶
编号：BTN90501
英文名称：Tth DNA Polymerase
规格：250U
本酶来源于嗜热菌Thermus thermophilus HB8。在有Mg2+等二价阳离子存在的情况下，具有DNA多聚酶活性。它与Taq酶一样被广泛用于PCR反应，但耐热性比Taq酶高，因此对高GC含量模板的PCR 也有较好的效果。本酶基本上没有3´→5´外切酶活性及5´→3´外切酶活性，所以也可用于双脱氧法测序。另外，本酶具有RTase活性，在Mn2+存在的情况下，RTase活性会得到强化。利用该特性，可以用来在同一管中进行逆转录反应和PCR反应，即一步法RT PCR。(但是，在Mn2+存在时，RT-PCR的准确性不高)此外，本酶与Taq DNA多聚酶一样，PCR产物可通过T载体进行TA克隆。

产品特点：
1．RT-PCR反应的特异性增加：在较高的温度下进行逆转录，增加了引物杂交和延伸的特异性。
2．二级结构减少：在较高的温度下进行逆转录，减少了由于RNA二级结构引起的问题。

产品组成：

成分	规格
Tth DNA聚合酶(5U/μL)	50μl
10×Tth Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
以λDNA为模板，以10×Tth Buffer(+MgCl2)作为缓冲液进行体积为50μL的PCR扩增反应为例

1．按下列组份配制PCR反应液。

成分	终浓度	用量
Tth DNA聚合酶(5U/μL)	1.25U	0.25μl
10×Tth Buffer(+MgCl2)	1×	5μl
dNTP Mixture(各2.5mM)	各0.2mM	4μl
模板DNA	50pg～1μg	详见下表
引物1(10μM)	0.1～1μM	最多到1μL
引物2(10μM)	0.1～1μM	最多到1μL
灭菌蒸馏水		加到50μL

推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量：

哺乳动物基因组DNA	0.5～1μg
酵母基因组DNA	5～500ng
细菌基因组DNA	0.5～50ng
质粒DNA	5～500pg
PCR回收片段	1～100pg

2．PCR反应条件
以λDNA为模板，扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下：

注：PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

注意事项：
1．循环测序：该酶为耐热性酶，可通过与PCR 同样的温度条件进行测序反应。由于其高温稳定性好，对于复杂高级结构的模板效果较好。
2．引物：用于耐热性酶测序的引物需比用于非耐酶测序的引物设定更长的时间。采用较短的引物时，可能会出现不能获得条带变淡的情况。

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