一步法质粒DNA提取试剂盒2.0 DNA纯化

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")一步法质粒DNA提取试剂盒2.0 DNA纯化，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：一步法质粒DNA提取试剂盒2.0 DNA纯化
英文名：One-step plasmid DNA extraction kit 2.0
编号：BTN70903
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
基于碱变性原理的质粒小量制备(Miniprep)是分子克隆研究中最常用的方法之一，其操作包括三种溶液处理，一般需要30分钟左右的时间才能得到可以上柱的质粒DNA初提液。本产品采用百奥莱博自主开发的一步式细菌裂解技术，只需要一种溶液处理即可以完成细菌裂解，并且裂解物可以直接上柱纯化质粒DNA。

试剂盒特点：
1.一步式裂解细菌，比传统的碱变性方法更快捷。
2.产量跟经典碱变性法相当或更高，产率一般为3-5μg质粒DNA/mL 饱和菌液(对高拷贝质粒而言)。
3. DNA 纯度高，OD260/280一般在1.8左右，基因组DNA和RNA污染少。
4.可以直接用于电泳、酶切、PCR、细菌转化、分子克隆、测序等实验。
5. 重复性和稳定性好。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
离心吸附柱	50只
通用预洗液	50ml
通用洗柱液	100ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(溶液A需要4℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 用塑料离心管收集不超过3mL 过夜培养饱和菌液，室温12000～15000g离心半分钟，弃上清。注意:不能超过3mL菌液，否则质粒回收率将急剧降低。
2. 加入0.6-1mL溶液A(用前需摇匀)，充分吹打或振荡裂解细菌直到裂解变澄清，一般需要半分钟左右。注:此方法不同于碱裂解法，故可以充分吹打。
3. 将裂解液全部转移到离心吸附柱中，室温静置2分钟使质粒DNA与膜结合。室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。如果一次不能将上清全部转移到离心吸附柱中，可以分两次进行。
4.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用预洗液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。注意: 如果通用预洗液放置在低温产生了沉淀，用前需要加热到60℃左右使之融化，混匀后再用。
5. 再在离心吸附柱中加入0.3mL的通用预洗液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。此步预洗最好别省略，否则DNA 纯度不高。
6.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
7. 再在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。此为第二次洗涤。
8. 再在离心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。此为第三次洗涤，如果不洗涤三次，最后得到的质粒DNA的OD260和280的比值达不到1.8。
9.室温 12000～15000g离心半分钟，甩干残留液体。注意：此步不能省略，否则残留乙醇会影响后续的电泳上样(DNA 沉不到加样孔里去)和酶反应。
10. 将离心柱置于一个新的1.5mL自备塑料离心管中，加入30-100μl DNA 洗脱液2.0，室温放置2分钟。如果将DNA 洗脱液2.0预热到65-80℃，则效果更好。
11.室温 12000～15000g离心半分钟，离心管底溶液即质粒DNA，可以直接用于后续实验或放冰箱长期保存。
 注意：如果需要去除DNA样品中的内毒素，请使用百奥莱博的液相内毒素清除剂。

一步法质粒DNA提取试剂盒2.0 DNA纯化正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·人超氧化物歧化酶
编号：BTN130869
英文名称：Human Superoxide Dismutase
规格：10kU
超氧化物歧化酶(SOD)，别名肝蛋白、奥谷蛋白，SOD是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。其催化超氧化物自由基O－2和*离子反应形成过氧化*和分子氧的酶。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：在25℃，pH7.8，3.0mL反应体系中，在黄嘌呤氧化酶存在的条件下抑制50％细胞色素C还原所需的酶量定义为一个酶活单位。

·SSPE溶液，20×
编号：BTN100809
英文名称：Saline-Sodium Phosphate-EDTA
规格：250mL
20×的SSPE含3M NaCl、0.2M NaH2PO4、0.02M Na2EDTA，pH为7.4。它是一种在核酸分子杂交中广泛使用的溶液。其特点首先是盐浓度接近饱和，可以非常方便地稀释到不同浓度，提供不同的杂交和洗涤严谨度。其次，高盐浓度可以抑制微生物生长，便于长期放置。最后，它可以用于几乎所有核酸杂交试验。由于缓冲能力比SSC强，更适合于需要稳定pH的实验。

储存条件：常温运输及保存、有效期两年。

·DNA marker(250-15000bp)
编号：BTN70503T
英文名称：DNA ladder(250-15000bp)
规格：50次
 本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5μL。

使用效果：

注：2500bp条带为20ng/uL,其余每条带为10ng/uL

疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀，亮度相当，但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色，加大EB浓度等方法解决。


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BTN130960 超螺旋DNA分子量标准 Supercoiled DNAMETER
丁香油酚 TPTZ 97-53-0
ARB13437 鸡甲状旁腺激素(PTH)酶联免疫定量检测 Chicken paRathyroid hormone,pth ELISA KIT
F030310 胶体金标记羊抗乙肝表面抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBsAg*GOLD
BTN30 常用PCR引物 Common PCR Primer
PP1101 通用蛋白裂解/抽提试剂
四正丁基碘化铵 D-LDH 311-28-4
F030501 FITC标记小鼠抗乙肝核心抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBcAg*FITC
BTN91103 非冻型拭子病毒保存液 Virus-LOCKER
秋水仙碱 MT 64-86-8
ARB12376 大鼠质细胞源性神经营养因子(GDNF)尿液中含量检测 Rat glial cell line-derived neurotrophic factor,gdnf ELISA KIT
ARB13061 小鼠肾损伤分子1(Kim-1)Elisa分析 Mouse kidney injury molecule 1,kim-1 ELISA KIT
BL0887 兔抗豚鼠IgG免疫血清
F010207 小鼠抗鸭IgG(IgY)抗体 Monoclonal Mouse Anti-Duck IgG(IgY)
PY04-021  新生霉素  4.5mg/支×10支  每支添加于225 ml改良胰蛋白胨大豆肉汤(mTSB)，用于食品和动物饲料中大肠杆菌0157的增菌培养
11089-65-9 衣霉素 Tunicamycin
ARB10481 人白介素1β转换酶(ICE)含量测试 Human interleukin 1β converting enzyme,ice ELISA KIT
CC0801 高效感受态细胞制备试剂盒
ARB10078 人c-fos 定量分析 Human c-fos ELISA KIT
BFD003 猪口蹄疫0型病毒抗体检测试剂盒
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·非酶多糖清除剂(RNA样品专用)
编号：BTN60204
英文名称：Non-enzymatic Polysaccharide Scavenger
规格：10mL
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有多糖(Polysaccharide，PS)污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前没有十分有效的方法去除这一污染。我公司开发的非酶法PS清除剂能够比较好的解决这一问题。

产品特点：
1.高效，能有效地去除总RNA中的PS污染,使RNA溶液不再粘稠。
2. 不含RNase污染，RNA分子完整性不会受到任何影响。
3.快速，全部操作在样品管中完成，只需要二十多分钟。
4. 稳定，本产品为非酶产品，可以常温运输和4℃长期保存。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将十分粘稠的总RNA样品用RNase-free水稀释到100-500μl左右，加入等体积的65℃预热10分钟后的PS Scavenger，振荡器上充分振荡1分钟。
2. 加入等体积的*仿，振荡器上充分振荡1分钟。
3. 12000～15000g离心2分钟，转移上清到一新的离心管中，交界处将有白膜样的多糖沉淀。
4. 加入0.1倍体积的3 M NaOAc(pH5.2)和两倍体积的无水乙醇，混匀后12000～15000g离心10-20分钟。小心弃上清。
5. 加入1mL 75%乙醇，振荡器上短暂振荡后12000～15000g离心2分钟，小心弃上清。
6. 短暂离心，用移液枪小心吸去残留液体后，加入适量RNase-free水或具有灭活残留RNase的液相RNase Scavenger。立即使用或-80℃保存。

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