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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Gram negative bacteria DNA extraction kit(Southern Grade)
- 库存:
837
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级)厂家,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级)厂家
规格:10次
产地:国产|进口
编号:BTN130950
英文名:Gram negative bacteria DNA extraction kit(Southern Grade)
关于北京现货革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级)厂家的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·柱式分枝杆菌RNA提取试剂盒
编号:BTN130845
英文名称:Mycobacteria RNA Column extraction kit
规格:50次
·柱式石蜡包埋组织DNA提取试剂盒
编号:BTN130934
英文名称:FFPE DNA column extraction kit
规格:30次
·一站式DNA尿素-PAGE电泳套装
编号:BTN90317
英文名称:One-Stop DNA Urea-PAGE Pack
规格:30次
本品是专门用于DNA 尿素-PAGE电泳的一站式试剂盒。
产品特点:
1.一站式,即开即用,用户不需单独准备各种成分,十分方便。用户不需要单独准备各种成分。
2.可用于DNA 测序、AFLP、DDRT、TGGE和RNase 保护实验等。
3. 安全,免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺。
4.电泳后可直接用于银染、EB染色等实验。
产品组成:
| 成分 | 规格 | 保存 |
| 电泳级尿素 | 210g | 常温 |
| 电泳级丙*(代"烯")酰胺 | 77.34g | 常温 |
| 电泳级甲叉双丙*(代"烯")酰胺 | 2.67g | 常温 |
| 10×TBE电泳液 | 250ml | 常温 |
| 电泳级TEMED | 1.5ml | 4℃,避光 |
| 电泳级过硫*(代"酸")铵 | 1g | 常温 |
| 2×尿素-PAGE上样液 | 1ml | -20℃ |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,保存条件见上表,有效期一年。
使用方法:
一、PAGE浓度和交联度的选择指南
尿素-PAGE一般推荐用29:1(丙*(代"烯")酰胺:甲叉双丙*(代"烯")酰胺)的交联度,
在此条件下,DNA片段和最适PAGE浓度对应关系如下:
| 单链DNA长度 | 最佳PAGE浓度 | 二甲*青FF迁移率 对应的长度 |
*酚蓝的迁移率 对应的长度 |
| 50-400nt | 8% | 160nt | 45nt |
| 200-1000nt | 5% | 260nt | 65nt |
| 750-2000nt | 3.5% | 460nt | 100nt |
二、制备尿素-PAGE胶
1. 配制尿素-PAGE胶(这是配制100mL胶的用量,配制更大体积的胶则需以此用量为基础按比例增加)
A:新鲜配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵):按每0.1 克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL超纯水的比例将水加到装有硫*(代"酸")铵干粉的1.5mL EP 管中,摇晃到粉末全部溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
B:新鲜交联度为29:1的40%的丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺溶液(AB溶液,下同):在装有77.34 g电泳级丙*(代"烯")酰胺干粉的瓶中加入约120mL自备的去离子水,然后将全部甲叉双丙*(代"烯")酰胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙*(代"烯")酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有毒粉末飘出。甲叉双丙*(代"烯")酰胺溶解度低,不会溶解在这少量溶液中)。充分摇晃混匀后所得溶液即40%的AB溶液。配制40%而非30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
C:配尿素-PAGE胶:在一个250mL的三角瓶中,先按下表的用量加入去离子水、40%AB溶液和10×TBE缓冲液。丙*(代"烯")酰胺单体溶液具有神经毒性,一定要戴手套操作。
| PAGE胶浓度 | 各成分用量(尿素为克,其余单位是mL) | 补水到(mL) | ||
| 尿素 | 40%AB溶液 | 10×TBE缓冲液 | ||
| 5% | 42 | 12.5 | 5.0 | 100 |
| 6% | 42 | 15.0 | 5.0 | 100 |
| 7% | 42 | 17.5 | 5.0 | 100 |
| 8% | 42 | 20.0 | 5.0 | 100 |
| 9% | 42 | 22.5 | 5.0 | 100 |
| 10% | 42 | 25.0 | 5.0 | 100 |
| 11% | 42 | 27.5 | 5.0 | 100 |
| 12% | 42 | 30.0 | 5.0 | 100 |
D:搅拌溶解,然后用滤纸过滤。最好能抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应),无条件也可以不脱氧。
E:加入500μL 10%APS和100μL TEMED,迅速摇匀后倒胶。
F:在胶的液面距离达到顶部时停止灌胶,插入梳子。
G:室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)。
H: 拔出梳子,用0.5×TEB液冲洗加样孔。
三、样品准备
2. 对一般样品、测序样品、微卫星DNA、AFLP样品、DDRT样品、RPA样品:将样品跟上样液1:1 混合,95℃ 3分钟变性,然后放冰上待用。
3. 对TGGE样品:可以直接上样。
四:电泳
4. 将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽中加入足够0.5×TEB电泳液。
5.预电泳5-30分钟将冰上放置的样品上样。
6.连接电源线,打开电源开关。根据胶的大小选择功率(固定功率可以固定产热,这样不容易发生过热而使胶板破裂的现象。如果固定电流或电压,产热都将随电泳时间而变化,不好控制)。对小胶一般用5-6W 固定功率,大胶用15-25W 固定功率。
7. 终止电泳,取出凝胶进行后续的处理(如银染)。注意:如果银染,必须延长固定时间以便让洗出尿素,否则残留尿素会干扰后面的银染。
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·蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂混合液Ⅰ
编号:BTN80809
英文名称:Phosphotase Inhibitor Cocktail 1
规格:1mL
组织/细胞裂解时会释放出大量内源性蛋白*(代"磷")酸酶,以各种方式催化磷酸化蛋白的去磷酸化,导致不同于正常生理状态的差异,影响实验结果。因此,加入外源性蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂,抑制磷酸化蛋白的去磷酸化,维持蛋白质的磷酸化状态,是Western Blotting、免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质和蛋白激酶活性测定等研究不可缺少的一步。本产品就是针对这一用途开发。
产品特点:
1.即开即用,不需要单独购买每个成分然后再配制。
2.由5种蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂(钒酸*、*化*、钼酸*、酒石酸*、咪唑)组成,各成分的浓度经过精心优化。
3.抑制谱广,能特异性地抑制丝*酸磷酸酶、苏*酸磷酸酶、酪*酸磷酸酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和ATP酶。
4.与各种细胞裂解液兼容。
5.使用简单,在细胞裂解液中按一定比例加入即可(根据蛋白*(代"磷")酸酶决定,一般按1/100的体积比)。
6.适用于Western blot、免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、蛋白激酶活性测定等试验。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在临用前溶解本产品,并按1/100的比例加入到细胞裂解液中(1mL细胞裂解液中加入10μl)。注意:对蛋白*(代"磷")酸酶含量特别丰富的组织,可以将加入比列提高到1/20-1/50。
2.后续处理按常规方法进行即可。
注意:避免反复冻融本产品,所以第一次溶化后,如果还有剩余,可将其分装成小份冻存,每次用多少取多少。
北京现货革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级)厂家关键词:BTN130950,Gram negative bacteria DNA extraction kit(Southern,革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级)
J0205 兔抗辣根过氧化物酶抗血清 1ml/10ml
21931-53-3 UDP 5-二磷酸尿苷
M0503 10X HRP标记抗体保存液(用于浓标记物的长期保存)
ARB12547 大鼠胰岛素原(PI)定量分析 Rat proinsulin,pi ELISA KIT
5-尿苷三磷酸三*盐 CHES 19817-92-6
磺胺甲基嘧啶 Alcohol Oxidase 127-79-7
ARB13542 兔子B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa检测说明书 Rabbit b-cell leukemia/lymphoma 2,bcl-2 ELISA KIT
PY02-394 AC肉汤培养基 250克
13292-46-1 Rifampicin 利福平
BL0849 兔抗人IgG纯化抗体
CYB163068 OVA-FITC
DL-组*酸 Fmoc-Glu(OtBu)-OH 4998-57-6
我公司强烈推荐DNA纯化系列产品,热情期待您的咨询选购北京现货革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级)厂家。
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