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北京百奥莱博科技有限公司
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10%Sarkosyl溶液(DNA级)促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多10%Sarkosyl溶液(DNA级)等生化试剂产品请联系我司咨询订购。
名称:10%Sarkosyl溶液(DNA级)促销
编号:BTN100914
规格:250mL
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
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BL0856 兔抗猴IgG纯化抗体
50-70-4 D-Sorbitol D-山梨醇
ARB11963 大鼠B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)含量分析 Rat b-cell leukemia/lymphoma 2,bcl-2 ELISA KIT
F030405 胶体金标记山羊抗小鼠IgG抗体 Goat Anti-Mouse IgG*GOLD
BTN70908 DNA PAGE胶回收试剂盒 PAGE DNABACK
D-环丝*酸 Neocuproine 68-41-7
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ARB10579 人同型半胱*酸(Hcy)elisa测定使用说明书 Human homocysteine acid,hcy ELISA KIT
ARB13427 鸡弓形虫循环抗体(TCAb)检测服务
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F030302 胶体金标记小鼠抗乙肝e抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBeAg*GOLD
BL0849 兔抗人IgG纯化抗体
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尿苷二磷酸酶 Tween 65
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9012-36-6 Agarose L.M.P 低熔点琼脂糖
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107-35-7 Taurine 牛磺酸
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·人基因组DNA(男性)
编号:BTN131031
英文名称:Human Genomic DNA(Male)
规格:100μg
本产品为人基因组DNA,来源于多位匿名的捐献者,其中BTN131031为男性基因组DNA;BTN131032为女性基因组DNA。利用脉冲电场凝胶电泳测量,90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括PCR)及基因组文库构建等实验。。
储存条件:低温运输、4℃保存、有效期一年。
·大肠杆菌OrigamiB(DE3)化学感受态细胞
编号:BTN120520
英文名称:E.coli OrigamiB(DE3) Chemical Competent Cell
规格:10*100μl
本产品是采用大肠杆菌Origami B(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测本产品,转化效率可达107。本感受态细胞具有卡那霉素和四环素抗性。
菌株基因型为:F-ompT hsdSB(rB- mB-)gal dcm lacY1 ahpC(DE3)gor522::Tn10trxB(KanR,TetR)。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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RNA的样品没有保存于-60至-70℃,而保存在了-5至-20℃。 C.细胞在用胰酶处理时过度。 D.溶液或离心管未经RNase去除处理。 E.电泳时使用的甲醛pH值低于了3.5 。 DNA污染: A. 样品匀浆时加的试剂量太少。 B.样品中含有有机溶剂(如乙醇,DMSO等),强缓冲液或碱性溶液。 DNA的分离 准备试剂:乙醇0.1M柠檬酸钠(含10%乙醇) 75%乙醇8mM NaOH 操作步骤: 1. 样品加氯仿分层后,移去上层水相,用乙醇沉淀中间层和有机相中的DNA。每使用
缓冲液 5ml pUC/M13正向引物(4.5pmol) 3.6ml 3. 在引物/模板混合物(以上第2步)中加入1.0ml测序级Taq DNA聚合酶(5u/ml)。用吸液器吸动几次混匀。 4. 从第3步的酶/引物/模板混合物中吸取4ml加入每一个d/ddNTP混合物的管内。 5. 在微量离心机中离心一下,使所有的溶液位于eppendorf管底部。 6. 把反应管放入预热至95℃的热循环仪,以【注意】中循环模式为基准,开始循环程序。对于每个引物/模板组合都必须选择最佳退火
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