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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
Inorganic Pyrophosphatase(yeast)
- 库存:
383
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")无机焦磷酸酶(PPase)(酵母)库存,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:无机焦磷酸酶(PPase)(酵母)库存
英文名:Inorganic Pyrophosphatase(yeast)
规格:10U
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:BTN130658
无机焦磷酸酶催化无机焦磷酸盐水解生成正磷*(代"酸")盐,转录过程中可提高RNA的产量,其反应原理如下:

产品组成:
| 组份 | 规格 |
| 无机焦磷酸酶(100U/mL) | 100μL |
| 10×Buffer | 1mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指标准反应条件下,[0.5ml反应体系中,100mM Tricine(pH7.2),2mM MgCl2和2mM PPi,于25℃反应10分钟]每分钟催化从无机焦磷酸盐生成1μmol磷酸盐的酶量。
更多有关无机焦磷酸酶(PPase)(酵母)库存的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·T3 RNA聚合酶
编号:BTN120309
英文名称:T3 RNA Polymerase
规格:1000U
本酶是噬菌体T3 DNA编码的酶,对T3启动子序列具有高度特异性,不能识别其它生物来源的启动子。本酶是依赖于DNA的RNA聚合酶,具有 5´→3´的RNA聚合酶活性,以含有T3启动子序列的双链DNA为模板,以NTP为底物,合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA。
产品用途:
1.为Northern杂交以及Southern杂交制作高标记探针。
2.制作 RNA 剪接反应的前体。
3.以帽类似物为引物,制作Capped mRNA。
产品组成:
| 成份 | 规格 |
| T3 RNA聚合酶 | 50μL(20U/μL) |
| 5×转录缓冲液 | 0.25mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1个活性单位是指在37℃、60分钟内将1nmol的AMP合成掺入到寡聚核苷酸片段(DE-81光吸收形式)所需的酶量。
无机焦磷酸酶(PPase)(酵母)库存关键词:酵母,无机焦磷酸酶(PPase)(酵母),BTN130658,Inorganic Pyrophosphatase(yeast)
·DNA marker(200-1500bp)
编号:BTN70503C
英文名称:DNA ladder(200-1500bp)
规格:50次
本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5μL。
使用效果:
注:800bp条带为20ng/uL,其余每条带为10ng/uL
疑难解答:
a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀,亮度相当,但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色,加大EB浓度等方法解决。
·柱式藻类RNA大量提取试剂盒
编号:BTN120504
英文名称:Algae RNA Column large-scale extraction kit
规格:5次
本试剂盒是在本公司柱式藻类RNA提取试剂盒(BTN120503)的大提升级产品,跟柱式藻类RNA提取试剂盒相比,它具有下列特点:
1.样品处理量大,最多可以处理50mL液体藻类培养物。
2. 操作简单快捷,整个过程只需要约30分钟。
3. RNA 纯度高,OD260/280一般都在2.0左右,可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA 合成等。
4. RNA产量高,一般在20-70μg/mL液体藻类培养物(约2.0×107个细胞)。非酶细胞破裂法,适用于各种形态的藻类和各个种属的藻类。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 50ml |
| 溶液C | 150ml |
| 溶液D | 50ml |
| 大提离心吸附柱 | 5套 |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| RNA 洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将50mL液体藻类培养物在塑料离心管中5000-7,000rpm 4℃离心1分钟,并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入10mL溶液A并充分吹打混匀。注意:溶液A存放时容易产生沉淀,如果有沉淀,用前请置于65℃融化并充分摇晃均匀。
3. 加入10mL溶液B,剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。注意:不要超过5分钟,否则RNA 容易降解。
5. 5000-7,000rpm 4℃离心3~5分钟,转移上清到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
6.在上清液中加入2mL自备的*仿,充分振荡30秒混匀。
7. 4℃ 5000-7,000rpm离心3~5分钟,转移上清液到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清液(约10mL左右)3倍体积的溶液C和1倍体积的溶液D,充分混匀。如果上清为10mL,则加入30mL溶液C和10mL溶液D。
9. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中,每次转移后需要室温放置2-3分钟以让RNA跟吸附膜充分结合,然后5000-7,000rpm室温离心30-60秒,弃收集管中的穿透液,然后再加入后一批混合液,重复操作,直到混合液全部挂柱。
10. 第一次洗涤:将10mL 通用洗柱液加到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
11. 第二次洗涤:一次洗涤一般足够去除杂质,但如果样品OD260/280 比值不高,可以再用10mL 通用洗柱液重复上步洗涤一次。
12.室温离心空柱子(带收集管)半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 50mL塑料离心管中,加入1mL RNA 洗脱液。
14.室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA完整性的电泳检测:
注意:普通DNA上样液不含变性剂,更没经过去RNase处理,所以最好不要用于RNA电泳。
16. RNA产量和纯度产率测定:
将5-10μL RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA 稀释在DEPC 水中检测OD260和OD280,否则光吸收比在TE中测得的低10%-15%;也不要稀释过度,使OD读数在仪器的有效范围之外,这样得到的OD 比值没有意义。
疑难解答:
Q:上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA 吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶,也必须在上样前使RNA变性。使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时,可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2,最好不要使用TBE缓冲液,因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物,RNA 很难形成锐利的条带。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用5分钟柱式DNA 清除剂、非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。
无机焦磷酸酶(PPase)(酵母)库存关键词:酵母,无机焦磷酸酶(PPase)(酵母),BTN130658,Inorganic Pyrophosphatase(yeast)
68399-81-5 3-[N-三(羟甲基)甲胺]-2-羟基丙磺酸 TAPSO
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9087-70-1 蛋白酶抑制剂 Aprotinin
F030609 FITC标记山羊抗小鼠IgG3抗体 Goat Anti-Mouse IgG3*FITC
005001 4%兔红细胞
北京百莱博科技有限公司专业生产工具酶产品,欢迎来电咨询选购无机焦磷酸酶(PPase)(酵母)库存。
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文献和实验磷酸酶的一种。是催化焦磷酸水解为正磷酸的酶之总称。EC 3. 6. 1. 1.仿照磷酸单酯酶,根据最适 pH可分为三种情况:( 1)在最适 pH为 7.2-7.8,可通过 Mg2 而被活化,含于动物组织和酵母中;( 2)最适 pH5.0-5.5,含于肝脏、肾脏、霉菌和植物的种子中不为金属盐所活化,可因氟化物而受阻抑;( 3)最适 pH3.2-4.0,含于肝脏、曲霉和酵母中。
实验原理 酵母能使蔗糖和葡萄糖发酵产生乙醇和二氧化碳。此过程与无机磷将糖磷酸化有关。 本实验利用无机磷与钼酸形成的磷钼酸络合物能被还原剂α-1,2,4-氨基萘酚磺酸钠还原成钼蓝的原理来测定发酵前后反应混合物中无机磷的含量,用以观察发酵过程中无机磷的消耗。 试剂 和器材 试剂 蔗糖;5%三氯
蔗糖和5毫升乳酸,配成液体培养液。 (2)把鲜酵母半块或老面(发酵后晾干的面粉团)打碎,投入培养液中,放在黑暗温暖的地方,二三天后就可以培养出大量酵母菌。 2.用巴斯德培养液培养 酵母菌需要的无机营养来自外界环境。如果在培养液内适当增加氮、磷等元素,效果会更好。巴斯德培养液的配方如下: 蔗糖15克,碳酸铵1克,磷酸氢钾0.2克,磷酸钙0.02克,硫酸镁0.02克,蒸馏水100毫升,培养方法跟上述的相同。
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