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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
GpC Methyltranferase(M.CviPI)
- 库存:
997
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货GpC甲基转移酶(M.CviPI)哪里卖,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货GpC甲基转移酶(M.CviPI)哪里卖
品牌:百奥莱博
规格:200U
产地:国产|进口
英文名:GpC Methyltranferase(M.CviPI)
该GpC甲基转移酶(M.CviPI)能将双链二核苷酸识别序列中所有胞嘧啶残基(C5)甲基化。
产品特点:
1.阻止限制性内切酶的切割;
2.改变DNA的物理特性;
3.对DNA统一进行[3H]标记。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1酶活单位定义为在 20μl反应体系中,37℃条件下,1小时能保护1μg λDNA不被HaeIII限制性核酸内切酶切割所需要的酶量。
热失活:65℃ 20分钟。
备注:
胞嘧啶残基被甲基化后,可影响DNA的物理特性,如:降低Z-DNA形成的自由能,增加DNA的螺旋程度,改变DNA十字形突出的动力学特性。由于在化学测序过程中联*的反应性降低,5-甲基胞嘧啶的位置易于确定下来。
北京现货GpC甲基转移酶(M.CviPI)哪里卖极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒
编号:BTN130597
英文名称:Firefly Luciferase Assay Kit
规格:100次
本试剂盒采用通用裂解缓冲液,能与其他类型的报告基因检测和蛋白含量检测兼容。本产品与海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒共同使用,可进行一体化的双荧光素酶检测。
报告基因检测是真核基因表达调控研究的常用方法。因为检测光量子的方法非常敏感,所以生物发光法是报告基因检测最常用的手段。荧光素酶(luciferase)催化底物荧光素的转化,发射出光子。萤火虫荧光素酶催化的发光反应,具有很好的浓度线性范围(7~8个数量级的线性范围),酶的检测灵敏度达到10⁻²ºmol。原理如下:

试剂盒特点:
1.高度灵敏:可检测10⁻¹⁸~10⁻²ºmol荧光素酶。
2.线性范围宽:线性范围达到7~8个数量级。
3.快速简便:特别适合于高通量筛选。
4.兼容性好:与其它常用报告基因检测试剂兼容。
5.本产品可足够100次荧光素酶检测。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 5×Universal Lysis Buffer (通用裂解缓冲液) |
20mL |
| Fassay Buffer | 10mL |
| Fassay Substrate(底物) | 0.5mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃或-80℃避光保存,有效期半年。
使用方法:
★裂解细胞:
1. 配制裂解液:临用前,取适量5×Universal Lysis Buffer(ULB),用双蒸水稀释至1×ULB,混匀。1×ULB可在4℃存放数周。
2. 清洗细胞:倾去培养板/皿中的培养液,加入足量PBS ,轻轻洗涤细胞。完全倾去洗涤液。
3. 裂解细胞:按照下表中推荐的体积,在孔/皿中加入1×ULB ,混匀。培养板可在微型振荡器上震荡5-10分钟;培养皿可直接用细胞刮刀刮下细胞,将细胞悬液移入1.5mL离心管,在涡旋振荡器上充分混悬震荡30秒。裂解细胞悬液可直接用于发光测定,也可离心30秒,取上清液做发光测定。
表:不同孔/皿所需1×ULB体积
| 96孔板 | 48孔板 | 24孔板 | 12孔板 | 6孔板 | 35mm平皿 | 60mm平皿 |
| 50μL | 80μL | 150μL | 250μL | 500μL | 500μL | 1000μL |
★配制发光反应液:
测定前,室温溶化Fassay Buffer和Fassay Substrate,混匀。按20/1比例用Fassay Buffer稀释Fassay Substrate,配制所需体积的Fassay Reagent(注意避光)。
★测定仪器的设置:
按仪器操作说明开启发光测定仪。手动操作型仪器,将测读时间设为10~20秒。自动操作型仪器,一般将测定延迟设为2秒,将测读时间设为10~20秒,Fassay Reagent的注入体积设定为100μL。
★手动发光测定:
取待测样品20μl加入测量管底部,取Fassay Reagent 100μL立即加入管底部,轻轻敲击管壁3~5次混匀,放入仪器中立即测定,记录发光值为Firefly luciferase的发光单位(RLU)。如用多孔板同时手动测定多个样品,则将各待测样品20μL分别加入连续的各孔底部,用多道加样器于各孔底加入Fassay Reagent 100μL,轻轻敲击板侧3~5次混匀,放入仪器中立即测定,记录发光值为Firefly luciferase的发光单位(RLU)。
★自动发光测定:
配制好的Fassay Reagent置于测定仪内并连接好对应管道。取待测样品20μL分别加入测定管/板孔底部,启动自动测量程序。记录Firefly luciferase的发光单位(RLU)。
注意事项:
1.Fassay Substrate(底物)溶液应密封、盖严存放,避免蒸发。Fassay Buffer和Fassay Substrate(底物)应避免反复冻熔,可分装成合适体积分次使用。
2.1×细胞裂解液一般在当天测定。如需隔日测定,应将样品于-20℃保存。长期保存应在-80℃。
3.用多孔板同时手动测定多个样品时,要尽量缩短样品间试剂加入的时间间隔。
4.本产品与海肾荧光素酶活性检测试剂盒联合使用,可进行一体化的双荧光素酶检测。
北京现货GpC甲基转移酶(M.CviPI)哪里卖关键词:GpC甲基转移酶(M.CviPI),BTN130653,GpC Methyltranferase(M.CviPI)
·鲱鱼精DNA溶液
编号:BTN130908
英文名称:Herring Sperm DNA Solution
规格:1mL
本产品是浓度为10mg/mL的、经过热变性处理的单链鲱鱼精DNA溶液可以用于Southern、Northern预杂交,还可以用于酵母化学转化和电转化。本产品即开即用,非常方便。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·植物RNA柱式提取试剂盒
编号:BTN71203
英文名称:Plant RNA Column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是植物RNA提取试剂盒(BTN3080)的柱式升级产品,它结合了BTN3080高效性(其效果在近五十多种各类植物中得到验证,植物名单见BTN3080产品介绍的附录)和百奥莱博柱式纯化系列产品的快捷性。
试剂盒特点:
1. 操作更加简单快速,处理一个样品只需要约十分钟,比植物RNA提取试剂盒快一倍。
2. RNA纯度更高,平均 OD260/280一般都在2.0左右,能够有效去除大多数植物中的多糖污染。
3.小RNA回收效率更高。
4.适用于所有用植物RNA提取试剂盒能提出RNA的植物(注:对有些植物可能需要在溶液A中额外添加RVC)。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。
6. 性价比高于进口的柱式植物RNA提取产品。
7.一站式,提供RNase-free的样品收集管。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
注:溶液B为淡黄色液体,使用前请观察颜色是否正常。若溶液B有油粒状颗粒及分层,属正常现象,不影响使用。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 估算组织细胞的用量。每次微量提取一般需要100-200mg植物叶片、或50-100mg植物种子、或200-500mg植物果实。
2. 先将新鲜植物组织剪切成小块(保存在RNAhold中的植物组织需用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块),放入10-15mL塑料离心管中,加入1mL溶液A,然后用匀浆器匀浆5-20秒。匀浆时会产生泡沫,但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎植物组织,砚磨完后加入1mL溶液A。注意:溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将匀浆物或砚磨物转移至干净的1.5mL塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。有的植物组织(比如果实)含有大量水份,匀浆液会多于1mL,转移时也只取1mL。
4.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备*仿,在振荡器上振荡30秒混匀,此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
5.室温12000~15000g离心3~5分钟,两相间将有约5-10毫米厚的细胞破碎物。
6. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质,避免触及或吸取。最好留下100μL上清液不取。
7. 加入等体积的溶液C,充分颠倒混匀。如果有沉淀产生(对某些植物,属于正常现象),千万不要去掉沉淀,一定要把所有的混合物上柱。
8. 将一半的溶液(如果有沉淀,则先混匀)转移到离心吸附柱中,13000-15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 将剩下的一半溶液(如果有沉淀,则先混匀)转移到同一离心吸附柱中,13000-15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
10. 加0.7mL通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。再加0.3mL通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。一般样品如此洗涤两次即可,但如果在第7步加入溶液C后有沉淀产生,则需要洗三次,每次加入的通用洗涤液的量分别为0.4、0.3和0.3mL。
11.室温离心半分钟。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
12. 将离心吸附柱转移到RNase-free收集管中,加入50-100μl RNA洗脱液,室温放置1-2分钟。
13. 13000-15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
14. RNA完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
15. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
16. RNA纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
北京现货GpC甲基转移酶(M.CviPI)哪里卖关键词:GpC甲基转移酶(M.CviPI),BTN130653,GpC Methyltranferase(M.CviPI)
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