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303
- 英文名:
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
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一年
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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京末端脱氧核苷转移酶(TdT酶)厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京末端脱氧核苷转移酶(TdT酶)厂家
规格:500U
编号:BTN120312
品牌:百奥莱博
英文名:Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
产地:国产|进口
末端脱氧核苷转移酶 TdT是一种模板非依赖型DNA聚合酶,催化在寡核苷酸、单链和双链DNA的3´-OH重复添加脱氧核糖核苷酸。TdT反应需要含有至少3个碱基的短序列作为引物。以RNA为模板时,TdT性能严格依赖于受体RNA 3´-末端的三级结构和核苷酸的种类。总的来说,TdT对RNA模板的作用效率比DNA模板低。
产品特点:
1.通过Okayama-Berg法给载体或cDNA加上互补同聚尾。
2.线性双链DNA的各类3´-OH末端同聚物加尾。
3.本寡聚脱氧核苷酸和DNA标记。
4.5´-RACE(快速扩增cDNA末端)。
5.凋亡反应的原位定位。
产品组成:
| 成份 | 规格 |
| 末端脱氧核苷转移酶 | 25μL(20U/μL) |
| 5×反应 Buffer | 0.4mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1个活性单位是指在37℃、60分钟内将1nmol脱氧核糖核苷酸掺入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量。
使用方法:
1.建议按照下表添加如下反应成分
DNA 3´端加尾反应(20μL体系):
| 5×反应Buffer | 4μL |
| DNA片段 | 1pmol of 3´-ends |
| dATP or dTTP或dGTP or dCTP | 130pmol或60pmol |
| 末端脱氧核苷转移酶 | 1.5μl(30U) |
| 补超纯水到 | 20μL |
DNA 3´端加尾标记反应(50μL体系):
| 5×反应Buffer | 10μL |
| 线性DNA | 10pmol |
| 标记的核苷酸(约10TBq/mmol) | 1.85MBq |
| 末端脱氧核苷转移酶 | 2μl(40U) |
| 补超纯水到 | 50μL |
2.37℃反应15 min。
3.70℃加热10分钟或添加2μL的0.5M EDTA溶液灭活酶,终止反应。
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北京末端脱氧核苷转移酶(TdT酶)厂家关键词:BTN120312,TdT酶,末端脱氧核苷转移酶(TdT酶),Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
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北京末端脱氧核苷转移酶(TdT酶)厂家关键词:BTN120312,TdT酶,末端脱氧核苷转移酶(TdT酶),Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
·环孢霉素A
编号:BTN120687
英文名称:Cyclosporin A Solution
规格:1mL
本产品为浓度为10mg/mL的环孢霉素A溶液。环孢霉素A(Antibiotic S 7481F1;环孢多肽A ;环孢灵;山地明),分子式: C62H111N11O12 ,分子量:1202.61 ,CAS号: 59865-13-3,环孢霉素A是由11个*基酸组成的环状多肽,它的第1、2、3、11位*基酸残基上可形成亲水性免疫抑制活性位点。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
·酸酚-*仿-异戊醇混合液(RNA提取用)
编号:BTN100805C
英文名称:Cyclosporin A Solution
规格:250mL
本产品为浓度为10mg/mL的环孢霉素A溶液。环孢霉素A(Antibiotic S 7481F1;环孢多肽A ;环孢灵;山地明),分子式: C62H111N11O12 ,分子量:1202.61 ,CAS号: 59865-13-3,环孢霉素A是由11个*基酸组成的环状多肽,它的第1、2、3、11位*基酸残基上可形成亲水性免疫抑制活性位点。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
·热敏磷酸酶
编号:BTN130655
英文名称:Antarctic Phosphatase
规格:500U
本产品是从南极微生物中克隆并在大肠杆菌中表达的热敏磷酸酶,它能催化除去DNA或RNA末端的5´磷酸基团。由于磷酸酶处理后的DNA片段缺少连接酶所要求的5´磷酸末端,因此它们不能进行自连接。这个特性可以在克隆时降低载体DNA的背景。
产品特点:
1.除去DNA、RNA、rNTPs和dNTPs 5´末端的磷酸基团
2.防止克隆载体的自连接
3.蛋白质丝*酸、苏*酸和酪*酸的去磷酸化
4.为5´末端标记准备模板
5.去除PCR产物中的dNTP和焦磷酸盐
6.65℃加热5分钟可使酶完全失活
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在37℃条件下,30分钟能使1μg经HindIII(产生5´突出末端)、EcoRV(产生平齐末端)或PstI(产生5´凹陷末端)消化的pUC19 DNA去磷酸化所需的酶量。
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文献和实验的DNA片段。 对于晚期检测通常有以下方法: (1)TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记) (2)LM-PCR Ladder (连接介导的PCR检测) (3) Telemerase Detection (端粒酶检测) 形态学观察 普通光学显微镜观察;透射电子显微镜观察;荧光显微镜观察 普通光镜下观察: 用苏木素-伊红(HE)染色:细胞核固缩碎裂、呈蓝黑色、胞浆呈淡红色(凋亡细胞),正常细胞核呈均匀淡蓝色或蓝色,坏死细胞核呈很淡的蓝色或蓝色消失 Giemsa
200bp核小体DNA多聚体. DNA双链断裂或只要一条链上出现缺口而产生的一系列DNA的3’-OH末端可在脱氧核糖核苷酸 末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸化酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3’-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法一般称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL). 由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3’-OH形成,很少能够被染色.低分子量的DNA分离后,也可使
细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程,染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca2+和Mg2+依赖的核酸内切酶作用下,在核小体单位之间被随机切断,形成180~200bp核小体DNA多聚体。 DNA双链断裂或只要一条链上出现缺口而产生的一系列DNA的3'-OH末端可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸化酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端
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