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北京Hoechst 33258干粉多少钱

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  • ¥170 - 2380
  • 百奥莱博
  • 北京
  • BTN130864-QHS
  • 2025年07月10日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      低温运输

    • 保质期

      长期

    • 英文名

      Fluorescent Dye Hoechst 33258,Powder

    • 库存

      598

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • CAS号

      23491-45-4

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")北京Hoechst 33258干粉多少钱,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:北京Hoechst 33258干粉多少钱
    品牌:百奥莱博
    编号:BTN130864
    英文名:Fluorescent Dye Hoechst 33258,Powder
    规格:10mg
    Hoechst 33258是一种可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光,其常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。
    Hoechst 33258分子结构式
    CAS号:23491-45-4
    分子式:C25H24N6O•3HCl
    分子量:533.88

    产品特点:
    1.Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。
    2.Hoechst 33258常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也常用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。
    3.Hoechst 33258的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nm;其和双链DNA结合后,最大激发波长为352nm,最大发射波长为461nm。
    4.Hoechst 33258溶于水,溶解度可达10mg/mL。用于细胞核染色时,推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/mL。

    储存条件:低温运输,-20℃干燥避光保存,有效期一年。

    使用举例:
    1.用PBS或合适的缓冲液制备10~50 µM Hoechst33258染料。
    2.将1/10细胞培养基体积的Hoechst染料溶液加入细胞培养物中。
    3.在37℃培养细胞10~20分钟。
    4.用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
    5.用带有350nm激发波长,460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。

    更多有关北京Hoechst 33258干粉多少钱的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:

    ·甲基化专一性PCR试剂盒
    编号:BTN100923
    英文名称:Methylation Specific PCR Kit
    规格:50次
    本产品是基于PCR的甲基化DNA检测试剂盒(即MSP试剂盒)。它由两个成分组成,一个是亚硫*(代"酸")*盐试剂盒,用于将DNA中所有没有甲基化的C转化成U,而甲基化的C不变。二是优化的PCR试剂盒,利用客户自备的专一性引物,根据PCR来检测甲基化位点的位置。

    产品特点:
    1.本产品是亚硫*(代"酸")盐修饰试剂盒和即用型PCR 3.0的整合,即开即用,非常方便。
    2.柱式DNA回收方法极大提高亚硫*(代"酸")盐修饰后DNA的回收率。
    3.优化的PCR mix,含有PCR所需要的所有成分,减少了操作误差。
    4.PCR结束后可以直接上样电泳,非常方便。
    5.用户需要自备MSP专一性引物。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    溶液A 5ml
    溶液B成分一(干粉) 2.3g×5瓶
    溶液B成分二(干粉) 110mg×5瓶
    通用溶胶液 50mL×2
    离心吸附柱 50套×2
    通用洗柱液 100mL
    DNA洗脱液 10mL
    PCR MagicMix 3.0 1.5mL
    说明书 1份


    储存条件:常温运输和保存(PCR MagicMix 3.0要低温运输,-20℃保存),有效期一年。

    自备试剂:超纯水、MSP引物、对照DNA模板和引物。
     注:严格的实验一般要求下列5种对照DNA模板和相应的引物对,用户可以根据自身实验的要求只做其中的部分。
    对照名称 起始DNA 处理
    未修饰未甲基化DNA对照 未甲基化DNA
    (无甲基化宿主菌或体外扩增而得)
    未经过亚硫*(代"酸")*盐修饰
    已修饰未甲基化DNA对照 未甲基化DNA(同上) 经过亚硫*(代"酸")*盐修饰
    未修饰甲基化DNA对照 甲基化DNA
    (用甲基化酶修饰未甲基化DNA而得)
    未经过亚硫*(代"酸")*盐修饰
    已修饰甲基化DNA对照 甲基化DNA(同上) 经过亚硫*(代"酸")*盐修饰
    未修饰样品DNA对照 样品DNA 未经过亚硫*(代"酸")*盐修饰


    使用方法:

    Ⅰ.亚硫*(代"酸")*盐修饰
    一、准备试剂
    1.配制溶液B成分一溶液:加5.0mL超纯水和27μl溶液A到装有溶液B成分一干粉的棕色塑料瓶中,轻柔摇晃至溶(尽量少的剧烈摇晃,约需要5分钟),总体积约5.5mL。
    2.配制溶液B成分二溶液:加10mL超纯水到装有溶液B成分二干粉的棕色塑料瓶中,轻柔摇晃混匀(尽量少的剧烈摇晃)。
    3.配制溶液B工作液:将55μL溶液B成分二溶液加入到溶液B成分一溶液中,轻柔颠倒混匀即可使用。一瓶溶液B工作液可以用10次。
    二、DNA变性处理
    1.将5μL溶液A加入到45μL DNA溶液中并吹打混匀(总体积没有45μL需要用水补足到45μL,DNA总量在0.2-5μg之间,不能超过 5μg,一般使用2μg DNA即可)。 注意:DNA必须是线状的,长度最好在20-50 Kb左右。基因组DNA可以预先用酶切处理(酶的位点不得在研究的DNA序列之内),也可以用机械打断法处理(得到的DNA一般在20-50 Kb左右)。
    2.37℃放置15分钟使DNA充分变性。
    3.立即在DNA溶液中加入500μl溶液B工作液,轻柔颠倒混匀。
    4.55℃避光保温8-16小时。如果使用水浴或没有热盖的PCR仪器保温,最好加50-100μL石蜡油,避免水分蒸发。
     注意:必须避光保温。55℃处理8小时足以使95%的C变成U,保温时间过长会引起DNA的断裂。如果有的区域的C难以转化成U,可以改用两步式PCR处理(每55℃保温3小时后95℃变性处理5分钟,共5-10个循环),效果会更佳。
    5.冰浴10分钟。
    6.加入1mL的通用溶胶液,颠倒混匀后取一半溶液上柱。单链DNA会结合在离心吸附柱上,亚硫*(代"酸")*盐等将穿透过柱。
    7.12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
    8.取另一半溶液再上柱,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。单链DNA会结合在离心吸附柱上,亚硫*(代"酸")*盐等将穿透过柱。
    9.加入0.7mL通用洗柱液,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。此步可以洗涤残留的亚硫*(代"酸")*盐。
    10.干甩半分钟后,将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入50μl新鲜配制的溶液A稀释液(5μl的溶液A原液与45μl的超纯水混合而得),室温放置2分钟后离心半分钟。
    11.将洗脱下来的DNA溶液放置在37℃保温15分钟。
    12.加入0.7mL的通用溶胶液,混匀后上柱。
    13.12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。单链DNA会结合在离心吸附柱上,杂质等将穿透过柱。
    14.干甩半分钟后,将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入50μl DNA洗脱液,室温放置2分钟后离心半分钟。
    15.所得溶液即为亚硫*(代"酸")*盐修饰的DNA,可以用于下面的甲基化专一PCR。
     说明:此方法的回收率一般为50%,2μg DNA最后可以得到1μg的修饰后的DNA。由于修饰后的DNA呈长短不一的单链,EB染色效果很差,所以不能用灵敏度低的琼脂糖电泳-EB染色的方法检测,但可以用灵敏度更高的PAGE-银染方法检测。

    Ⅱ.甲基化专一性PCR(以60μL的标准PCR反应体系为例)
    1.在一干净的PCR管中,加入下列成分(冰上操作):
    成分 样品管 对照管
    PCR MagicMix 3.0 30μl 30μl
    亚硫*(代"酸")*盐修饰的DNA模板 100-500ng
    对照DNA模板 100-500ng
    自备MSP引物F 25pmol
    自备MSP引物R 25pmol
    对照模板专一性PCR引物F 25pmol
    对照模板专一性PCR引物R 25pmol
    补水到 60μl 60μl

     注:有5种对照DNA模板可以供用户根据自身需要选择,详见自备试剂栏。
    2.将混合物混匀,放入PCR仪中进行热启动PCR,结束后取5-10μL PCR产品直接进行琼脂糖电泳。


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    ·血液游离DNA提取试剂盒(液体样品DNA提取试剂盒)
    编号:BTN121001
    英文名称:Free DNA extraction kit
    规格:50次
    本试剂盒是专门用于从各种微量和痕量样品中提取DNA和RNA的试剂盒。

    试剂盒特点:
    1. 核酸的回收率高,可以达到90%以上,可以跟QIAGEN的同类产品媲美。
    2.一管式操作,减少了样品污染的可能。
    3.一站式套装,除样品外客户不需要准备任何试剂,降低了实验误差。
    4. 安全无毒,不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
    5.可以处理各种形态的样品,包括液体样品,单个或少量的细胞,微小胚胎等等。
    6.与PCR、荧光PCR、RT-PCR、荧光RT-PCR等后续反应兼容。
    7. 试剂稳定,可以长期放置。

    试剂盒组成:
    成分 规格
    溶液A 15ml
    溶液B 25ml
    溶液C 55ml
    溶液D 5ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输,溶液A和溶液D需要4℃保存,溶液B和溶液C室温保存,有效期一年。溶液B和溶液C具有挥发性,使用后需要将瓶盖拧紧。

    使用方法:
    1. 将不超过0.1mL的样品转移到自备的1.5mL旋盖塑料离心管中。
    2. 加入0.3mL溶液A,盖上盖子后振荡3-5秒。注意:溶液A用前需37℃-65℃水浴融化并充分摇匀后方可使用。
    3.室温静置10分钟。
    4. 加入0.4mL溶液B,盖上盖子后振荡3-5秒。
    5. 15000g室温离心15分钟。强烈建议在离心管管壁上用记号笔做简单标记以区别离心面和向心面。
    6.小心移弃上清。注意不要触及离心面管底的核酸沉淀。
    7. 加入1.0mL溶液C,振荡数秒后15000g室温离心5分钟。注意:将离心管放入离心机时一定要将离心面向外。
    8.小心移弃上清。注意不要触及离心面管底的核酸沉淀。
    9. 短暂离心数秒。注意:将离心管放入离心机时一定要离心面向外。
    10.小心移弃残留上清(残留的溶液C会影响后续反应)。此时管壁(离心面方向)上将有可见的膜状沉淀。
    11. 加入100μl溶液D,用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀,使其溶解。溶解液如果混浊或有少量不溶物是正常现象,不溶沉淀物中就裹含有核酸。
    12. 直接取适量样品用于PCR或RT-PCR,也可短期保存于-20℃或-80℃。


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