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940
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 英文名:
LB Petri Dish(Amp)
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的即用型LB平板培养基(含Amp)现货供应用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多即用型LB平板培养基(含Amp)等一次性新鲜培养基产品请联系我司咨询订购。
名称:即用型LB平板培养基(含Amp)现货供应
规格:10块
英文名:LB Petri Dish(Amp)
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:BTN130848B
本产品为即用型LB平板培养基,A型为无抗生素LB平板,B型为LB-Amp平板,C型为LB-Kan平板,LB-Tet平板。
储存条件:低温运输及保存,有效期半年。
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·牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)
编号:BTN120404
英文名称:Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal
规格:500U
牛小肠碱性磷酸酶与E.coli来源的碱性磷酸酶相同,催化所有磷酸单酯的水解,不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解,对ATP等的焦磷酸键水解速度较慢。由于CIAP处理后的DNA片段缺少连接酶所要求的5´磷酸末端,因此它们不能进行自连接。这个特性可以在克隆时降低载体DNA的背景。
产品用途:
1.去除载体DNA片段的5´-末端的磷酸基;
2.防止克隆载体的自连接;
3.蛋白质丝*酸、苏*酸和酪*酸的去磷酸化;
4.为5´末端标记准备模板。
产品组成:
| 成份 | 规格 |
| CIAP(10~30U/μl) | 500U |
| 10×CIAP Buffer | 0.5mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:在37℃、pH9.8的条件下,1分钟内水解对硝基*(代"*")磷酸盐生成1μmol的对硝基*(代"*")酚所需要的酶量定义为1个活性单位。
纯度:
1.30 U的本酶和1μg的λDNA-Hind III片段在37℃下反应16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2.30 U的本酶和1μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
3.18 U的本酶和1μg的16S,23S rRNA在37℃下反应16小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
使用举例:
1.在微量离心管中配制50μL反应体系:
| 成分 | 加入量 |
| DNA Fragment in TE Buffer | 1~20pmol |
| 10×CIAP Buffer | 5μl |
| CIAP(10~30units/μl) | 1-2μl |
| 补水到 | 50μl |
2.37℃或50℃反应30分钟。或者先37℃反应15分钟,再50℃反应15分钟。注意:单链DNA和具有5´突出末端的DNA在较低温度下(如37℃)即可去磷酸化,而具有3´突出末端的DNA或平末端DNA需要较高温度(如50℃)才能去磷酸化。
3.*酚/*仿/异戊醇(25:24:1)抽提2次。注意:如果早在*酚抽提之前,用自备的蛋白酶K降解CIAP酶,则效果更好。具体做法是:加入EDTA和SDS使其终浓度为5mM EDTA和0.5% SDS,最后加入蛋白酶K溶液,使其终浓度为50μg/mL,然后56℃处理30分钟,再75℃孵育10分钟。然后用于*酚/*仿/异戊醇抽提。
4.*仿/异戊醇(24:1)抽提1次。
5.添加2.5μl的3M NaCl(终浓度150mM)。
6.添加125μl的(2.5倍量)冷乙醇,在-20℃下放置30~60分钟。
7.13000g离心20分钟后,小心去上清。
8.用1mL 75%乙醇洗涤一次。
9.干甩数秒,小心吸弃上清。
10.用20μl以下的TE Buffer溶解DNA沉淀待用或放-20℃长期放置。
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