目录号:E028-02A
产品描述:
本制品是将PCR反应所需的HotStart Taq Plus酶、dNTPs、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物。使用时只需加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操作过程中的污染。本制品所使用的HotStart Taq Plus是经特殊工艺处理后的Taq酶,在加热至高温前,其聚合酶活性被抑制,从而抑制低温条件下由引物非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。
本制品适用于高特异性PCR反应、Multiplex PCR、高GC含量(>60%),有二级结构等有较强背景的基因组扩增和大规模基因组扩增检测。
产品特点:
简便:与常规热启动酶反应条件一致,无需改变扩增程序。
高效:有效减少了杂带及拖带产生,从而实现高特异性的PCR(图例一)。
灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
稳定:经测试,反复冻融40次后,扩增性能仍不受影响。
快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。
产品用途:
1)高特异性PCR反应;
2)复杂模板扩增;
3)Multiplex PCR;
4)基因组扩增检测;
5)大片段PCR扩增反应 (可达20kb)。
使用建议:
使用本制品扩增得到的PCR产物具有3´端"A"突出,因此可直接克隆于T载体中。
保存温度:
-20℃
注意事项:
1)需溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。
2)应根据实验目的选择合适的循环数,循环数过少,会造成扩增量不足。循环数过多,扩增量增加,但突变率会增加,并造成非特异性扩增。
3)根据引物Tm值设置合适的退火温度,退火温度过低,会造成非特性扩增。退火温度过高,可能扩增不到目的条带。
应用实例:
图例)50μl扩增体系中,以50ng人基因组DNA为模板,对特定基因片段(170bp)进行高特异性扩增。
泳道M:DNA Ladder 2000;
泳道1:2×Taq Master Mix;
泳道2:2×HotStart Taq Plus Master Mix。
参考文献:
The pathway of recombining short homologous ends in Escherichia coli revealed by the genetic study[J]. Yuqing Yang. et al. Molecular Microbiology. 2021.
New records of Ulva spp. (Ulvophyceae, Chlorophyta) in China, with special reference to an unusual morphology of U. meridionalis forming green tides[J]. Wei Feng Xie. et al. EUROPEAN JOURNAL OF PHYCOLOGY. 2020.
T5 exonuclease-dependent assembly offers a low-cost method for efficient cloning and site-directed mutagenesis[J]. Yongzhen Xia et al. Nucleic Acids Research. 2018.
SPOP promotes ATF2 ubiquitination and degradation to suppress prostate cancer progression[J]. Jian Ma et al.Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. 2018.
For research use only.