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包涵体蛋白复性
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包涵体蛋白复性条件研究服务 利用原核系统进行蛋白质表达是获得重组蛋白最经济、有效的方式之一。但外源蛋白质在原核细胞中容易形成包涵体,这一特点为获得有活性的蛋白带来了很大的困难。相对于目标蛋白的可溶性表达而言,包涵体表达也具有若干额外的优势,如有利于纯化、目标蛋白质不易被降解等。因此得到包涵体表达的目标蛋白后第一需要考虑的是如何通过复性获得正确折叠的蛋白。
要将包涵体蛋白成功复性需要考虑很多因素,为了摸索出一种合适的复性方案,往往需要付出大量烦琐艰苦的工作。欣百诺生物公司的蛋白质专家群在蛋白质复性领域中积累了十几年的经验,建立了一套系统的蛋白质复性/包涵体蛋白复性研究体系。此套体系允许比较同步进行的20种不同的复性条件,从而定量分析影响蛋白质复性/包涵体蛋白复性过程的诸多因素,推导出特定蛋白包涵体复性的最佳方案。
通过欣百诺包涵体复性研究体系,可以同时比较诸如蛋白质起始浓度、氧化还原电对、离子强度、不同盐离子、蛋白质聚集抑制剂、pH、表面活性剂、变性剂去除速度等因素与复性效率的相关性。
利用该包涵体复性研究体系,欣百诺已经成功的复性了近100种大肠杆菌表达的包涵体蛋白,涉及细胞因子、可溶性受体、胞质蛋白、核蛋白等。
当然,并非所有的包涵体蛋白都能够成功地进行复性,欣百诺生物公司还提供包括酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞等真核表达体系,最大限度的满足您的科研要求。·包涵体蛋白复性——步骤 1. 包涵体制备: 可以由欣百诺公司制备或者由客户提供。·包涵体蛋白复性——步骤2. 包涵体溶解: 根据蛋白质不同的性质,我们可以选择尿素、盐酸胍、去垢剂、极端pH等,以保障最大程度的获得单体状态的变性蛋白。时间:1周·包涵体蛋白复性——步骤3. 小规模复性实验:欣百诺公司将为您提供20种不同组合条件复性的目标蛋白,供您进行功能检测。时间:1周·包涵体蛋白复性——步骤4. 小规模制备: 根据客户反馈的数据,欣百诺公司将提供合理的分析、判断,进一步拟定合适的复性条件,并按照拟定的复性条件,为客户制备5~10mg复性好的目标蛋白。时间:1周·包涵体蛋白复性——步骤5. 大规模复性工艺研究: 根据您反馈的功能检测结果,欣百诺公司可为您提供一套合理的大规模复性方案,并提供一定量的复性蛋白。时间:3-4周
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