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EZ-Blunt™ Blunt
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EZ-Blunt™ Blunt-end Ligation Kit
大量
上海康朗生物科技有限公司
ml/盒
EZ-Blunt™ Ligation Kit是高效、便利的平末端DNA片段克隆专用试剂盒,用于克隆由Pfu、Pfx、Pwo、Phusion、Pyrobest或KOD等高保真DNA聚合酶催化反应的平末端PCR产物,以及限制性内切酶消化或DNA聚合酶补平得到的平末端线性DNA片段。EZ-Blunt™载体是基于pBlueScript II SK(+)质粒,经EcoRV酶切、纯化等处理后获得的平末端线性载体,具有5· -端磷酸根和3· -端羟基。EZBlunt™载体不含NdeI或NcoI限制性内切酶位点,故可用于克隆含上述酶切位点的基因;其多克隆位点适合于插入片段的亚克隆。本试剂盒提供的EZ-Blunt™连接酶在高效连接的同时减少了使用普通DNA连接酶常见的载体自身环化问题,提高插入片段的连接效率。试剂盒还提供600 bp 平端PCR产物(EZ-Blunt™ Control Insert)作为连接反应的阳性对照。用本试剂盒克隆约1 kb大小PCR片段的蓝斑率(即自连率)通常低于30%。受载体自身大小的限制,本产品不适于克隆3 kb以上的PCR产物。DNA测序建议使用M13 Forward和M13 Reverse或T7 promoter和T3 promoter 通用型引物。用途· 无EcoRV位点的平末端PCR产物的克隆和测序· 利用载体的酶切位点,方便亚克隆· 利用lac promoter进行基因表达特点
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