StarPure Endo-free Plasmid Min

StarPure Endo-free Plasmid Miniprep Kit

内毒素（endotoxin or lipopolysaccharides, LPS）是构成革兰氏阴性菌细胞壁的主要组成成分，对原代细胞和实验动物有强烈的毒性，是造成转染实验失败的主要原因之一。由于内毒素聚合物的分子量大小和带电性与质粒DNA和部分蛋白质十分相近，很难用离子交换柱、硅胶膜吸附柱、凝胶过滤、氯化铯超速离心等常规纯化方法有效去除，因而提取的质粒DNA或蛋白质样品中往往有大量内毒素污染，最高可达1,000~1,500 EU/μg质粒。
StarPure无内毒素质粒小提试剂盒可最大限度地去除质粒DNA样品中的内毒素，以保证对不同的细胞系都能获得稳定的转染效果。本产品采用改良的碱裂解－中和法，结合硅胶膜吸附技术和内毒素清除剂，使质粒DNA获得高效、专一的吸附，再通过去蛋白液和漂洗液去除基因组DNA、蛋白等其他杂质，最后通过低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净的质粒DNA从硅基质膜上洗脱下来。该方法提取的质粒DNA无基因组DNA、RNA、蛋白质污染，内毒素清除率在90%以上；通常每4 ml过夜培养的菌液中可提取出10 μg以上的高纯度高拷贝质粒DNA，可直接用于转染真核细胞、荧光测序、酶切、PCR、转化、体外转录等各种常规分子生物学实验。本试剂盒适宜提取各种大小的质粒，对20 kb以下的质粒效果更佳。

用途

• 真核细胞转染
• 实验动物注射
• 常规分子生物学应用，如酶切、PCR、测序、转化、体外转录等

特点

• 高纯度：OD260/280=1.8~2.0，无基因组DNA、RNA和蛋白质污染，内毒素清除率达90%以上
• 操作安全：无需苯酚/氯仿抽提或乙醇沉淀
• 批次稳定：采用质量可靠的进口硅胶吸附膜，遵循标准化生产流程，通过严格质检标准

产品组分及保存条件

成分	总量	保存条件
细胞悬浮液（S1）	10 ml	室温；加入RNase A后，于4℃保存，有效期半年
细胞裂解液（S2）	20 ml	用毕立即盖紧瓶盖，如有结晶析出可于55℃水浴加热助溶
中和缓冲液（N3）	15 ml	室温保存一年
膜结合液（MB）	35 ml	同上，有结晶析出可于55℃水溶匀，勿直接接触皮肤
去蛋白液（PR）	30 ml	室温保存一年
浓缩漂洗液（WB）	20 ml	室温保存一年。初次使用前加入35ml 无水乙醇混匀
洗脱缓冲液（EB）	10 ml	室温保存一年
RNase A溶液	100 μl	室温保存六个月，-20 ℃保存一年
内毒素清除剂（ER）	5 ml	4℃保存一个月，-20 ℃长期保存，使用前充分混匀，如出现分层，可冰浴后混匀使用
离心吸附柱及收集管	50套	室温密闭干燥保存