- ¥402
- 康朗生物
- 大陆/美国
- KL207-01
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温；加入RNase A后，于4℃保存，有效期半年
- 保质期：
室温；加入RNase A后，于4℃保存，有效期半年
- 英文名：
StarPure Endo-free Plasmid Miniprep Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 规格：
ml/盒
内毒素（endotoxin or lipopolysaccharides, LPS）是构成革兰氏阴性菌细胞壁的主要组成成分，对原代细胞和实验动物有强烈的毒性，是造成转染实验失败的主要原因之一。由于内毒素聚合物的分子量大小和带电性与质粒DNA和部分蛋白质十分相近，很难用离子交换柱、硅胶膜吸附柱、凝胶过滤、氯化铯超速离心等常规纯化方法有效去除，因而提取的质粒DNA或蛋白质样品中往往有大量内毒素污染，最高可达1,000~1,500 EU/μg质粒。
StarPure无内毒素质粒小提试剂盒可最大限度地去除质粒DNA样品中的内毒素，以保证对不同的细胞系都能获得稳定的转染效果。本产品采用改良的碱裂解－中和法，结合硅胶膜吸附技术和内毒素清除剂，使质粒DNA获得高效、专一的吸附，再通过去蛋白液和漂洗液去除基因组DNA、蛋白等其他杂质，最后通过低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净的质粒DNA从硅基质膜上洗脱下来。该方法提取的质粒DNA无基因组DNA、RNA、蛋白质污染，内毒素清除率在90%以上；通常每4 ml过夜培养的菌液中可提取出10 μg以上的高纯度高拷贝质粒DNA，可直接用于转染真核细胞、荧光测序、酶切、PCR、转化、体外转录等各种常规分子生物学实验。本试剂盒适宜提取各种大小的质粒，对20 kb以下的质粒效果更佳。
用途
• 真核细胞转染
• 实验动物注射
• 常规分子生物学应用，如酶切、PCR、测序、转化、体外转录等
特点
• 高纯度：OD260/280=1.8~2.0，无基因组DNA、RNA和蛋白质污染，内毒素清除率达90%以上
• 操作安全：无需苯酚/氯仿抽提或乙醇沉淀
• 批次稳定：采用质量可靠的进口硅胶吸附膜，遵循标准化生产流程，通过严格质检标准
产品组分及保存条件
| 成分 | 总量 | 保存条件 |
| 细胞悬浮液（S1） | 10 ml | 室温；加入RNase A后，于4℃保存，有效期半年 |
| 细胞裂解液（S2） | 20 ml | 用毕立即盖紧瓶盖，如有结晶析出可于55℃水浴加热助溶 |
| 中和缓冲液（N3） | 15 ml | 室温保存一年 |
| 膜结合液（MB） | 35 ml | 同上，有结晶析出可于55℃水溶匀，勿直接接触皮肤 |
| 去蛋白液（PR） | 30 ml | 室温保存一年 |
| 浓缩漂洗液（WB） | 20 ml | 室温保存一年。初次使用前加入35ml 无水乙醇混匀 |
| 洗脱缓冲液（EB） | 10 ml | 室温保存一年 |
| RNase A溶液 | 100 μl | 室温保存六个月，-20 ℃保存一年 |
| 内毒素清除剂（ER） | 5 ml | 4℃保存一个月，-20 ℃长期保存，使用前充分混匀，如出现分层，可冰浴后混匀使用 |
| 离心吸附柱及收集管 | 50套 | 室温密闭干燥保存 |
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文献和实验Miniprep/Kit-free high-throughput protocol
.--Kathleen) and yields DNA that is clean enough for sequencing or for use as a PCR template. Protocol Transfer 1.5 mL of an overnight culture containing your plasmid to an eppendorf tube and spin at 5000 rpm for 5 min in a tabletop centrifuge
E.Z.N.A. Endo-Free Plasmid Mini Kit II Spin Protocol
with occasional mixing. Avoid vigorous mixing as this will shear chromosomal DNA and lower plasmid purity. (Store Solution II tightly capped when not in use.) 4. Add 250 ul ice-cold Buffer N3 and mix gently but throughly by inverting tube several times
E.Z.N.A.® Endo-free Plasmid Mini Kit I Spin Protocol
实验步骤 1. Inoculate 5ml LB/ampicillin (50 ug/ml) medium placed in a 10-20 ml culture tube with E.coli carrying desired plasmid and grow at 37°C with agitation for 12-16 h. It is strongly recommended that an endA negative
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