- ¥275 - 2203
- 康朗生物
- 大陆/美国
- KL124-01
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃恒温保存一年
- 保质期：
-20℃恒温保存一年
- 英文名：
LongTaq DNA Polymerase
- 库存：
大量
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 规格：
ml/盒
GenStar LongTaq DNA Polymerase系在Taq酶的基础上，按最佳比例混合了具有3＇→5＇端DNA外切酶活性（即校读活性）的高保真DNA聚合酶，并且配备精心优化的反应缓冲液，可高效扩增以基因组DNA、cDNA、质粒等为模板的10 kb以上的长片段DNA。本产品适用于构建基因图谱、克隆长片段DNA等。使用LongTaq DNA聚合酶扩增的一部分PCR产物3＇末端附有突出的A碱基，可直接进行T载体克隆，加A处理后可提高TA克隆效率。虽然LongTaq DNA Polymerase对低于10 kb的DNA片段的扩增效率接近HiFiTaq DNA Polymerase（Cat No. A116），但其保真性略低于HiFiTaq DNA Polymerase。因此在扩增对保真性要求较高的10 kb以下的目的片段时，建议根据片段大小和模板特点选择适当的高保真DNA聚合酶。
用途
· 超长DNA片段扩增
特点
· 超长片段扩增：基因组模板可扩增10 kb以上长片段；l DNA模板可扩增30 kb片段
· 较高保真性：不含PCR反应增强剂，最大限度地保持保真性
· 批次稳定：遵循标准化生产流程，经过严格的质量检测
产品组分
LongTaq DNA Polymerase (5 U/μl) 100 μl
10 × LongTaq PCR Buffer 1 ml
保存条件
-20℃恒温保存一年
活性定义
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃、30分钟内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量定义为1个活性单位（U）。
质量控制
· 以10 pg l DNA为模板，可高效扩增30 kb的DNA片段
· 无内切酶、外切酶污染
· PCR检测无残留宿主基因组DNA
· 室温存放一周无明显活性降低
FAQ
Q1: LongTaq酶有什么优势？
A1:LongTaq酶是由具有高效扩增能力的Taq酶与具有校读活性的高保真酶按最佳比例混合而成的。在适当的缓冲体系中，引物的延伸主要由Taq酶高效催化完成；一旦出现错配后，高保真酶即发挥其校对功能，通过其3＇→5＇端DNA外切酶活性去除错配碱基，使DNA链继续延伸。因此LongTaq酶将两种酶的优势互补，在不降低扩增效率的情况下提升了保真性。
Q2: LongTaq与HiFiTaq DNA聚合酶有什么不同？
A2:LongTaq 和HiFiTaq DNA聚合酶都是混合型酶，但缓冲液成分不同。LongTaq适合于扩增超长片段，在扩增10 kb以上片段的能力上明显优于HiFiTaq，但保真性有所损失。HiFiTaq通常用于对扩增保真性要求较高、而Pfu等高保真酶无法扩增或扩增效率低下的目标片段。
Q3: 长片段PCR成功的关键因素？
A3: 模板DNA的纯度和完整性是长片段PCR成功的关键。扩增10 kb以上的DNA片段时，应采用高质量的DNA提取试剂或试剂盒制备模板DNA，而不能采用加热或蛋白酶消化法粗提的DNA。同时引物的设计也至关重要。建议引物的长度在30个碱基左右，以保证其特异性。
Q4: LongTaq酶的PCR产物适合做TA克隆吗？
A4: 商业化T载体通常在3~4 kb之间，当插入片段长度接近或大于载体大小时，连接效率将显著降低。LongTaq通常用于扩增10 kb以上的长片段，因此不适于普通T载体克隆。长片段PCR产物可通过酶切直接连接到较大的目标载体上，或者通过TA克隆方法连接到长片段PCR产物专用载体上（如需相关资料可来电索取）。
应用实例
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文献和实验We report a simple homogeneous fluorescence assay for quantification of DNA polymerase function in high throughput. The fluorescence signal is generated by the DNA polymerase triggering opening of a molecular beacon extension of the template
The Polymerase Chain Reaction (PCR)
. Did He Really Invent PCR? • The basic principle of replicating a piece of DNA using two primers had already been described by Gobind Khorana in 1971:– Kleppe et al. (1971) J. Mol. Biol. 56, 341-346. • Progress was limited by primer synthesis and polymerase
能催化从四种5′-脱氧核苷三磷酸游离出焦磷酸而使DNA进行聚合反应的酶。EC2.7.7.7.。必须以DNA为模板，合成的DNA与模板具有互补的碱基排列（碱基互补性）。是与DNA复制和修复有关的重要的酶，虽可从许多组织分离出来，但对大肠杆菌的这种酶的研究较为先进。康伯格（A.Kornberg，1958）最初从大肠杆菌将此酶纯化，并弄清了其结构和特异性，但以后经过分子遗传学的研究，已明确了这种酶主要与DNA修复有关。因此重新进行与DNA复制有关酶的检索，发现两种新的酶。康伯格最初发现的酶称为
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