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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃恒温保存一年,避免反复冻融。
- 保质期:
-20℃恒温保存一年,避免反复冻融。
- 英文名:
2×SuperStar Plus High-GC PCR Mix Loading Dye-free
- 库存:
大量
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 规格:
ml/盒
本产品为预混的含有优化浓度的SuperStar Plus超保真DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+、高GC反应缓冲液以及稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液,适用于对保真性要求高的DNA片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变、SNP分析等,也可用于DNA片段的末端补平。本产品具有快速简便、灵敏度高、稳定性好等优点,使用时只需加入DNA模板和引物,并用水补足体积,可最大限度地减少人为误差、节约时间、降低污染几率。PCR产物无3’端突出碱基,不可直接用于TA克隆。
SuperStar Plus超保真DNA聚合酶是是一种带有DNA结合域的超保真快速耐热聚合酶,具有5’®3’DNA 聚合酶活性和3’®5’的外切酶活性(即校读活性),能够纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配现象。
本产不含染料(无色)。产品在PCR反应完成后,需添加上样缓冲液后进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。
【适用范围】
高保真扩增,快速扩增。
高GC含量、具有二级结构的复杂模板的扩增。
【产品组分】
2 x SuperStar Plus High-GC PCR Mix 1 ml
ddH2O 1 ml
【保存条件】
-20℃恒温保存一年,避免反复冻融。
注:如保存温度长期低于-30度或遇干冰急冻,本产品颜色会变浅直至变黄(与急冻程度相关)。经测试,该变化不影响使用效果。
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文献和实验5 min 结果:可见Bioteke 2×power Taq PCR MasterMix试剂对于原核或真核生物DNA均可高效。相较于同类的taq mix的扩增效率更高,且对于高GC含量也可得到很好的扩增。取扩增产物10 μL用1%琼脂糖凝胶电泳如图可见明亮条带。 三、 cDNA扩增 人类胎盘提取的总RNA反转录的cDNA扩增1.2 kbp片段 模板:人类胎盘提取的总RNA反转录的cDNA 200 ng/50 μL Primer: PrimerF
PCR引物设计和优化(PCR PRIMER DESIGN AND REACTION OPTIMISATION)
the amplification of high (G+C) templates (Smith et al., 1990)。 Polyethylene glycol (PEG) may be a useful additive when DNA template concentration is very low: it promotes macromolecular association by solvent exclusion, meaning the pol can find the DNA. cDNA PCR
关于扩增酶和产物大小应注意: •对于小于4kb的产物使用Taq DNA聚合酶或Platinum Taq DNA聚合酶 •对于小于12kb的产物使用Platinum Pfx Taq DNA聚合酶或Platinum Taq DNA Polymerase High Fidelity •对于大于12kb的产物使用ELONGAE® Enzyme Mix •对于一步法RT-PCR,如果产物小于3.5kb,使用Taq
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