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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海研谨生物
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 器官来源:
绒毛膜癌
货号:HEMCL-020
细胞介绍
这是一株超三倍体人类细胞株。其典型染色体数为71,发生率为34%,多倍体率为2.6%。
细胞特性
- 来源:绒毛膜癌
- 形态:上皮细胞样
- 含量:>1x106 个/mL
- 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
- 规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
细胞接受后的处理:
- 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
- 请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
- 弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。
- 如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
- 接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
细胞用途:仅供科研使用。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
- 准备MEM培养基(GIBCO,货号41500034,添加NaHCO3 1.5g/L,丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
- 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
- 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
- 细胞处理:
- 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
- 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
- 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
- 轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。
- 移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
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文献和实验最初,用0.25%胰酶消化液传代,细胞脱壁容易,但是,吹打细胞180次左右,也只有80%细胞是单个细胞,而且,易引起细胞机械性损伤。于是,我改进方法。 现在,我的处理如下: 弃旧培养液 0.02%EDTA作用2分钟 弃EDTA 0.1%胰酶作用30秒 弃胰酶,继续消化2分钟 加培养液终止消化。一般吹打细胞30-40次,细胞基本为单个。 EDTA是一种化学螯合剂,主要作用主任已说。我要提醒一下:EDTA作用不受血清抑制,故消化后需彻底清除,否则影响细胞生长。 建议:可能的话离心
人睡了,癌细胞却醒了!Nature 研究刷新认知:睡觉时,癌细胞竟会加速增殖和转移
导读 多年来,癌症一直是对人类健康最大的威胁之一。尽管在临床护理和癌症生物学领域有许多发现和进步,但我们对这种疾病的认知仍然存在局限性。在癌症发展过程中出现的许多现象中,最重要的可能是癌症的转移过程,即癌细胞脱离原发肿瘤,通过血管在体内传播并在其他器官中形成新的肿瘤,90% 的癌症死亡都与转移有关。 前期的研究发现,肿瘤的转移扩散是通过循环肿瘤细胞(Circulating tumour cells, CTCs)的血液播散实现的。CTCs 从生长的肿瘤中脱落,即使在恶劣的循环系统中也能保持增殖
「癌」在英语中与「蟹」是同一个词,意思是癌细胞的生长像蟹一样,伸出魔爪侵入周围组织,并可向远处转移、扩散。 癌与蟹 癌症的原发肿块并不可怕,尤其是在早期外科手术可以完全摘除。之所以令人「谈癌色变」,是由于癌细胞的转移和扩散。癌细胞一旦发生转移和扩散便发展到了几乎无可救药的地步。癌细胞转移是一种很奇特的现象,首先,癌细胞在原位长大后,只有一部分会随着淋巴或血液离开原始部位,其它的会原地不动,并逐渐死去;其次,癌细胞离开原位后,并不是任性的在身体的各个地方
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