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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 细胞类型:
肿瘤细胞/正常细胞
- 组织来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详询客服人员
- 物种来源:
大鼠
- 免疫类型:
详询客服人员
- 细胞形态:
成纤维细胞样
- 器官来源:
详询
- 运输方式:
常温运输
- 年限:
长期保持
- 生长状态:
良好
细胞名称:H9c2(2-1) 大鼠心肌细胞
组织来源:心脏,心肌层
培养条件:DMEM +10% FBS
形 态:贴壁;成肌细胞样
背 景:该细胞由Kimes B和Brandt B从BD1X大鼠胚胎心脏组织的克隆细胞株亚克隆得到;表现出许多骨骼肌的特性。这个细胞株中的成肌细胞能融合形成多核的肌管,并对乙酰胆碱的刺激发生反应。如果培养基中的血清浓度下降到1%,融合发生得很快。
购买细胞注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通交流。
贴壁细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5-6ml完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
悬浮细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数细胞培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验首先,它肯定不同于原代细胞系的,最大的区别,原代的心肌细胞基本不能分裂,而H9C2可以分裂,最大的区别了吧!原代心肌细胞会跳动,你的H9C2不会吧。虽然都是梭形的,但是H9C2来源于胚胎期心脏,而心肌细胞一般用新生大鼠分离获得。H9C2与原代心肌细胞有那么大区别,当然不能替代它,所以在研究方向上,你要根据自己的实验需求选择自己合适的细胞,一般来讲呢,如果你研究与心脏相关的信号通路,我建议你还是选用细胞系,因为它可以分裂,获得细胞容易,而且,因为H9C2展现一些成肌细胞特性,所以一般文章都说H9C2
luking2006 我用H9C2心肌细胞系做心脏的自噬研究,想请教细胞系传代次数多>30代,会对实验结果造成影响吗?看到有文献说细胞系传代多了会引起基因表达的改变。是这样吗?很急切,先谢谢大家了。我前期用传代多的细胞系做出的实验结果和大体的不一致,不知是不是这个原因。 anyi63 我们用的是h9c2细胞株,细胞系是细胞株50代以后遗传突变带癌细胞特点,有可能在培养条件下无限传下去 cxc11
紫石榴 最近在研究心肌缺血对某microRNA的调控,有文献报道在原代细胞中随时间下调,我用的是H9c2心肌细胞系做的,想做个验证,顺便找最佳干预点。考虑经费问题,所以先用RT-PCR的方法做趋势,再上real time。我是提取总RNA,定量后(量和纯度都还好),用过茎环引物逆转录,再PCR电泳的,但做出的结果与设想趋势不符,且重复性很差,不知道哪里不对。麻烦高手指导下。 版主zhujoker留言: RT-PCR这种半定量是不可
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