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大量
- 细胞类型:
肿瘤细胞/正常细胞
- 组织来源:
详询
- 相关疾病:
详询人员
- 物种来源:
鼠源
- 细胞形态:
正常
- 器官来源:
详询
- 运输方式:
常温运输
- 年限:
长期保持
- 生长状态:
良好
细胞名称:PA317 小鼠成纤维细胞
组织来源:胚胎
培养条件:DMEM +10% FBS
形 态:贴壁;成纤维细胞样
背 景:PA317细胞株源自TK- NIH/3T3细胞,通过pBR322中的包装结构DNA(pPAM3)和pBR322中的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因共同转染构建而成。 通过感染或转染将逆转录病毒载体导入这些细胞,结果生成可以感染许多哺乳动物细胞的双嗜性载体颗粒。 这株细胞生成的病毒颗粒已成功地用于将基因导入人类。 可能因为用于构建这株细胞而转入的DNA丢失,能够包装逆转录病毒载体的PA317细胞百分比随传代而减少。 在包含0.03 mM 次黄嘌呤, 0.001 mM 氨甲喋呤和0.02 mM 胸苷的培养基中短暂(大约5天)选择,可以选出保留了包装功能的细胞。 选择后,细胞应在HT培养基(0.03 mM 次黄嘌呤,0.02 mM 胸苷)中培养4天,以稀释残留的氨甲喋呤。
PubMed=3518877; DOI=10.3109/07357908609038260
Fogh J.
Human tumor lines for cancer research.
Cancer Invest. 4:157-184(1986)
PubMed=3940644
Brower M., Carney D.N., Oie H.K., Gazdar A.F., Minna J.D.
Growth of cell lines and clinical specimens of human non-small cell lung cancer in a serum-free defined medium.
Cancer Res. 46:798-806(1986)
PubMed=3945555; DOI=10.1093/nar/14.2.843
Valenzuela D.M., Groffen J.
Four human carcinoma cell lines with novel mutations in position 12 of c-K-ras oncogene.
Nucleic Acids Res. 14:843-852(1986)
PubMed=3129183
Hubbard W.C., Alley M.C., McLemore T.L., Boyd M.R.
Evidence for thromboxane biosynthesis in established cell lines derived from human lung adenocarcinomas.
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文献和实验*发表【中文论文】请标注:由上海盖宁生物科技有限公司提供;
*发表【英文论文】请标注:From Shanghai Gaining Biotechnology Co., Ltd.
逆转录病毒载体属RNA病毒,但可在受染细胞内反转录产生DNA互补链,此DNA单链可作为模板合成第二条DNA链,第二条DNA链可掺入细胞基因组DNA中。此病毒可利用宿主细胞的酶自行转录与复制,RNA可合成蛋白,再包装病毒,RNA从胞内释放,成为感染性病毒,该载体可经不同方式改变。介导过程可使病毒单拷贝基因组稳定地进入细胞。首先,逆转录病毒的繁殖必须要有适当的包装细胞系,以利于产生高滴度的病毒,同时还具有适当的结构。如:ψ2(第一代包装细胞),PA317(第二代包装细胞),ψ1-CRIP
7.淋巴瘤2株:LY-S, T2 8.乳腺癌1株:SK-Br-3 9.脑胶质母细胞瘤1株:BT325 10.胎盘绒毛膜上皮样癌1株:JAR 11.黑色素瘤1株:A375 12.人纤维肉瘤1株:HP 13.骨髓瘤细胞1株:SP2/0 14.病毒包装细胞2株:PA317, NIH3T3 15.其他:L929
tydyhan:我一直做细菌这块,对病毒操作不是很懂,请教大家:建立表达某基因的重组逆转录病毒载体的B16细胞系含某基因的重组逆转录病毒载体已获得,需转染PA 317包装细胞,通过G418筛选获得表达某基因的重组逆转录病毒。Polybrene进行转染B16细胞,筛选阳性转化克隆,获得稳定表达的B16细胞株。这里怎么具体进行操作??丁香园网友adychen认为:1、首先最好选择的是带EGFP逆转录病毒载体,方便以后的转染率和感染率的观察.2、重组载体;3、得出载体抗性基因的抗生素最佳细胞筛浓度
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