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- 百奥莱博
- 北京
- QN1079-IET
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
核/浆蛋白抽提试剂4
- 保质期：
长期
- 英文名：
Nuclear Protein Extraction Kit
- 库存：
682
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货核蛋白提取试剂盒厂家直销，我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商，立足北京，服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门，欢迎各位老师来电垂询订购。
名称：核蛋白提取试剂盒
品牌：百奥莱博
编号：QN1079
规格：50T|100T
产地：国产|进口
本核蛋白提取试剂盒提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白的方法。整个过程只需约60分钟就可以将核蛋白和浆蛋白从细胞中分离出来。得到的蛋白可以用于Western blot等实验。本试剂盒通过浆蛋白抽提试剂使细胞膨胀破裂，释放出胞浆蛋白，再通过离心得到细胞核。然后通过核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。本试剂盒可以抽提50/100个样品(每个样品约2×106个Hela细胞或40mg组织)。
体外培养细胞的操作方法(裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行)：
1．根据用量取适当的浆蛋白抽提试剂和核蛋白抽提试剂加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。PMSF需现用现加，若目标蛋白含有丰富的半胱*酸，可以在两种蛋白抽提液中加入DTT至终浓度0.5mM。
2．对于贴壁细胞，去除培养液，用PBS洗一遍，用细胞刮刀收集细胞，或用EDTA消化后吹打下细胞(最好不用胰酶硝化，以免胰酶消化目的蛋白)。500g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清留下沉淀备用。
3．对于悬浮细胞：用PBS洗一遍，500 g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清，留下细胞沉淀备用。
4．每20μl细胞沉淀加入200μl浆蛋白抽提试剂(2×106个细胞沉淀的体积约20μl或40mg)。
5．用移液器吹打或高速涡旋15秒(可适当延长)，必须使细胞沉淀完全分散开成单细胞悬液。细胞沉淀分散不完全会导致蛋白产量降低。
6．冰浴10分钟。
7．最高转速剧烈涡旋10秒，4℃，12000～16000g离心10分钟。
8．上清即为抽提得到的细胞浆蛋白，立即吸取上清至预冷的样品管中备用，进行后续的PAGE、Western等实验，但蛋白浓度较低，可根据需要进行相应浓缩。
9．沉淀即为细胞核，要完全吸尽残余的上清(避免细胞浆蛋白的污染)，加入50-100μl核蛋白抽提试剂。
10．用移液器吹打或高速涡旋15秒(可适当延长)至沉淀完全分散，冰浴10分钟。
11．最高转速剧烈涡旋10秒，4℃，12000～16000g离心10分钟。
12．立即吸取上清至预冷的样品管中，此即为抽提得到的细胞核蛋白。可进行后续实验或-70℃冻存。 对于组织样品：把组织称重后，尽可能切成非常细小的碎片，按每50mg组织加入200μl～500μl PBS，用匀浆器冰上匀浆制成细胞悬液，500g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清，收集沉淀。加入200μl浆蛋白抽提试剂后接上述步骤5。
注意事项：
1．裂解得到的蛋白样品，由于含有较高浓度的去垢剂干扰，不能用Bradford法测定蛋白浓度，可以选用本公司生产的BCA蛋白定量试剂盒(货号QN1075)测定蛋白浓度。
2．对于组织样品，本试剂盒适用于新鲜组织，对冻存组织抽提效果较差。
3．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件：核/浆蛋白抽提试剂4℃保存，PMSF于-20℃保存。
关键词：QN1079,核蛋白提取试剂盒,Nuclear Protein Extraction Kit
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文献和实验【求助】求助！！关于EMSA核蛋白提取过程中用到的100x Protease Inhibitor
要购买，而分别购买这些试剂的钱加起来可以买个核蛋白提取试剂盒了很不划算。有没有做EMSA的人啊，你们提核蛋白的Protease Inhibitor都怎么来的？ 有人用过上海生工的核蛋白提取试剂盒了，那个只要250元，提出来的效果怎么样? xhjggl 效果比较好，他们也有100x Protease Inhibitor卖 ，打折卖100x1ml 525元 月下独见 谢谢LS,这样看直接买核蛋白提取试剂盒还划算
owen79 哦了，感谢啊！ xhjggl 可以使用上海生工的以下产品来提取核和胞质蛋白 zhangqiang6612 我用的是碧云天的核蛋白提取试剂盒，6孔板的细胞，长到80%，每个孔所提的核蛋白基本都有条带的 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
以下操作按照天根产品 DP321 快捷型植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物叶片2. 研钵 液氮3. 移液器及配套无菌枪头（200 μl ，1ml），1.5 ml离心管4. 异丙醇，70%乙醇，干净吸水纸5. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机本文版权归天根生化科技（北京）有限公司所有,仅供个人学习使用,请勿转载
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